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木毒蛾钙黏蛋白基因的克隆及其表达与结构特点分析
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作者 孙媛媛 陈佳宁 +5 位作者 倪涛 任昊杰 蔡鹏宁 彭显程 张飞萍 王荣 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2025年第1期17-25,共9页
【目的】探究木毒蛾钙黏蛋白(LxCad)的分子特征、表达量及其与Cry1Ac毒素的分子互作机制,为深入研究Cry毒素受体蛋白提供参考。【方法】以木毒蛾4龄幼虫cDNA为模板,通过RT-PCR技术对LxCad基因进行克隆并进行生物信息学分析;利用qRT-PCR... 【目的】探究木毒蛾钙黏蛋白(LxCad)的分子特征、表达量及其与Cry1Ac毒素的分子互作机制,为深入研究Cry毒素受体蛋白提供参考。【方法】以木毒蛾4龄幼虫cDNA为模板,通过RT-PCR技术对LxCad基因进行克隆并进行生物信息学分析;利用qRT-PCR技术分析该基因在木毒蛾幼虫不同龄期及不同组织(头、中肠、表皮)中的表达模式;通过毒力测定获得Cry1Ac毒素对木毒蛾2龄幼虫的致死中浓度(LC_(50)),并利用qRT-PCR分析经LC_(50)的Cry1Ac胁迫后LxCad的表达量;对LxCad进行同源建模,并从PDB数据库中下载Cry1Ac 3D模型,利用计算机模拟蛋白-蛋白对接,预测蛋白-蛋白相互作用的氨基酸残基。【结果】克隆获得木毒蛾中肠LxCad基因(GenBank ID:MN380035.1)开放阅读框(ORF)全长序列,全长为5172 bp,编码1723个氨基酸,理论分子质量为194 ku,等电点为4.24;推断出的氨基酸序列包括1个信号肽(SIG)、1个前蛋白区(PRO)、12个Cad重复区(CR)、1个近膜区(MPR)、1个跨膜区(TM)以及1个胞质区(CYT);序列比对和进化树分析表明,LxCad与舞毒蛾的LdCad的一致性最高。qRT-PCR结果表明,LxCad主要分布于木毒蛾幼虫肠道,在5龄幼虫中的表达量最高,在6龄幼虫中次之,低龄幼虫表达量较低;使用Cry1Ac毒素对木毒蛾2龄幼虫进行胁迫后,发现LxCad的表达量相比于对照组显著上调。蛋白-蛋白分子对接分析结果表明,Cry1Ac毒素和LxCad受体中分别有多个氨基酸残基通过氢键相互作用,这些氨基酸残基分别位于PRO、CR8以及CR9中。【结论】木毒蛾LxCad可能是Cry1Ac的潜在受体蛋白。 展开更多
关键词 木毒蛾 钙黏蛋白 Cry毒素受体 表达谱分析 分子对接
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松天牛小首螨的研究Ⅰ.生物学特性 被引量:4
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作者 李俊楠 朱禹臻 +6 位作者 陈润恺 付煜 蔡梦玲 黄炳荣 徐云 吴松青 张飞萍 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第6期79-87,共9页
【目的】松天牛小首螨是新发现的对松褐天牛卵具有寄生和致死作用的微型螨类,研究阐明其生物学特性,为利用该螨防治松褐天牛提供基础依据。【方法】通过室内饲养、显微观察和控制性试验,研究松天牛小首螨的行为习性、寄生率、发育历期... 【目的】松天牛小首螨是新发现的对松褐天牛卵具有寄生和致死作用的微型螨类,研究阐明其生物学特性,为利用该螨防治松褐天牛提供基础依据。【方法】通过室内饲养、显微观察和控制性试验,研究松天牛小首螨的行为习性、寄生率、发育历期、繁殖力和寿命等。【结果】松天牛小首螨属携播螨类,成螨附着在松褐天牛成虫胸腹部,在天牛产卵时沿产卵器爬行到刻槽中寄生天牛卵。