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马铃薯Y病毒福建分离物P1基因的分子变异和结构特征 被引量:9
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作者 史凤阳 高芳銮 +2 位作者 沈建国 常飞 詹家绥 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期713-722,共10页
为揭示马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)P1基因的分子变异及结构特征,并查明福建分离物P1基因的变异来源。文章设计一对简并引物从感染PVY的马铃薯病叶扩增、克隆获得福建分离物P1基因的cDNA全长序列,分析其核苷酸序列和氨基酸序列的特... 为揭示马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)P1基因的分子变异及结构特征,并查明福建分离物P1基因的变异来源。文章设计一对简并引物从感染PVY的马铃薯病叶扩增、克隆获得福建分离物P1基因的cDNA全长序列,分析其核苷酸序列和氨基酸序列的特征,并采用贝叶斯法重建P1基因的系统发育树。结果显示,12个福建分离物均成功扩增出预期大小(约915 bp)的特异性片段,P1基因的核苷酸序列与已报道的PVY不同株系的核苷酸序列一致性为73%~99%;QK44、XT02、XT08、LH05分离物的309 nt位置均检测到一个强烈的重组信号。12个PVY分离物中,P1蛋白有85个变异的氨基酸位点,表明其高度变异;P1蛋白的第41~275位是一个高度保守的结构功能域,含有3个保守的活性位点(H192、D201、V235);系统发育分析显示,福建分离物形聚为3种不同的簇,其对应的卷曲结构(Coiled-coil domain)和空间结构也不相同,表明不同株系型的P1基因在系统发育关系上分化较大。该研究结果表明PVY P1基因在核苷酸序列、氨基酸序列以及空间结构具有高度变异性,但行使P1蛋白功能的活性位点所在的氨基酸(H192、D201和V235)均高度保守;福建分离物P1基因的变异源主要来自碱基突变和基因重组。 展开更多
关键词 马铃薯Y病毒 P1基因 变异 重组
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福建三明地区柑橘病毒类病原种类的鉴定及检测 被引量:1
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作者 张洁 王新 +4 位作者 马崇欢 李丁山 刘国坤 丁新伦 吴祖建 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期266-271,共6页
为了明确福建省三明地区柑橘病毒类病原(病毒和类病毒)种类,利用RT-PCR技术对其进行了鉴定和检测,并对其检出率进行了分析。结果表明,从207份柑橘叶片样品中检出柑橘衰退病毒(citrus tristeza virus, CTV)、柑橘黄化脉明病毒(citrus yel... 为了明确福建省三明地区柑橘病毒类病原(病毒和类病毒)种类,利用RT-PCR技术对其进行了鉴定和检测,并对其检出率进行了分析。结果表明,从207份柑橘叶片样品中检出柑橘衰退病毒(citrus tristeza virus, CTV)、柑橘黄化脉明病毒(citrus yellow vein clearing virus, CYVCV)、柑橘叶斑驳病毒(citrus leaf blotch virus, CLBV)和蚜虫致死麻痹病毒(aphid lethal paralysis virus, ALPV)等4种病毒以及柑橘曲叶类病毒(citrus bent leaf viroid, CBLVd)、啤酒花矮化类病毒(hop stunt viroid, HSVd)、柑橘矮化类病毒(citrus dwarfing viroid, CDVd)、柑橘类病毒Ⅴ(citrus viroidⅤ, CVdⅤ)和柑橘类病毒Ⅵ(citrus viroidⅥ, CVdⅥ)等5种类病毒。其中,CTV、CYVCV、CLBV和ALPV的检出率分别是71.01%、66.67%、0.97%和6.28%,CBLVd、HSVd、CDVd、CVdⅤ和CVdⅥ的检出率分别是7.25%、28.50%、13.04%、9.18%和6.76%。同时发现,CTV和CYVCV复合侵染的检出率为54.59%,而品种‘大分1号’的病毒检出率相对较低。本研究首次在柑橘叶片中检测到ALPV。 展开更多
