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不同显色指数LED照射对大鼠视网膜ROS/NLRP3的影响
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作者 林蓉 林泽源 +5 位作者 肖昆鸿 马华智 薛辰 余建樊 谭欢欢 黄焱 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2024年第12期930-936,共7页
目的探讨不同显色指数(CRI)的发光二极管(LED)对大鼠视网膜损伤的机制。方法将20只SD大鼠随机分为正常对照(NC)组(太阳光照明)、低CRI(CRI-L)组(蓝光照明)、中CRI(CRI-M)组(常规LED照明)和高CRI(CRI-H)组(全光谱LED照明),每组5只,每天光... 目的探讨不同显色指数(CRI)的发光二极管(LED)对大鼠视网膜损伤的机制。方法将20只SD大鼠随机分为正常对照(NC)组(太阳光照明)、低CRI(CRI-L)组(蓝光照明)、中CRI(CRI-M)组(常规LED照明)和高CRI(CRI-H)组(全光谱LED照明),每组5只,每天光照12 h,连续4周。苏木精-伊红(HE)染色评估视网膜形态的变化;DHE染色检测视网膜组织中活性氧(ROS)的含量。通过实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测NLRP3、GSDMD和Caspase-1的mRNA表达,并通过免疫组织化学染色测定其蛋白质表达;使用光谱测量仪测量环境光谱。结果CRI-L组大鼠视网膜最薄,其次是CRI-M和CRI-H组。NC组、CRI-L组、CRI-M组及CRI-H组大鼠视网膜组织中ROS荧光强度分别为1.000±0.046、25.060±1.732、14.530±3.776、1.821±0.587。CRI-H组ROS表达水平低于CRI-L组与CRI-M组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。RT-qPCR结果显示,NC组、CRI-L组、CRI-M组及CRI-H组大鼠NLRP3的mRNA相对表达水平分别为1.004±0.005、4.004±0.716、2.027±0.303、0.741±0.069,Caspase-1的mRNA相对表达水平分别为1.010±0.006、4.337±0.345、2.268±0.058、0.713±0.021,GSDMD的mRNA相对表达水平分别为1.000±0.000、2.938±0.559、1.955±0.166、1.213±0.051。与NC组相比,CRI-L组及CRI-M组大鼠的NLRP3、Caspase-1和GSDMD相对表达水平均增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。免疫组织化学染色结果显示,NC组、CRI-L组、CRI-M组及CRI-H组大鼠视网膜组织中NLRP3光密度值分别为0.3794±0.0022、0.4007±0.0114、0.3790±0.0069、0.3770±0.0075,Caspase-1光密度值分别为0.3672±0.0058、0.4426±0.0411、0.3824±0.0119、0.3806±0.0065,GSDMD光密度值分别为0.1595±0.0134、0.1675±0.0119、0.3976±0.0143、0.3772±0.0228。与NC组相比,CRI-L组大鼠NLRP3、Caspase-1光密度值均增加,CRI-M组和CRI-H组GSDMD光密度值均增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。各组光谱比较显示,CRI-H组具有较宽的光谱覆盖范围和更接近自然光谱的分布。结论常规LED暴露可诱导大鼠视网膜厚度下降,视网膜组织中ROS表达增加,并上调NLRP3、Caspase-1和GSDMD的表达水平。高CRI的全光谱LED可通过优化其光谱分布通过ROS/NLRP3途径减轻细胞焦亡,具有更好的生物安全性。 展开更多
关键词 发光二极管 显色指数 活性氧 细胞焦亡 视网膜损伤
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链脲佐菌素结合高糖高脂饮食诱导2型糖尿病大鼠模型 被引量:10
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作者 黄焱 陈恩玉 +1 位作者 陈雅芬 杨小梅 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第13期2299-2301,共3页
目的:研究如何运用链脲佐菌素(streptozotoein,STZ)结合高糖高脂饮食诱导2型糖尿病大鼠模型。方法:40只健康雄性SD大鼠随机分为高脂组、糖尿病对照组、正常组。高脂组用STZ60mg/kg一次性左下腹腔注射,并结合4周的高糖高脂饮食。... 目的:研究如何运用链脲佐菌素(streptozotoein,STZ)结合高糖高脂饮食诱导2型糖尿病大鼠模型。方法:40只健康雄性SD大鼠随机分为高脂组、糖尿病对照组、正常组。高脂组用STZ60mg/kg一次性左下腹腔注射,并结合4周的高糖高脂饮食。糖尿病对照组用相同剂量STZ一次性左下腹腔注射,普通饲料喂养4周。正常组用相同剂量的柠檬酸缓冲液一次性左下腹腔注射,普通饲料喂养4周。于注射药物后72h及1、4、8、12周等不同时间点测量空腹体重、血糖、尿糖等指标,进行统计分析。结果:高脂组与糖尿病对照组、正常组相比空腹血糖、体重明显增加,差异有显著性(P〈0.05)。高脂组与糖尿病对照组相比血糖增高并能保持长时间的稳定、尿糖强阳性。结论:STZ一次性左下腹腔注射结合高糖高脂饮食4周可成功诱导2型糖尿病大鼠模型。 展开更多