该螨营两性生殖,雌成螨寄生天牛卵后腹部膨大形成膨腹体,若螨在母体膨腹体内完成发育,成螨自膨腹体胎生,1个膨腹体通常只产1~2头雄螨,其余均为雌螨。雄成螨先自膨腹体爬出并停留在旁,雌成螨自膨腹体爬出后即寻找雄成螨交尾,交尾过程持续3~6 s。松天牛小首螨对松褐天牛卵的平均寄生率为80.85%,被寄生的松褐天牛卵均干瘪、死亡。温度对该螨发育历期、雌成螨寿命和膨腹体大小均有显著影响,随着温度升高其发育历期和雌成螨寿命均显著缩短。该螨在17℃下的平均发育历期为6.9天,在33℃下为2.2天,其发育起点温度为(10.44±0.09)℃,有效积温为(46.28±0.28)d·℃;雌成螨在15℃下的平均寿命为70.3天,在30℃下为10.7天;雌螨膨腹体体积在21℃下为1.54 mm 3,在17℃下为0.72 mm 3。松天牛小首螨在25℃下平均每雌可产71.2头后代,最少14头,最多139头。该螨繁殖力与母体膨腹体大小呈显著正相关,当膨腹体体积小于1.0 mm 3时,平均每雌可产后代32.2头,但当膨腹体体积大于3.0 mm 3时,则平均每雌可产后代110.9头。【结论】松天牛小首螨对松褐天牛卵的寄生和致死率高,发育速度快、繁殖力强、易于人工扩繁和传播扩散,是极具应用潜能的生物防治因子。 展开更多
关键词 松天牛小首螨 松褐天牛 松材线虫病 生物学特性
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转基因抗虫玉米对草地贪夜蛾的防控 被引量:3
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作者 张晓雪 张治民 林志艺 《四川农业科技》 2023年第8期32-35,共4页
作为世界范围内重要的粮食作物,玉米的健康生长备受关注。随着种植面积的增大导致玉米病虫害大幅增加。草地贪夜蛾是近几年入侵我国的一种重大农业害虫,已经对玉米造成了极大的危害。由于其并非本国新生物种,在入侵我国之前已经接受过... 作为世界范围内重要的粮食作物,玉米的健康生长备受关注。随着种植面积的增大导致玉米病虫害大幅增加。草地贪夜蛾是近几年入侵我国的一种重大农业害虫,已经对玉米造成了极大的危害。由于其并非本国新生物种,在入侵我国之前已经接受过多国的化学药剂防控,具有极强的抗药性。转基因作物技术作为全球研发热点,且转基因抗虫作物在我国逐渐走向成熟,为我国主要经济作物的发展提供了新的机遇,因此培育和种植转基因抗虫玉米成为解决草地贪夜蛾的关键。 展开更多
关键词 草地贪夜蛾 防控措施 转基因抗虫玉米
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西部喙缘蝽的识别、危害及入侵防控对策 被引量:2
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作者 吴炫璇 郑起连 +1 位作者 雷华 林志艺 《四川农业科技》 2023年第5期43-46,共4页
西部喙缘蝽(Leptoglossus occidentalis)属于半翅目(Hemiptera)、缘蝽科(Coreidae),原产于北美,主要以针叶树的未成熟球果为食,使大量松树发育不良甚至枯萎死亡,近十几年来成功入侵欧洲、东亚等多个国家和地区,成为全球范围内的入侵性... 西部喙缘蝽(Leptoglossus occidentalis)属于半翅目(Hemiptera)、缘蝽科(Coreidae),原产于北美,主要以针叶树的未成熟球果为食,使大量松树发育不良甚至枯萎死亡,近十几年来成功入侵欧洲、东亚等多个国家和地区,成为全球范围内的入侵性害虫。尽管目前在中国内地没有入侵现象,但在与中国相邻的韩国、日本等国家和地区入侵严重,对中国构成巨大威胁,因此我国必须加强对西部喙缘蝽的检疫监测与防控。文章综述了西部喙缘蝽的识别、生态学习性以及入侵为害,简述了目前国外已有的检疫技术和生物防控技术,并提出目前国内开展西部喙缘蝽检疫监测与防控的问题和障碍,以期为后续研究提供参考。 展开更多
