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乳铁蛋白对去卵巢大鼠骨密度及骨M-CSF,IL-6mRNA的影响 被引量:3
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作者 薛英 侯建明 +2 位作者 林庆明 蓝旭华 吴晖南 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 2012年第2期119-124,共6页
目的观察乳铁蛋白(LF)对去卵巢大鼠骨密度(BMD)及骨组织巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和白细胞介素-6(IL-6)的影响及其防治骨质疏松作用可能机制。方法将6月龄雌性SD大鼠随机分为假手术组(Sham组,10只)与去卵巢模型组(Ovx组,60只),Ovx组... 目的观察乳铁蛋白(LF)对去卵巢大鼠骨密度(BMD)及骨组织巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和白细胞介素-6(IL-6)的影响及其防治骨质疏松作用可能机制。方法将6月龄雌性SD大鼠随机分为假手术组(Sham组,10只)与去卵巢模型组(Ovx组,60只),Ovx组再分为未治疗组(Con组)、雌激素组(E2组:0.1mg/kg·周-1)、不同剂量乳铁蛋白干预组(LF1组:0.01g/kg·周-1,LF2组:0.1g/kg·周-1,LF3组:1.0g/kg·周-1,LF4组:2.0mg/kg·周-1),每个亚组10只大鼠。治疗24周后,用微计算机断层扫描(micro-CT)检测大鼠右侧股骨、L2-4骨密度;用实时荧光定量聚合酶链反应(RealtimeRT-PCR)测量大鼠左股骨中M-CSF和IL-6mRNA的表达。结果与Con组相比,LF3和LF4组右侧股骨、L2-4骨密度明显增高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),与Con组相比,LF3和LF4组左股骨M-CSF和IL-6mRNA明显降低,差异有统计学意义(均P<0.01)。结论乳铁蛋白可增加去卵巢大鼠骨量及骨密度;可能通过调节M-CSF和IL-6mRNA水平降低破骨活动、减少骨量丢失。 展开更多
关键词 乳铁蛋白 骨质疏松 骨密度 巨噬细胞集落刺激因子 白细胞介素-6
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乳铁蛋白对体外培养原代大鼠成骨细胞增生与分化的影响 被引量:4
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作者 吴曼 侯建明 +3 位作者 杨海燕 林庆明 薛英 蓝旭华 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 2013年第1期44-49,共6页
目的研究不同浓度乳铁蛋白(LF)对体外培养原代大鼠成骨细胞增生与分化的影响,观察LF是否呈时间剂量依赖性促进成骨细胞的增生与分化。方法用混合酶消化法分离大鼠颅骨成骨细胞,进行原代培养;分别用不同浓度LF(0、0.1、1、10、100、1000... 目的研究不同浓度乳铁蛋白(LF)对体外培养原代大鼠成骨细胞增生与分化的影响,观察LF是否呈时间剂量依赖性促进成骨细胞的增生与分化。方法用混合酶消化法分离大鼠颅骨成骨细胞,进行原代培养;分别用不同浓度LF(0、0.1、1、10、100、1000μg/mL)干预成骨细胞1、3、5、7d后,采用MTT法测定细胞增生,采用PNPP法测定细胞内碱性磷酸酶活性。结果 MTT检测结果显示,与对照组相比,除0.1μg/mL组外,各时段不同LF干预组均可促进成骨细胞增生,差异均有统计学意义(均P<0.05)。但10、100μg/mLLF组干预第7天时细胞增生情况与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),1000μg/mLLF组干预第5天及第7天时细胞增生情况明显低于对照组(P<0.01)。碱性磷酸酶检测结果显示,0.1μg/mLLF对成骨细胞碱性磷酸酶活性无明显影响。1~1000μg/mLLF均可促进成骨细胞碱性磷酸酶活性,其中1000μg/mLLF在干预第7天时碱性磷酸酶活性最高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论乳铁蛋白能促进大鼠成骨细胞增生与分化,并在一定时间和浓度范围内呈时间剂量依赖性。 展开更多
关键词 成骨细胞 乳铁蛋白 增生 分化
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3,3',5-碘-L-甲腺原氨酸对成骨细胞前体增殖和成骨分化的作用
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作者 薛英 王永炫 +4 位作者 余新曦 蓝旭华 陈霞霞 林滢 侯建明 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 CSCD 北大核心 2020年第1期27-33,共7页
