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mTOR shRNA慢病毒载体的构建及包装
被引量：
2
1
作者
游燊
涂旺招
王耀东
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第5期534-537,541,共5页
目的:构建mTOR shRNA慢病毒表达载体,为探讨RNA干扰技术抑制T细胞mTOR基因的相关研究奠定基础。方法:设计合成针对小鼠mTOR基因的shRNA片段,与酶切后的pLKD.UBC.GFP.U6载体片段进行连接并转化DH5α,提取阳性克隆质粒,测序,转染293T细胞...
目的:构建mTOR shRNA慢病毒表达载体,为探讨RNA干扰技术抑制T细胞mTOR基因的相关研究奠定基础。方法:设计合成针对小鼠mTOR基因的shRNA片段,与酶切后的pLKD.UBC.GFP.U6载体片段进行连接并转化DH5α,提取阳性克隆质粒,测序,转染293T细胞。通过GFP表达水平测定病毒滴度。结果:DNA测序结果及PCR鉴定证实成功构建小鼠mTOR-shRNA重组慢病毒载体,对其进行包装后测定慢病毒滴度为1.38E+08 TU/ml。结论:成功构建并包装小鼠mTOR-shRNA重组慢病毒表达载体。
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关键词
MTOR
SHRNA
慢病毒载体
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职称材料
eEF1A2在原发性肝细胞癌的表达
被引量：
1
2
作者
黄毅
邱福南
+4 位作者
陈敦雁
伍严安
李峰
黄肖利
吴文冰
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第12期2144-2150,共7页
目的:研究真核翻译延长因子1A2(e EF1A2)在原发性肝细胞癌(HCC)组织的表达,以及e EF1A2过表达对HCC细胞生物学行为的影响。方法:应用real-time PCR法和免疫组化法分别检测62例HCC癌组织与配对癌旁组织、20例正常肝脏组织e EF1A2的mRNA...
目的:研究真核翻译延长因子1A2(e EF1A2)在原发性肝细胞癌(HCC)组织的表达,以及e EF1A2过表达对HCC细胞生物学行为的影响。方法:应用real-time PCR法和免疫组化法分别检测62例HCC癌组织与配对癌旁组织、20例正常肝脏组织e EF1A2的mRNA和蛋白表达,应用real-time PCR法与Western blot法分别检测几种HCC细胞株e EF1A2的mRNA与蛋白表达。构建GV287-e EF1A2表达慢病毒感染低表达e EF1A2的HCC细胞,应用real-time PCR法和Western blot法分别检测细胞e EF1A2的mRNA和蛋白表达;应用MTT法、DNA倍体法和real-time PCR法分别检测细胞活力、细胞周期和白蛋白mRNA的表达。结果:HCC癌组织e EF1A2的mRNA表达水平和蛋白表达阳性率明显高于配对癌旁组织与正常肝脏组织(P<0.01);e EF1A2的mRNA和蛋白在HCC细胞株SMMC-7721和BEL-7402高表达,在SK-HEP-1低表达。构建的GV287-e EF1A2表达慢病毒可感染SK-HEP-1细胞使e EF1A2过表达;与阴性对照组相比,GV287-e EF1A2组SK-HEP-1细胞的活力升高,白蛋白的mRNA表达水平降低,G0/G1期的细胞比例显著减少,而S期和G2/M期的细胞比例显著升高。结论:e EF1A2在HCC癌组织存在异位高表达;e EF1A2可能是HCC的一种潜在癌蛋白,其过表达可增强HCC细胞的增殖能力,降低HCC细胞的分化程度,并促使细胞周期通过G0/G1期,进入S期和G2/M期。
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关键词
真核翻译延长因子1A2
肝细胞癌
细胞增殖
细胞周期
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职称材料
题名
mTOR shRNA慢病毒载体的构建及包装
被引量：
2
1
作者
游燊
涂旺招
王耀东
机构
福建
省立
医院
肝胆
外科
福建医科大学省立临床医学院肝胆外科