关键词 西部喙缘蝽 识别 入侵 危害 防控对策
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粘质沙雷氏菌在环境修复与农业虫害生物防治的研究概述 被引量:2
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作者 李晴 吴建凯 林志艺 《四川农业科技》 2023年第8期40-43,共4页
随着环境污染的日益加剧,人们越来越期待一种绿色安全高效的生物修复与防治手段。粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)是的良好昆虫内生菌,在近年来是生物防治的研究热门物种,本文综述了粘质沙雷氏菌在重金属污染、化学杀虫剂污染生物修... 随着环境污染的日益加剧,人们越来越期待一种绿色安全高效的生物修复与防治手段。粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)是的良好昆虫内生菌,在近年来是生物防治的研究热门物种,本文综述了粘质沙雷氏菌在重金属污染、化学杀虫剂污染生物修复与农业害虫生物防治上的重点物种与主要防治原理,同时针对粘质沙雷氏菌的未来发展提出了需要解决的问题与障碍,以期为未来微生物制剂的发展提供一些帮助。 展开更多
关键词 粘质沙雷氏菌 重金属生物修复 生物防治
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松墨天牛肠道微生物研究进展 被引量:1
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作者 时增增 吴岩镇 林志艺 《四川农业科技》 2022年第11期46-48,共3页
松墨天牛是松材线虫病的主要传播媒介,松材线虫病对松树致死率极高,已对我国森林生态系统造成了重大的危害。昆虫肠道是包含细菌、真菌等微小生物的富集之地。松墨天牛的肠道微生物不仅可以调控天牛的消化系统还可以增强天牛的内稳态平... 松墨天牛是松材线虫病的主要传播媒介,松材线虫病对松树致死率极高,已对我国森林生态系统造成了重大的危害。昆虫肠道是包含细菌、真菌等微小生物的富集之地。松墨天牛的肠道微生物不仅可以调控天牛的消化系统还可以增强天牛的内稳态平衡。文章基于国内外研究进展,系统论述了松墨天牛肠道微生物的群落组成以及功能,并进一步探讨了未来防治松墨天牛的思路,为利用肠道微生物防治松墨天牛提供参考。 展开更多
关键词 松墨天牛 肠道微生物 生物防治
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木毒蛾氨肽酶N1基因克隆与表达分析 被引量:3
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作者 林健聪 孙悦 +3 位作者 刘用垄 王锦达 王荣 张飞萍 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期94-100,共7页
【目的】氨肽酶N(APN)是昆虫中肠一类重要的Bt受体蛋白,Bt细菌产生的Cry毒素对昆虫的毒杀作用机理在学术界存在一定争议,但是普遍认为毒素与Bt受体蛋白的结合是产生毒力的必要环节。本研究通过基因克隆、生物信息学分析以及不同龄期组... 【目的】氨肽酶N(APN)是昆虫中肠一类重要的Bt受体蛋白,Bt细菌产生的Cry毒素对昆虫的毒杀作用机理在学术界存在一定争议,但是普遍认为毒素与Bt受体蛋白的结合是产生毒力的必要环节。本研究通过基因克隆、生物信息学分析以及不同龄期组织中的表达对木毒蛾APN1基因进行研究,为后续研究APN基因家族、其他Bt受体蛋白及Cry毒素作用机制提供有益补充。【方法】以木毒蛾中肠cDNA为模板,对木毒蛾APN1基因进行克隆并进行生物学分析,利用实时定量PCR(qRT-PCR)技术分析该基因在木毒蛾发育阶段及不同组织中的表达模式。