关键词 柑橘 病毒 类病毒 检出率
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柑橘3种病毒类病原多重RT-PCR检测技术的建立及应用
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作者 袁琳凯 马崇欢 +5 位作者 李丁山 陈志炜 江宵烽 丁新伦 张洁 吴祖建 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期339-344,共6页
【目的】建立柑橘黄化脉明病毒(citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)、柑橘衰退病毒(citrus tristeza virus,CTV)和啤酒花矮化类病毒(hop stunt viroid,HSVd)的多重RT-PCR检测体系。【方法】设计多重RT-PCR引物,分析其特异性,确... 【目的】建立柑橘黄化脉明病毒(citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)、柑橘衰退病毒(citrus tristeza virus,CTV)和啤酒花矮化类病毒(hop stunt viroid,HSVd)的多重RT-PCR检测体系。【方法】设计多重RT-PCR引物,分析其特异性,确定其最佳浓度比、最适退火温度及灵敏度,在此基础上对福建地区的柑橘样品进行检测。【结果】确定了CYVCV-F/R、CTV-F/R和HSVd-F/R等3对引物的最佳浓度比例为1∶1∶2,最适退火温度为52.9℃,灵敏度结果显示该体系可检测模板稀释到10^(-2)的阳性样品。应用该体系对采自福建部分地区的157份柑橘样品进行检测,结果发现,CYVCV、CTV和HSVd的检出率分别为47.1%、56.7%和22.9%。【结论】成功建立了柑橘CYVCV、CTV和HSVd病原的多重RT-PCR检测方法,为该类病害的检测提供准确、快速的检测方法。 展开更多
关键词 柑橘黄化脉明病毒 柑橘衰退病毒 啤酒花矮化类病毒 多重RT-PCR
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大蒜精油对烟草花叶病毒的抑制作用 被引量:24
4
作者 陈启建 刘国坤 +2 位作者 吴祖建 谢联辉 林奇英 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2005年第1期30-33,共4页
采用水蒸气蒸馏法提取的大蒜精油经GC MS测定,其主要成分为含硫化合物.高质量浓度 (1mg·mL-1以上 )的大蒜精油对烟草花叶病毒(TMV)有一定的体外抑制作用,质量浓度小于 0. 5mg·mL-1的大蒜精油对TMV的体外抑制效果不明显.在离... 采用水蒸气蒸馏法提取的大蒜精油经GC MS测定,其主要成分为含硫化合物.高质量浓度 (1mg·mL-1以上 )的大蒜精油对烟草花叶病毒(TMV)有一定的体外抑制作用,质量浓度小于 0. 5mg·mL-1的大蒜精油对TMV的体外抑制效果不明显.在离体条件下,大蒜精油对TMV的增殖有明显的抑制作用.在烟草上喷施大蒜精油可降低烟草体内病毒的含量,减轻病害症状. 展开更多
关键词 TMV 烟草花叶病毒 喷施 病害症状 主要成分 离体条件 浓度 抑制作用 体外抑制 大蒜精油
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抗TMV的植物筛选及提取条件对抗病毒物质活性的影响 被引量:25
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作者 翟梅枝 高芳銮 +2 位作者 沈建国 林奇英 谢联辉 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2004年第7期45-49,共5页
