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慢性低氧大鼠TRPC1表达与肺动脉收缩变化时间曲线关系 被引量:7
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作者 穆云萍 焦海霞 +4 位作者 朱壮丽 戴耄 黄秋虹 王瑞幸 林默君 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1667-1671,共5页
目的探讨慢性低氧(chronichypoxia,CH)上调TR—PCI表达和SOCE介导肺动脉(pulmonaryarteris,PAs)收缩的时间曲线。方法清洁级6SD大鼠,常压低氧(氧分压为9.5%~10.5%)饲养,观察在不同时问点CH对TRPCI表达量和SOCE介导的PAs... 目的探讨慢性低氧(chronichypoxia,CH)上调TR—PCI表达和SOCE介导肺动脉(pulmonaryarteris,PAs)收缩的时间曲线。方法清洁级6SD大鼠,常压低氧(氧分压为9.5%~10.5%)饲养,观察在不同时问点CH对TRPCI表达量和SOCE介导的PAs收缩的影响,描记其时问依赖性曲线。结果①CH上调平均右心室收缩压(mRVSP),低氧1d压力增高明显,7d达到最大值,21d后达到稳定;右心室质量指数(RVMI)低氧3d后开始增高,此后一直呈持续增高状态,直到21d达到稳定;②半定量RT—PCR检测显示,CH上调TRPCImRNA的表达量,低氧1d上调明显,3d达到最大值一直维持到7d,21d后达到稳定;③CH上调SOCE介导的PAs收缩,低氧3d开始上调,7d达到最大值,21d后达到稳定。结论CH早期TRPCI/SOCE明显上调,两者的时问曲线具有相关性,表明TRPCI和SOCE的上调在慢性低氧致肺高压的机制中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 慢性低氧 肺高压 肺动脉 经典瞬时感受器电位 钙池操纵性钙内流 时间曲线 相关性
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三七皂苷R1对肺高压大鼠肺动脉平滑肌细胞SOCE的抑制作用 被引量:14
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作者 王瑞幸 戴耄 +5 位作者 穆云萍 江娇 黄秋虹 吴枝娟 焦海霞 林默君 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1463-1468,共6页
目的探讨三七皂苷R1(notoginsenoside R1)对慢性低氧(chronic hypoxia,CH)及野百合碱(monocrotaline,MCT)致肺高压(pulmonary hypertension,PH)大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)钙池操纵性钙内流(s... 目的探讨三七皂苷R1(notoginsenoside R1)对慢性低氧(chronic hypoxia,CH)及野百合碱(monocrotaline,MCT)致肺高压(pulmonary hypertension,PH)大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)钙池操纵性钙内流(store-operated calcium entry,SOCE)的作用。方法制备CH及MCT致PH大鼠模型,通过Mn2+淬灭Fura-2荧光和Fluo-3荧光检测胞质游离Ca2+浓度(intracellular free calcium concentration,[Ca2+]i)观察三七皂苷R1对CH及MCT致PH大鼠PASMCs SOCE的作用。结果成功制备CH及MCT致PH大鼠模型;在硝苯地平预处理情况下,10μmol·L-1三七皂苷R1可明显降低环匹阿尼酸(cyclopiazonic acid,CPA)诱导CH及MCT致PH大鼠PASMCs Mn2+淬灭幅度、Mn2+最大淬灭率、胞膜Ca2+内流量和静息[Ca2+]i。结论三七皂苷R1对CH及MCT致PH大鼠PASMCs具有抑制SOCE和降低静息[Ca2+]i的作用。 展开更多
关键词 肺高压 慢性低氧 野百合碱 三七皂苷R1 钙池操纵性钙内流 肺动脉平滑肌细胞
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三七皂苷R1对肺高压大鼠模型肺动脉的舒张作用 被引量:11
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作者 胡莹 焦海霞 +3 位作者 王瑞幸 郭立成 穆云萍 林默君 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1572-1576,共5页