【结果】克隆获得木毒蛾APN1基因的全长DNA,命名为LxAPN1。LxAPN1序列全长为3159 bp,ORF为3054 bp,编码1017个氨基酸,序列比对和进化树分析表明,LxAPN1与舞毒蛾的LdAPN1高度同源,在N-端都具有信号肽,都具有锌结合位点HEXXH(X18)E以及保守区域GAMENWG,在末端具有GPI结合位点;LxAPN1在木毒蛾卵期无表达,在所有幼虫阶段中均有表达,幼虫期过后LxAPN1表达量锐减;LxAPN1在肠道的表达量明显高于头部和表皮。【结论】LxAPN1在木毒蛾中肠被成功克隆,LxAPN1与LdAPN1高度同源,并且在进化树的分布上也极其相近,推测两者的APN1功能上近似;LxAPN1在木毒蛾2龄幼虫期表达量最高。并且在6龄幼虫肠道中表达量最高,肠道高表达与LxAPN1作为Bt受体在木毒蛾中肠发挥作用息息相关。 展开更多
关键词 木毒蛾 Bt受体 氨肽酶N 克隆
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木毒蛾蛹性别的快速鉴定 被引量:3
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作者 孙悦 刘用垄 +4 位作者 孙媛媛 任昊杰 陈佳宁 张飞萍 王荣 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2023年第5期628-631,共4页
木毒蛾是我国东南沿海木麻黄防护林最主要的食叶害虫。通过对木毒蛾雌、雄蛹(老熟)外部形态特征进行观测,发现其主要差异如下:雌蛹平均体长(30.36±2.30)mm,平均质量(1.73±0.35)g,平均体宽(10.57±0.78)mm,均大于雄蛹[平... 木毒蛾是我国东南沿海木麻黄防护林最主要的食叶害虫。通过对木毒蛾雌、雄蛹(老熟)外部形态特征进行观测,发现其主要差异如下:雌蛹平均体长(30.36±2.30)mm,平均质量(1.73±0.35)g,平均体宽(10.57±0.78)mm,均大于雄蛹[平均体长(23.51±1.65)mm,平均质量(0.74±0.14)g,平均体宽(8.46±0.60)mm];雌蛹头部腹面较为平整,雄蛹更为立体;雌蛹的中足明显较雄蛹宽且长;雌蛹的生殖孔与产卵孔均位于第8~9腹节连接处向第9腹节延伸的纵裂缝上,而雄蛹的生殖孔位于第9腹节中间处;雌蛹的排泄孔距生殖孔较远,而雄蛹较为接近。综合以上外部特征判断木毒蛾蛹性别,准确率可达100%。这可为木毒蛾的野外采样、林间性比研究及其监测预警提供一定依据。 展开更多
关键词 木毒蛾 性别 快速鉴定
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松材线虫病疫木处理技术综述 被引量:8
9
作者 林一琪 张治民 林志艺 《四川农业科技》 2023年第1期44-46,共3页
文章阐述了历年来常见病疫木处理类型及优缺点,包括就地或异地火烧处理、熏蒸处理、炕房热烘处理、就地或异地切片锯板、处理伐桩、将疫木转变为活性炭、种植茯苓、释放引诱剂、无人机喷洒药物等方式,并通过参考相关园林废弃枝干处理技... 文章阐述了历年来常见病疫木处理类型及优缺点,包括就地或异地火烧处理、熏蒸处理、炕房热烘处理、就地或异地切片锯板、处理伐桩、将疫木转变为活性炭、种植茯苓、释放引诱剂、无人机喷洒药物等方式,并通过参考相关园林废弃枝干处理技术,探究有害种类防治的策略与措施,提出针对性建议以及对未来的展望。 展开更多
关键词 松墨天牛 松材线虫病 防治技术
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棉铃虫综合防治概述 被引量:4
10
作者 张晓雪 罗明勇 林志艺 《四川农业科技》 2023年第7期55-57,共3页