 对26种植物样品进行了抗病毒(TMV)活性测定。结果表明,不同植物提取物对TMV侵染心叶烟的抑制效果不同,其中莲、榕树、柿子、杨梅、水蜈蚣、叶下珠、羊蹄甲和菊花对TMV的抑制率在90%以上;对高活性抗病毒植物莲叶而言,抗病毒物质的活性...  对26种植物样品进行了抗病毒(TMV)活性测定。结果表明,不同植物提取物对TMV侵染心叶烟的抑制效果不同,其中莲、榕树、柿子、杨梅、水蜈蚣、叶下珠、羊蹄甲和菊花对TMV的抑制率在90%以上;对高活性抗病毒植物莲叶而言,抗病毒物质的活性因提取溶剂和提取方法的不同而异,水作为溶剂提取时,提取物对TMV的抑制率仅约为70%,而以甲醇和体积分数95%的乙醇作溶剂提取时,提取物对TMV的抑制率约在98%以上;用体积分数95%的乙醇为溶剂,采用索氏提取、回流提取和冷浸提取时,所得提取物对TMV的抑制率均为100%。冷浸提取的优化条件是:以体积分数95%的乙醇为提取溶剂,料液比20∶180(1∶9)提取12h。 展开更多
关键词 植物源病毒抑制剂 烟草花叶病毒 植物活性筛选 提取方法
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三叶鬼针草中黄酮甙对烟草花叶病毒的抑制作用 被引量:31
6
作者 陈启建 刘国坤 +2 位作者 吴祖建 林奇英 谢联辉 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2003年第2期181-184,共4页
测试了从三叶鬼针草中提取的黄酮甙对烟草花叶病毒(Tobaccomosaicvirus,TMV)的抑制作用.结果表明:黄酮甙对TMV具有明显的体外钝化作用,其质量浓度为100μg·mL-1时,对TMV的抑制率为91.3%,但对烟草体内病毒复制无显著的抑制效果;聚... 测试了从三叶鬼针草中提取的黄酮甙对烟草花叶病毒(Tobaccomosaicvirus,TMV)的抑制作用.结果表明:黄酮甙对TMV具有明显的体外钝化作用,其质量浓度为100μg·mL-1时,对TMV的抑制率为91.3%,但对烟草体内病毒复制无显著的抑制效果;聚丙烯酰胺凝胶电泳显示黄酮甙与病毒外壳蛋白混合的泳带比对照明显滞后,表明黄酮甙可与TMV外壳蛋白结合,透析或萃取可使这种结合解离,使病毒恢复侵染力,说明黄酮甙对病毒无直接杀灭作用;用黄酮甙处理过的普通烟叶片,12h后接种病毒,可阻抑病毒初侵染,延迟病害症状的出现. 展开更多
关键词 三叶鬼针草 黄酮甙 烟草花叶病毒 抑制作用 植物病毒抑制剂
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水稻条纹病毒的分子生物学 被引量:40
7
作者 谢联辉 魏太云 +2 位作者 林含新 吴祖建 林奇英 《福建农业大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第3期269-279,共11页
综述了近年来国内外有关水稻条纹病毒在基因组结构、功能、复制、转录、表达策略及其分类地位、病毒分子变异和病害控制策略以及进化上的亲缘关系等方面的最新研究进展 。
关键词 水稻条纹病毒 分子生物学 基因组结构 功能
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马铃薯A病毒CP基因的克隆与序列分析 被引量:12
8
作者 吴兴泉 陈士华 +2 位作者 吴祖建 林奇英 谢联辉 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期25-28,共4页
利用根据马铃薯A病毒 (PVA)外壳蛋白 (CP)基因序列设计合成的一对引物 ,以带毒植物总RNA为模板 ,RT-PCR扩增得到长 0 8kb的目的片段。将目的片段转入大肠杆菌并进行了序列测定。测序结果与PVA其他分离物CP基因序列比较 ,发现其核苷酸... 利用根据马铃薯A病毒 (PVA)外壳蛋白 (CP)基因序列设计合成的一对引物 ,以带毒植物总RNA为模板 ,RT-PCR扩增得到长 0 8kb的目的片段。将目的片段转入大肠杆菌并进行了序列测定。测序结果与PVA其他分离物CP基因序列比较 ,发现其核苷酸同源性最高可达 99%。 展开更多
