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转录因子TRPS1通过H3K27me3调控小鼠合子型基因激活
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作者 刘玥 许颂华 +6 位作者 连秀丽 吕瑞敏 莫开恩 许丽旋 林建闽 逄丽丽 王世鄂 《解剖学杂志》 CAS 2021年第S01期177-177,共1页
前期研究发现,转录因子TRPS1可参与调控小鼠植入前胚合子基因组激活,但具体调节机制尚未明确。本研究收集小鼠1-细胞胚,采用显微注射的方法,注射TRPS1的抗体、siRNA和反寡义核苷酸,分别沉默TRPS1的蛋白和mRNA,观察小鼠植入前胚各阶段发... 前期研究发现,转录因子TRPS1可参与调控小鼠植入前胚合子基因组激活,但具体调节机制尚未明确。本研究收集小鼠1-细胞胚,采用显微注射的方法,注射TRPS1的抗体、siRNA和反寡义核苷酸,分别沉默TRPS1的蛋白和mRNA,观察小鼠植入前胚各阶段发育率变化;利用免疫荧光染色法检测TRPS1-siRNA显微注射后H3K27me3表达情况,并利用染色质免疫共沉淀技术(ChIP)在细胞模型中探讨其作用机制。结果表明,沉默TRPS1的蛋白和mRNA能够使大部分小鼠植入前胚发育停滞在2-/4-细胞胚阶段;Trps1-siRNA显微注射处理导致H3K27me3表达水平降低。在细胞模型S-KO-V3卵巢癌细胞中转染TRPS1-siRNA,发现H3K27me3的甲基转移酶EZH2下调;采用ChIP-qPCR技术,发现TRPS1能够特异性的结合在EZH2的启动子上,在植入前胚中验证发现,TRPS1下调能够引起2-细胞胚EZH2蛋白表达水平下降。 展开更多
关键词 EZH2 细胞模型 发育停滞 显微注射 转录因子 甲基转移酶 卵巢癌细胞 阶段发育
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