棉铃虫是威胁棉花和花生等作物的主要害虫,在世界范围内广泛存在。掌握该类害虫的发生规律以便及时采取措施进行防控,确保在短时间内控制病情来尽可能减少对农作物的损害。农户也可以通过众多防治措施来选择出最适合自家农作物的防治方... 棉铃虫是威胁棉花和花生等作物的主要害虫,在世界范围内广泛存在。掌握该类害虫的发生规律以便及时采取措施进行防控,确保在短时间内控制病情来尽可能减少对农作物的损害。农户也可以通过众多防治措施来选择出最适合自家农作物的防治方法来减少经济损失。笔者主要讲述了棉铃虫的发生规律及综合防治措施,包括棉铃虫的发生世代及发生条件,农业防治、物理防治、化学防治、生物防治,以期让更多的农户受益。 展开更多
关键词 棉花 棉铃虫 发生规律 综合防治
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基因功能验证方法及研究进展 被引量:2
11
作者 雷华 赵广展 林志艺 《四川农业科技》 2023年第9期83-86,共4页
随着生命科学的不断发展,基因的功能研究成为“后基因组时代”的一个重要课题,越来越多的基因被成功克隆,使得基因在生物生长发育过程中所起到的重要作用也逐渐被人们认识。对植物和昆虫中具有多种功能的基因进行功能验证是研究其生长... 随着生命科学的不断发展,基因的功能研究成为“后基因组时代”的一个重要课题,越来越多的基因被成功克隆,使得基因在生物生长发育过程中所起到的重要作用也逐渐被人们认识。对植物和昆虫中具有多种功能的基因进行功能验证是研究其生长发育不可或缺的部分。笔者对近几年来运用较为广泛功能验证技术进行简要介绍及研究进展概述,为下一步实验研究提供理论基础。 展开更多
关键词 基因敲除 RNA干扰 基因过表达 微阵列分析 基因诱捕
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松墨天牛人工饲养研究进展
12
作者 熊丽娅 张治民 林志艺 《四川农业科技》 2022年第10期48-50,共3页
松墨天牛是毁灭性病害松材线虫病的主要传播媒介,控制松墨天牛的种群数量是防控该病的关键环节之一。拥有充足的虫源是进行生物测定实验的基础条件,然而松墨天牛在野外一年一代限制了新研发实验试剂的试用,因此拥有大量的虫源极为重要... 松墨天牛是毁灭性病害松材线虫病的主要传播媒介,控制松墨天牛的种群数量是防控该病的关键环节之一。拥有充足的虫源是进行生物测定实验的基础条件,然而松墨天牛在野外一年一代限制了新研发实验试剂的试用,因此拥有大量的虫源极为重要。本文就现阶段松墨天牛卵、幼虫、成虫、蛹的形态及饲养方法做归纳总结,为松墨天牛的人工饲养提供一些帮助。 展开更多
关键词 松墨天牛 外观形态 人工饲养
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刚竹毒蛾发生规律与防治技术
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作者 黄静 罗明永 林志艺 《四川农业科技》 2022年第12期48-50,共3页
刚竹毒蛾是竹子的主要害虫,在严重危害条件下可对竹林造成完全破坏,竹子遭幼虫取食后其经济价值将全面下降。文章重点是研究目前国内外的刚竹毒蛾发生规律及其防治的主要技术,从化学、生物、物理、营林调控和其他综合防治技术措施共5个... 刚竹毒蛾是竹子的主要害虫,在严重危害条件下可对竹林造成完全破坏,竹子遭幼虫取食后其经济价值将全面下降。文章重点是研究目前国内外的刚竹毒蛾发生规律及其防治的主要技术,从化学、生物、物理、营林调控和其他综合防治技术措施共5个方面来进行全面综述。结合以上多种常规防治的手段进行病虫害综合治理能更高效地降低刚竹毒蛾虫口密度,进而科学地对刚竹毒蛾病虫害进行预防诊断及合理防治。 展开更多
关键词 刚竹毒蛾发生规律 综合防治 生态调控
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