关键词 马铃薯 病毒 基因 克隆 蛋白 蚜虫
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金针菇中一种抗病毒蛋白的纯化及其抗烟草花叶病毒特性 被引量:27
9
作者 付鸣佳 吴祖建 +1 位作者 林奇英 谢联辉 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2003年第1期84-88,共5页
通过DEAE-SepharoseFF离子交换层析、Superdex75凝胶层析和高效液相色谱,从金针菇中获得抗烟草花叶病毒蛋白Zb,经SDS-PAGE确定该蛋白相对分子质量为30ku.采用半叶法在心叶烟上检测抗烟草花叶病毒活性,发现该蛋白抑制中质量浓度为4.4μg&... 通过DEAE-SepharoseFF离子交换层析、Superdex75凝胶层析和高效液相色谱,从金针菇中获得抗烟草花叶病毒蛋白Zb,经SDS-PAGE确定该蛋白相对分子质量为30ku.采用半叶法在心叶烟上检测抗烟草花叶病毒活性,发现该蛋白抑制中质量浓度为4.4μg·mL-1. 展开更多
关键词 金针菇 纯化 抗病毒蛋白 烟草花叶病毒 病毒病 抗病毒活性
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我国水稻条纹病毒7个分离物的致病性和化学特性比较 被引量:14
10
作者 林含新 魏太云 +2 位作者 吴祖建 林奇英 谢联辉 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2002年第2期164-167,共4页
对我国水稻条纹病毒 (Rice stripe virus,RSV) 7个分离物的致病性和化学组分进行了测定 .结果表明 ,RSV各分离物之间存在明显的致病性差异 ,据此可分为 3组 ,但组内分离物之间致病性又有所不同 .第 1组致病性最强 ,包括北京双桥(SQ)、... 对我国水稻条纹病毒 (Rice stripe virus,RSV) 7个分离物的致病性和化学组分进行了测定 .结果表明 ,RSV各分离物之间存在明显的致病性差异 ,据此可分为 3组 ,但组内分离物之间致病性又有所不同 .第 1组致病性最强 ,包括北京双桥(SQ)、辽宁盘锦 (PJ)分离物 ,其中 PJ所致病害发病率最高 ,而 SQ所致病害症状最严重 ;第 2组包括云南的宜良 (YL)、保山(BS)分离物、上海嘉定 (JD)、福建龙岩 (LY)分离物 ,致病性次强 ,其中 YL、BS分离物较 JD、LY强 ;第 3组为山东济宁 (JN)分离物 ,致病性最弱 .但各分离物之间的病害特异性蛋白。 展开更多
关键词 分离物 致病性 水稻 条纹病毒 化学特性 条纹叶枯病
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灰树花中一种抗烟草花叶病毒的蛋白质的纯化及其性质 被引量:12
11
作者 陈宁 吴祖建 +1 位作者 林奇英 谢联辉 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第3期283-286,共4页
通过硫酸铵分级沉淀、阴离子交换柱层析及凝胶过滤柱层析 ,从灰树花子实体中分离到了一种具有抑制烟草花叶病毒 (TMV)侵染活性的热稳定蛋白———GFAP .经常规凝胶电泳和等电聚焦电泳显示为单一条带 ,而SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳结果证明... 通过硫酸铵分级沉淀、阴离子交换柱层析及凝胶过滤柱层析 ,从灰树花子实体中分离到了一种具有抑制烟草花叶病毒 (TMV)侵染活性的热稳定蛋白———GFAP .经常规凝胶电泳和等电聚焦电泳显示为单一条带 ,而SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳结果证明该蛋白质含有两个亚基 ,其分子质量分别为 34ku、 4 0ku .等电聚焦测定蛋白质 pI为 3 76 ,含糖量约为 2 % .GFAP的 4 0ku条带N端氨基酸序列为ACCVPSVTEFENAINSDPVM ,将其与GenBank中的氨基酸序列检索比较后没有发现同源序列 ,预示可能为一新的氨基酸序列 .GFAP与TMV混合接种心叶烟 ,当GFAP浓度为 32mg/L时即可完全抑制浓度为 10mg/L的TMV的侵染 ,而 4mg/L的GFAP对浓度为 4 0mg/L的TMV的抑制率仍可达 6 0 %以上 . 展开更多