关键词 糖尿病 2型 链脲佐菌素 动物模型 血糖
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调节miR-27b-3p和Nrf2对人RPE细胞代谢记忆形成的抑制作用
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作者 赖巧玲 谢婷 黄焱 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期970-979,共10页
目的探讨微小RNA-27b-3p(miR-27b-3p)/核因子E2相关因子2(Nrf2)对人视网膜色素上皮(RPE)细胞代谢记忆损伤的影响及其调控机制。方法取ARPE-19细胞,将其置于5.5 mmol/L葡萄糖培养基培养6 d作为正常对照组;于30 mmol/L高糖培养基中培养3 d... 目的探讨微小RNA-27b-3p(miR-27b-3p)/核因子E2相关因子2(Nrf2)对人视网膜色素上皮(RPE)细胞代谢记忆损伤的影响及其调控机制。方法取ARPE-19细胞,将其置于5.5 mmol/L葡萄糖培养基培养6 d作为正常对照组;于30 mmol/L高糖培养基中培养3 d后,换成5.5 mmol/L葡萄糖培养基继续培养3 d作为代谢记忆组;慢病毒转染细胞并加入嘌呤霉素,筛选转染成功的细胞,并将其置于30 mmol/L高糖培养3 d后换成5.5 mmol/L葡萄糖培养基继续培养3 d作为miR-27b-3p抑制剂组;细胞于30 mmol/L高糖+利拉鲁肽培养基培养3 d后换成5.5 mmol/L葡萄糖培养基继续培养3 d作为利拉鲁肽组。采用实时荧光定量PCR检测miR-27b-3p、Nrf2、醌氧化还原酶-1(NQO1)、血红素加氧酶-1(HO-1)mRNA表达水平;采用Western blot法检测Nrf2总蛋白、核蛋白水平;采用细胞免疫荧光检测Nrf2、NQO1、HO-1蛋白表达水平;采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞增生率以评估细胞活力;采用DHE试剂盒检测活性氧簇(ROS)水平。结果正常对照组、代谢记忆组、miR-27b-3p对照组和miR-27b-3p抑制剂组miR-27b-3p mRNA相对表达量分别为1.000±0.000、1.881±0.034、1.683±0.088和0.111±0.008,总体比较差异有统计学意义(F=850.815,P<0.001),其中,正常对照组miR-27b-3p mRNA相对表达量低于代谢记忆组,miR-27b-3p抑制剂组miR-27b-3p mRNA相对表达量低于正常对照组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。代谢记忆组Nrf2 mRNA及总蛋白、核蛋白相对表达量较正常对照组降低,miR-27b-3p抑制剂组较miR-27b-3p对照组明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.01);代谢记忆组NQO1、HO-1 mRNA相对表达量较正常对照组降低,miR-27b-3p抑制剂组较miR-27b-3p对照组明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.01)。代谢记忆组Nrf2、NQO1、HO-1荧光强度均低于正常对照组,miR-27b-3p抑制剂组Nrf2、NQO1、HO-1荧光强度均高于miR-27b-3p对照组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。与代谢记忆组相比,利拉鲁肽组miR-27b-3p mRNA相对表达量下降,差异有统计学意义(P<0.05)。利拉鲁肽组Nrf2、NQO1、HO-1 mRNA、Nrf2总蛋白及核蛋白相对表达水平均较代谢记忆组升高,差异均有统计学意义(均P<0.05),利拉鲁肽组荧光强度较代谢记忆组增强,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与正常对照组及利拉鲁肽组相比,代谢记忆组细胞增生活力均下降,差异均有统计学意义(均P<0.01)。代谢记忆组ROS相对含量较正常对照组及利拉鲁肽组升高,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论利拉鲁肽通过下调miR-27b-3p逆转代谢记忆对Nrf2、NQO1和HO-1的抑制作用。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 利拉鲁肽 视网膜色素上皮 代谢记忆 微小RNA-27b-3p NRF2
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