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第5期534-537,541,共5页
基金
福建省自然科学基金项目(2010J05053)
文摘
目的:构建mTOR shRNA慢病毒表达载体,为探讨RNA干扰技术抑制T细胞mTOR基因的相关研究奠定基础。方法:设计合成针对小鼠mTOR基因的shRNA片段,与酶切后的pLKD.UBC.GFP.U6载体片段进行连接并转化DH5α,提取阳性克隆质粒,测序,转染293T细胞。通过GFP表达水平测定病毒滴度。结果:DNA测序结果及PCR鉴定证实成功构建小鼠mTOR-shRNA重组慢病毒载体,对其进行包装后测定慢病毒滴度为1.38E+08 TU/ml。结论:成功构建并包装小鼠mTOR-shRNA重组慢病毒表达载体。
关键词
MTOR
SHRNA
慢病毒载体
Keywords
mTOR
shRNA
Lentivirus-vector
分类号
R392.1 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
eEF1A2在原发性肝细胞癌的表达
被引量：
1
2
作者
黄毅
邱福南
陈敦雁
伍严安
李峰
黄肖利
吴文冰
机构
福建医科大学
省立
临床
医学院
检验科
福建医科大学省立临床医学院肝胆外科
福建医科大学
省立
临床
医学院
病理科
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第12期2144-2150,共7页
基金
福建省卫生系统中青年骨干人才培养项目(No.2013-ZQN-JC-2)
福建省科技计划重点项目(No.2014Y0009)
文摘
目的:研究真核翻译延长因子1A2(e EF1A2)在原发性肝细胞癌(HCC)组织的表达,以及e EF1A2过表达对HCC细胞生物学行为的影响。方法:应用real-time PCR法和免疫组化法分别检测62例HCC癌组织与配对癌旁组织、20例正常肝脏组织e EF1A2的mRNA和蛋白表达,应用real-time PCR法与Western blot法分别检测几种HCC细胞株e EF1A2的mRNA与蛋白表达。构建GV287-e EF1A2表达慢病毒感染低表达e EF1A2的HCC细胞,应用real-time PCR法和Western blot法分别检测细胞e EF1A2的mRNA和蛋白表达;应用MTT法、DNA倍体法和real-time PCR法分别检测细胞活力、细胞周期和白蛋白mRNA的表达。结果:HCC癌组织e EF1A2的mRNA表达水平和蛋白表达阳性率明显高于配对癌旁组织与正常肝脏组织(P<0.01);e EF1A2的mRNA和蛋白在HCC细胞株SMMC-7721和BEL-7402高表达,在SK-HEP-1低表达。构建的GV287-e EF1A2表达慢病毒可感染SK-HEP-1细胞使e EF1A2过表达;与阴性对照组相比,GV287-e EF1A2组SK-HEP-1细胞的活力升高,白蛋白的mRNA表达水平降低,G0/G1期的细胞比例显著减少,而S期和G2/M期的细胞比例显著升高。结论:e EF1A2在HCC癌组织存在异位高表达;e EF1A2可能是HCC的一种潜在癌蛋白,其过表达可增强HCC细胞的增殖能力,降低HCC细胞的分化程度,并促使细胞周期通过G0/G1期,进入S期和G2/M期。
关键词
真核翻译延长因子1A2
肝细胞癌
细胞增殖
细胞周期
Keywords
Eukaryotic elongation factor 1A2
Hepatocellular carcinoma
Cell proliferation
Cell cycle
分类号
R730.23 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
mTOR shRNA慢病毒载体的构建及包装
游燊
涂旺招
王耀东
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
2
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下载PDF
职称材料
2
eEF1A2在原发性肝细胞癌的表达
黄毅
邱福南
陈敦雁
伍严安
李峰
黄肖利
吴文冰
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015
1
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