关键词 灰树花 抗病毒蛋白 烟草花叶病毒 纯化 TMV 侵染活性 氨基酸序列 浓度
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毛头鬼伞(Coprinus comatus)中一种抗病毒蛋白y3特性和氨基酸序列分析(英文) 被引量:9
12
作者 吴丽萍 吴祖建 +3 位作者 林董 方芳 林奇英 谢联辉 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期597-603,共7页
食用菌中含有多种抗病毒蛋白,可用于植物保护.利用离子交换层析技术和凝胶层析技术,从食用菌毛头鬼伞中提取到抗植物病毒蛋白y3.实验结果表明,y3是一种糖蛋白,利用Western杂交方法可以在发酵菌丝体和子实体中同时检测到,说明可能是组成... 食用菌中含有多种抗病毒蛋白,可用于植物保护.利用离子交换层析技术和凝胶层析技术,从食用菌毛头鬼伞中提取到抗植物病毒蛋白y3.实验结果表明,y3是一种糖蛋白,利用Western杂交方法可以在发酵菌丝体和子实体中同时检测到,说明可能是组成型表达.根据其N端氨基酸序列,使用RACE-PCR克隆技术,获得了蛋白的氨基酸序列和部分cDNA序列.浓度为2.0μg/ml时,蛋白y3对烟草花叶病毒(TMV,20μg/ml)侵染心叶烟的抑制率为50%,实验同时表明,y3还可抑制病毒在寄主普通烟Nicotiana tabacum var.K326中的复制. 展开更多
关键词 食用菌 毛头鬼伞 蛋白 抗病毒活性 克隆
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丹皮酚对烟草花叶病毒的抑制作用 被引量:16
13
作者 刘国坤 陈启建 +2 位作者 吴祖建 林奇英 谢联辉 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2006年第1期17-20,共4页
从牡丹皮中提纯的丹皮酚结晶(0.6 mg.mL-1)与烟草花叶病毒(Tobacco m osaic virus,TMV)混合10 m in后对TMV枯斑抑制率达80%以上,说明丹皮酚对叶圆片中的病毒复制具有抑制作用;电镜下观察丹皮酚与TMV混合对粒体形态没有影响;丹皮酚与TMV... 从牡丹皮中提纯的丹皮酚结晶(0.6 mg.mL-1)与烟草花叶病毒(Tobacco m osaic virus,TMV)混合10 m in后对TMV枯斑抑制率达80%以上,说明丹皮酚对叶圆片中的病毒复制具有抑制作用;电镜下观察丹皮酚与TMV混合对粒体形态没有影响;丹皮酚与TMV混合后透析病毒可恢复侵染力,表明丹皮酚对病毒没有直接毒害作用;用丹皮酚喷施叶面不影响病毒侵染;低含量丹皮酚可阻碍TMV-CP的体外聚合,对TMV-RNA无体外抑制侵染作用.据此推测,丹皮酚对TMV的抑制作用可能主要是通过其与TMV-CP结合而影响病毒粒体对叶片表面侵染位点的识别,或影响植株体内TMV-CP亚基的体内聚合. 展开更多
关键词 丹皮酚 烟草花叶病毒 抑制 机理
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水稻品种对水稻条纹病毒及其介体灰飞虱的抗性鉴定 被引量:27
14
作者 林含新 林奇田 +3 位作者 魏太云 吴祖建 林奇英 谢联辉 《福建农业大学学报》 CSCD 2000年第4期453-458,共6页
经生物学接种鉴定了 38个水稻品种对水稻条纹病毒 ( RSV)的抗性 ,其中 2 9个分别为江苏、云南、辽宁、福建水稻种植区的主栽品种 .结果表明 ,除福建外 ,其他 3个水稻种植区的主栽品种都表现中感或高感 ,这可能是这 3个稻区病害发生严重... 经生物学接种鉴定了 38个水稻品种对水稻条纹病毒 ( RSV)的抗性 ,其中 2 9个分别为江苏、云南、辽宁、福建水稻种植区的主栽品种 .结果表明 ,除福建外 ,其他 3个水稻种植区的主栽品种都表现中感或高感 ,这可能是这 3个稻区病害发生严重的原因之一 .鉴定了 12个品种对 RSV介体灰飞虱的抗性 ,其中有 4个品种表现为抗虫 ,但抗性较低 .研究了 10个品种抗病性与抗虫性之间的关系 ,结果发现 ,4个品种对灰飞虱的抗虫性与其抗病性密切相关 ,相关系数为 99.19% ;而 6个品种的抗虫性与其抗病性的相关系数也达 82 .50 % .结果认为 ,许多水稻品种的抗虫性与其抗病性是紧密相关的 ,但有一些品种则不然 .籼稻品种一般较粳稻品种更具抗虫性 .这些结果说明许多品种的抗 RSV基因和抗灰飞虱基因可能是连锁的 .鉴定发现 ,IR36兼具高抗虫性和高抗病性 。 展开更多