目的观察不同浓度的3,3',5-碘-L-甲腺原氨酸(3,3',5-triiodo-L-thyronine,T3)对小鼠颅顶前成骨细胞亚克隆14(MC3T3-E1 subclone 14)细胞增殖及分化水平的作用.方法分别给予不同浓度T3干预细胞,培养1、2、3 d后采用CCK8法检测细... 目的观察不同浓度的3,3',5-碘-L-甲腺原氨酸(3,3',5-triiodo-L-thyronine,T3)对小鼠颅顶前成骨细胞亚克隆14(MC3T3-E1 subclone 14)细胞增殖及分化水平的作用.方法分别给予不同浓度T3干预细胞,培养1、2、3 d后采用CCK8法检测细胞增殖水平;在成骨分化诱导试剂干预7 d基础上,结合上述T3给药,通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色检测各浓度组成骨细胞分化水平,通过实时荧光定量PCR和免疫蛋白印迹(Western blot)法检测各浓度组的成骨细胞标记性基因及蛋白的表达差异.结果在分别干预1、2、3 d后,T3随着浓度增高,对细胞的增殖水平均呈明显上调;而且相同剂量的T3对于细胞增殖呈时间依赖性增强.此外,MC3T3-E1 Subclone 14细胞诱导7 d后,对比于0对照组,低浓度T3(1 nmol/L)对成骨细胞各分化参数均无明显作用,而10、100、1000 nmol/L的T3对细胞ALP染色,成骨细胞相关基因及蛋白均明显上调,其中以10和100 nmol/L组最为显著.结论T3对于MC3T3-E1 Subclone 14细胞的增殖和成骨细胞分化均有显著的促进作用. 展开更多
关键词 3 3' 5-碘-L-甲腺原氨酸 小鼠颅顶前成骨细胞亚克隆14 细胞增殖 分化
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乳铁蛋白对大鼠成骨细胞增殖及IGF-1/IGF-1R mRNA表达的影响 被引量:8
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作者 杨海燕 侯建明 +2 位作者 吴曼 薛英 蓝旭华 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 2014年第1期35-41,共7页
目的探讨乳铁蛋白对大鼠成骨细胞增殖及胰岛素样生长因子1(IGF-1)/和胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)表达的影响。方法取出生24 h内SD大鼠6只,无菌条件下取出颅骨,用混合酶消化法进行成骨细胞培养,用不同浓度乳铁蛋白(0、0.1、1、10、100... 目的探讨乳铁蛋白对大鼠成骨细胞增殖及胰岛素样生长因子1(IGF-1)/和胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)表达的影响。方法取出生24 h内SD大鼠6只,无菌条件下取出颅骨,用混合酶消化法进行成骨细胞培养,用不同浓度乳铁蛋白(0、0.1、1、10、100、1000μg/mL)干预成骨细胞1、3、5、7 d后,用噻唑蓝比色法(MTT)测定成骨细胞增殖,用实时荧光定量聚合酶链反应(real time-PCR,RT-PCR)检测乳铁蛋白对IGF-1及IGF-1R mRNA表达的影响。结果MTT结果显示与对照组相比,浓度为1、10、100、1000μg/mL的乳铁蛋白在不同时间均能促进成骨细胞增殖,差异有统计学意义(均P<0.05)。随时间推移,不同浓度乳铁蛋白均可使成骨细胞数量增加,其中100μg/mL组第7天细胞增殖数达到最大。RT-PCR结果显示,与对照组相比,浓度为10、100、1000μg/mL的乳铁蛋白在各时间段均能增加成骨细胞IGF-1/IGF-1R mRNA的表达量,差异有统计学意义(均P<0.05),且随时间推移呈增加趋势,上述浓度乳铁蛋白对成骨细胞IGF-1/IGF-1R mRNA的表达量在第5、7天差异有统计学意义(均P<0.01)。结论乳铁蛋白能促进大鼠成骨细胞增殖,促进IGF-1/IGF-1R mRNA表达,可能是乳铁蛋白防治骨质疏松的机制之一。 展开更多
关键词 乳铁蛋白 成骨细胞 增殖 胰岛素样生长因子1 胰岛素样生长因子1受体 INSULIN-LIKE growth factor 1
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阿托伐他汀钙对原代成骨细胞OPG、RANKL、M-CSF基因表达的影响
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作者 孙玲 侯建明 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 2011年第4期247-252,共6页
目的观察不同浓度阿托伐他汀钙对体外培养原代成骨细胞增生和对OPG、RANKL、M-CSF基因表达的影响,探讨阿托伐他汀钙抗骨质疏松的分子机制,为临床用药提供实验依据。方法采用胰酶和Ⅰ型胶原酶混合酶消化法分离获得原代成骨细胞;采用差速... 目的观察不同浓度阿托伐他汀钙对体外培养原代成骨细胞增生和对OPG、RANKL、M-CSF基因表达的影响,探讨阿托伐他汀钙抗骨质疏松的分子机制,为临床用药提供实验依据。方法采用胰酶和Ⅰ型胶原酶混合酶消化法分离获得原代成骨细胞;采用差速贴壁法进行纯化。光镜下观察细胞的形态结构和生长状况,通过碱性磷酸酶染色和Ⅰ型胶原免疫组化SABC法对细胞进行鉴定。用不同浓度的阿托伐他汀钙(10^(-9)、10^(-8)、10^(-7)、10^(-6)和10^(-5) mol/L)干预成骨细胞,在24、48和72 h后,用实时荧光定量方法检测OPGmRNA、RANKL mRNA、M-CSF mRNA的表达水平。结果镜下观察显示细胞具有成骨细胞的典型特征,细胞多为单核,呈三角、多边、长梭等形态,并伸有粗大伪足;碱性磷酸酶染色及Ⅰ型胶原免疫组化染色呈阳性。实时荧光定量PCR结果显示:不同浓度的阿托伐他汀钙(10^(-9)、10^(-8)、10^(-7)、10^(-6)、10^(-5)mol/L)均可以促进OPG mRNA的表达,抑制RANKL mRNA的表达,对M-CSF mRNA基因的表达也具有促进作用,且与药物浓度及作用时间有关。结论采用胰酶和Ⅰ型胶原酶混合酶消化法体外分离成骨细胞,采用多次"差速贴壁法"可以获得数量多、纯度高且活性好的成骨细胞。阿托伐他汀钙可以促进成骨细胞OPG基因mRNA的表达,抑制RANKL基因mRNA的表达,对M-CSF基因的表达也有一定的促进作用。 展开更多
关键词 成骨细胞 骨保护因子 核因子-受体活化因子 核因子-受体活化因子的配体 巨噬细胞集落 刺激因子 阿托伐他汀钙
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