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HSP70-TKD诱导的NK细胞向肿瘤细胞迁移的实验研究 被引量:2
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作者 汪相如 陈蓉明 +2 位作者 龚福生 应敏刚 郑秋红 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1123-1127,共5页
目的:研究HSP70-TKD诱导的自然杀伤细胞(NK)体外对细胞表面HSP70表达不同的胰腺癌细胞和结肠癌细胞的迁移作用差异。方法:用干细胞培养基富集人外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)至第10天加入2μg/ml TKD,4 d... 目的:研究HSP70-TKD诱导的自然杀伤细胞(NK)体外对细胞表面HSP70表达不同的胰腺癌细胞和结肠癌细胞的迁移作用差异。方法:用干细胞培养基富集人外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)至第10天加入2μg/ml TKD,4 d后用流式细胞仪检测NK细胞表面杀伤性受体CD94/NKG2C的表达情况;应用流式分选将胰腺癌细胞系Colo357和结肠癌细胞系CW2分为HSP70高表达细胞亚系Colo+、CW2+和HSP70低表达细胞亚系Colo-、CW2-;Transwell小室实验检测HSP70-TKD诱导的NK细胞对这4种细胞的迁移能力,MTT法检测HSP70-TKD诱导的NK细胞对这4种细胞的杀伤活性。结果:流式结果显示NK细胞在干细胞培养基中培养14天可大量增殖,细胞纯度最高达(92.50±1.25)%;经HSP70-TKD诱导后,NK细胞表面杀伤性受体CD94/NKG2C的表达明显增加;经流式分选后,Colo+、Colo-细胞表面HSP70的表达分别为(78.2±2.2)%和(27.3±1.2)%,而CW2+、CW2-细胞表面HSP70的表达分别为(91.1±2.5)%和(18.2±1.0)%;HSP70-TKD诱导的NK细胞对Colo+迁移率为(68.6±2.8)%,明显高于对Colo-的迁移率(22.8±1.5)%,NK细胞对CW+迁移率为(73.5±2.7)%,明显高于对CW2-的迁移率(18.2±1.3)%;HSP70-TKD诱导的NK细胞对Colo+、Colo-的杀伤活性有显著性差异,当效靶比为20∶1时,杀伤活性分别为(61.2±3.0)%、(24.5±1.5)%,NK对CW2+、CW2-的杀伤活性有显著性差异,当效靶比为20∶1时,杀伤活性分别为(63.8±3.2)%、(22.4±1.8)%。结论:HSP70-TKD诱导的NK细胞是一种新型、高效的免疫活性细胞,在体外易向HSP70表达阳性的肿瘤细胞迁移。 展开更多
关键词 肿瘤细胞 HSP70-TKD NK细胞 迁移
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HSP70-TKD诱导的NK细胞对胰腺癌细胞裸鼠移植瘤的抑制作用 被引量:1
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作者 陈蓉明 龚福生 +2 位作者 郑秋红 谢云青 应敏刚 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1605-1609,共5页
目的:研究HSP70-TKD诱导的自然杀伤细胞(NK)对胰腺癌原位移植模型的体内抗肿瘤作用。方法:用干细胞培养基富集人外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)至第10天时,加入2μg/ml TKD,4 d后用流式细胞仪检测诱导后NK... 目的:研究HSP70-TKD诱导的自然杀伤细胞(NK)对胰腺癌原位移植模型的体内抗肿瘤作用。方法:用干细胞培养基富集人外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)至第10天时,加入2μg/ml TKD,4 d后用流式细胞仪检测诱导后NK细胞表面杀伤性受体CD94/NKG2C的表达情况,MTT法测定诱导后NK细胞体外对细胞表面HSP70表达阳性的胰腺癌Colo357细胞的杀伤活性。在BALB/c裸鼠胰腺原位接种胰腺癌Colo357细胞至第15天时,尾静脉注射HSP70-TKD诱导的NK细胞,观察NK细胞对荷瘤鼠的抑瘤作用。免疫组化染色检测NK细胞在胰腺癌组织的浸润情况。结果:NK细胞在干细胞培养基中可大量增殖,14 d时平均细胞纯度为(87.50±1.35)%。HSP70-TKD诱导的NK细胞其细胞表面CD94/NKG2C的表达明显增加,其平均荧光强度为(220.56±6.82),高于未诱导组的(68.72±1.85)。HSP70-TKD诱导的NK细胞对胰腺癌细胞Colo357有更强的杀伤活性,当效靶比为40∶1时杀伤率高达(68.72±2.55)%。体内实验表明,TKD诱导的NK细胞能显著抑制胰腺癌的生长,其抑瘤率可达(61.3±1.5)%,与对照组差异显著(P<0.01)。免疫组化染色表明IL-2和TKD同时诱导的NK细胞更易向胰腺癌组织浸润。结论:HSP70-TKD诱导的NK细胞是一种新型、高效的免疫活性细胞,具有较强的体外抗细胞表面HSP70表达阳性的胰腺癌细胞活性,具有明显的抑制胰腺肿瘤生长的作用。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 HSP70-TKD NK细胞 CD94 抗肿瘤
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