关键词 水稻条纹病毒 水稻灰飞虱 抗性鉴定 抗逆盲种
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湖北发生的水稻矮缩病是南方水稻黑条矮缩病毒引起的 被引量:24
15
作者 章松柏 罗汉刚 +3 位作者 张求东 张长青 吴祖建 谢联辉 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期223-226,共4页
近年来由水稻黑条矮缩病毒和南方水稻黑条矮缩病毒引起的水稻黑条矮缩病在华南、华东等地区暴发流行,给水稻生产带来严重损失,而湖北一直未有水稻黑条矮缩病流行的报道。然而,2009年和2010年在湖北省长江沿线的荆州、孝感、咸宁、黄石... 近年来由水稻黑条矮缩病毒和南方水稻黑条矮缩病毒引起的水稻黑条矮缩病在华南、华东等地区暴发流行,给水稻生产带来严重损失,而湖北一直未有水稻黑条矮缩病流行的报道。然而,2009年和2010年在湖北省长江沿线的荆州、孝感、咸宁、黄石、鄂州、黄冈等水稻种植区普遍发生水稻矮缩减产的现象。经过症状观察、dsRNA电泳图谱分析、RT-PCR等方法,诊断该病是由南方水稻黑条矮缩病毒引起,说明该病毒已经随介体昆虫白背飞虱从我国南方传播至中部水稻种植区。 展开更多
关键词 水稻黑条矮缩病毒 南方水稻黑条矮缩病毒 基因组电泳 反转录聚合酶链式反应 病毒鉴定
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大蒜挥发油抗烟草花叶病毒机理 被引量:17
16
作者 陈启建 刘国坤 +2 位作者 吴祖建 谢联辉 林奇英 《福建农业学报》 CAS 2006年第1期24-27,共4页
从新鲜大蒜中提取的挥发油与烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)混合后可使完整的病毒粒体断裂,且对病毒衣壳蛋白的体外聚合过程有明显的抑制作用,而对病毒的核酸侵染力无显著影响,喷施大蒜挥发油可显著提高烟草体内过氧化物酶和... 从新鲜大蒜中提取的挥发油与烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)混合后可使完整的病毒粒体断裂,且对病毒衣壳蛋白的体外聚合过程有明显的抑制作用,而对病毒的核酸侵染力无显著影响,喷施大蒜挥发油可显著提高烟草体内过氧化物酶和多酚氧化酶的活性。 展开更多
关键词 大蒜挥发油 烟草花叶病毒 抗病毒机理
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杨梅叶提取物抗烟草花叶病毒活性及其化学成分初步研究 被引量:9
17
作者 沈建国 谢荔岩 +2 位作者 翟梅枝 林奇英 谢联辉 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2004年第4期441-443,共3页
以烟草花叶病毒(Tobaccomosaicvirus,TMV)为供试病毒,对杨梅叶提取物抗病毒活性进行测定.结果表明,杨梅叶提取物具有较强的体外钝化和抗病毒侵染作用;通过系统预试和含量测定,初步确定杨梅叶提取物中主要含有黄酮和鞣质2类成分,两者含... 以烟草花叶病毒(Tobaccomosaicvirus,TMV)为供试病毒,对杨梅叶提取物抗病毒活性进行测定.结果表明,杨梅叶提取物具有较强的体外钝化和抗病毒侵染作用;通过系统预试和含量测定,初步确定杨梅叶提取物中主要含有黄酮和鞣质2类成分,两者含量分别在水和体积分数为70%的乙醇提取物中较高. 展开更多
关键词 杨梅 烟草花叶病毒 叶提取物 TMV 侵染 活性 乙醇提取物 初步研究 化学成分 体外