目的探讨三七皂苷R1(notoginsenoside R1)对慢性低氧(chronic hypoxia,CH)和野百合碱(monocrotaline,MCT)致肺高压(pulmonary hypertension,PH)大鼠模型肺动脉(pulmonary arteries,PAs)收缩效应的作用及其机制。方法清洁级♂SD大鼠随机... 目的探讨三七皂苷R1(notoginsenoside R1)对慢性低氧(chronic hypoxia,CH)和野百合碱(monocrotaline,MCT)致肺高压(pulmonary hypertension,PH)大鼠模型肺动脉(pulmonary arteries,PAs)收缩效应的作用及其机制。方法清洁级♂SD大鼠随机分为3组。正常对照组;CH组:大鼠饲养于氧分压为10.0%±0.5%的密封有机玻璃箱内;MCT组:大鼠按60 mg·kg-1(BW)一次性腹腔注射20 mg·L-1的MCT。观察三七皂苷R1对两种肺高压模型大鼠PAs收缩效应的作用。结果可成功制备CH和MCT致肺高压大鼠;三七皂苷R1(0.1~100μmol·L-1)对10 nmol·L-1内皮素-1(endothelin-1,ET-1)诱发正常大鼠PAs收缩效应呈剂量依赖性舒张,EC50为(5.25±0.14)μmol·L-1;3 nmol·L-1Gd3+阻断ET-1诱发两种肺高压模型大鼠PAs收缩效应后,再加入三七皂苷R1无进一步抑制作用;6μmol·L-1三七皂苷R1对环匹阿尼酸(cyclopiazonic acid,CPA)诱发两种肺高压模型大鼠PAs收缩效应均有明显的抑制作用。结论三七皂苷R1可能通过阻断钙池操纵性钙内流介导的PAs收缩产生治疗肺高压作用。 展开更多
关键词 慢性低氧 野百合碱 肺高压 三七皂苷R1 钙池操 纵性钙内流 肺动脉
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动脉平滑肌细胞STIM1过表达上调Akt/mTOR通路并促进细胞增殖 被引量:6
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作者 张明芳 齐元麟 +3 位作者 王丹 王情 陈富华 林默君 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期37-42,共6页
目的观察基质相互作用分子1(stromal interaction molecule 1,STIM1)在肺动脉高压组织中的表达,并探讨STIM1对动脉平滑肌细胞增殖的影响及机制。方法一次性腹腔注射野百合碱(MCT)建立肺动脉高压大鼠模型;实时定量PCR和蛋白印迹分别测定... 目的观察基质相互作用分子1(stromal interaction molecule 1,STIM1)在肺动脉高压组织中的表达,并探讨STIM1对动脉平滑肌细胞增殖的影响及机制。方法一次性腹腔注射野百合碱(MCT)建立肺动脉高压大鼠模型;实时定量PCR和蛋白印迹分别测定肺动脉高压大鼠肺组织STIM1 mRNA和蛋白的表达;采用基因转染技术建立STIM1瞬时高表达的动脉平滑肌A7R5细胞模型;用CCK-8法测定细胞增殖能力;用蛋白印迹测定Akt/m TOR通路分子的表达。结果与对照组相比,MCT组的右心室收缩压(RVSP)和右心重量指数(RVMI)均明显增高(P<0.01),形态学观察可见肺小动脉平滑肌层明显增厚,管腔减小;MCT组大鼠STIM1 mRNA和蛋白表达量分别是对照大鼠的2.19和1.66倍;STIM1瞬时过表达的动脉平滑肌细胞与对照组相比,生长速度加快;STIM1过表达可明显增加Akt、m TOR、p70-S6K和4E-BP1的磷酸化水平,而对它们的蛋白水平没有影响。结论肺动脉高压发病中存在STIM1的过表达,STIM1可促进动脉平滑肌细胞增殖,其机制与上调Akt/mT OR信号转导通路相关。 展开更多
关键词 肺动脉高压 动脉平滑肌细胞 基质相互作用分子1 细胞增殖 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 AKT信号通路
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动脉平滑肌细胞的钙池操纵钙通道对细胞自噬的调节 被引量:3
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作者 齐元麟 陈富华 +3 位作者 任正肖 王情 王丹 张明芳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1416-1421,共6页
目的探讨大鼠动脉平滑肌细胞A7R5上钙池操纵性钙通道(store-operated calcium channel,SOCC)对细胞自噬的影响。方法在293T细胞中包装含有STIM1、Orai1基因的慢病毒,将获得的慢病毒LV-STIM1、LV-Orai1感染大鼠A7R5细胞,Western blot检... 目的探讨大鼠动脉平滑肌细胞A7R5上钙池操纵性钙通道(store-operated calcium channel,SOCC)对细胞自噬的影响。方法在293T细胞中包装含有STIM1、Orai1基因的慢病毒,将获得的慢病毒LV-STIM1、LV-Orai1感染大鼠A7R5细胞,Western blot检测感染前后STIM1、Orai1蛋白表达及细胞自噬调节蛋白Beclin-1的表达。慢病毒感染A7R5后饥饿处理6 h或雷帕霉素处理24 h,Western blot检测处理后各组自噬相关蛋白LC3的蛋白表达量。结果重组载体p LV-STIM1、p LV-Orai1经双酶切鉴定正确。在293T成功包装慢病毒LV-STIM1、LV-Orai1。病毒感染A7R5后,与对照组相比,STIM1、Orai1蛋白表达量分别上调96%和163%,而自噬调节蛋白Beclin 1下调64%。饥饿或雷帕霉素处理可明显增加细胞自噬水平,体现为自噬标志蛋白LC3-Ⅱ含量增加,而慢病毒感染STIM1、Orai1可明显抑制饥饿或雷帕霉素诱导的细胞自噬。结论在大鼠动脉平滑肌A7R5细胞过表达钙池操纵钙通道分子STIM1和Orai1可使细胞自噬水平降低。这一分子机制可能与肺动脉高压发病相关。 展开更多
关键词 动脉平滑肌细胞 钙池操纵钙通道 细胞自噬 基质相互作用分子1 钙释放激活钙通道蛋白1 肺动脉高压
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