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水稻条叶枯病毒NS2基因遗传多样性分析 被引量:7
18
作者 魏太云 林含新 +2 位作者 吴祖建 林奇英 谢联辉 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期600-605,共6页
应用单链构象多态性 (SSCP)和序列分析方法研究了来自我国 9个省份的水稻条叶枯病毒(RSV) 80个田间分离物的NS2基因遗传结构特征 .SSCP分析结果表明 ,我国RSVNS2基因遗传结构符合准种 (quasispecies)结构特征 .部分分离物的序列分析结... 应用单链构象多态性 (SSCP)和序列分析方法研究了来自我国 9个省份的水稻条叶枯病毒(RSV) 80个田间分离物的NS2基因遗传结构特征 .SSCP分析结果表明 ,我国RSVNS2基因遗传结构符合准种 (quasispecies)结构特征 .部分分离物的序列分析结果表明 ,RSV上述分离物和已报道的日本 2个分离物可以归入 2个组 :云南的部分分离物划分为 1个组 ;其它分离物及日本T、O的 2个分离物为另 1组 .组与组之间 ,NS2蛋白基因核苷酸同源性为 94 %~ 95 % ,氨基酸同源性为 95 %~ 97% .遗传多样性分析结果表明 ,RSV种群存在地理隔离但在种群间可能发生了基因漂移 (geneflow) . 展开更多
关键词 水稻 条叶枯病毒 NS2基因 遗传多样性
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RT-PCR检测齿兰环斑病毒技术的建立 被引量:14
19
作者 明艳林 李梅 +1 位作者 郑国华 吴祖建 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2003年第3期345-347,共3页
根据已报道的齿兰环斑病毒(ORSV)外壳蛋白(CP)基因序列,进行同源性比较,设计了一对各为20bp的引物.通过优化试验条件,建立了稳定的RT-PCR检测ORSV体系,其检测灵敏度可达0.01ng·mL-1.将此方法与ELISA进行比较,结果表明,RT-PCR检测... 根据已报道的齿兰环斑病毒(ORSV)外壳蛋白(CP)基因序列,进行同源性比较,设计了一对各为20bp的引物.通过优化试验条件,建立了稳定的RT-PCR检测ORSV体系,其检测灵敏度可达0.01ng·mL-1.将此方法与ELISA进行比较,结果表明,RT-PCR检测灵敏度比ELISA高1000倍.应用这两种方法同时检测了138瓶兰花组培苗样品,其中RT-PCR检测出32瓶兰花组培苗感染病毒,而ELISA只能检测其中的18瓶. 展开更多
关键词 齿兰环斑病毒 检测 RT-PCR 外壳蛋白 序列分析 同源性 ELISA 兰科植物
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臭椿抗烟草花叶病毒活性物质的提取及其初步分离 被引量:14
20
作者 沈建国 张正坤 +2 位作者 吴祖建 谢联辉 林奇英 《中国生物防治》 CSCD 北大核心 2007年第4期348-352,共5页
以烟草花叶病毒为供试病毒,采用生物活性跟踪的方法对臭椿抗病毒活性物质进行了提取与初步分离。结果表明,臭椿乙醇提取物、甲醇提取物和丙酮提取物均有较好的抗烟草花叶病毒作用;通过系统溶剂提取、硅胶柱层析分离和活性筛选,从臭椿乙... 以烟草花叶病毒为供试病毒,采用生物活性跟踪的方法对臭椿抗病毒活性物质进行了提取与初步分离。结果表明,臭椿乙醇提取物、甲醇提取物和丙酮提取物均有较好的抗烟草花叶病毒作用;通过系统溶剂提取、硅胶柱层析分离和活性筛选,从臭椿乙醇提取物的氯仿极性部位获得两个抗烟草花叶病毒活性组分Fr3与Fr6;经硅胶柱层析进一步分离,氯仿/甲醇梯度洗脱,得到4种相对较纯的活性成分C1、C2、C3、C4。生测结果显示,4种活性成分对烟草花叶病毒具有一定程度的抑制作用,但效果均低于原乙醇提取物,在活体条件下对烟草花叶病毒系统侵染的防治作用不明显。 展开更多
关键词 臭椿 烟草花叶病毒 抗病毒活性
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