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甜瓜实时荧光定量PCR分析中内参基因的筛选 被引量：6
1
作者 章丽珍 韩晓云 +2 位作者 吴菁华 GefuWANG-PRUSKI 张志忠 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1179-1187,共9页
【目的】筛选可分别在甜瓜不同组织器官和不同胁迫处理下稳定表达的内参基因,用于对靶基因表达量的实时荧光定量分析,保证相关试验的准确性及可靠性。【方法】以甜瓜品种新银辉为试验材料,通过实时荧光定量PCR技术分析18s rRNA、TUA、E... 【目的】筛选可分别在甜瓜不同组织器官和不同胁迫处理下稳定表达的内参基因,用于对靶基因表达量的实时荧光定量分析,保证相关试验的准确性及可靠性。【方法】以甜瓜品种新银辉为试验材料,通过实时荧光定量PCR技术分析18s rRNA、TUA、EF1a、Actin1、Actin2、Actin3、Actin4、CYC和UBI-ep共9个候选内参基因在甜瓜不同组织器官及不同胁迫处理下的表达稳定性,包括甜瓜根、叶、种子和果实4种不同组织材料,以及水分胁迫、肉桂酸胁迫、盐碱胁迫和ABA胁迫4种处理。同时使用Best-Keeper、Norm Finder和ge Norm软件对9个候选内参基因进行稳定性分析。【结果】对不同组织器官而言,Best-Keeper评估排名前5的内参基因依次为CYC>18s rRNA>UBI-ep>EF1a>TUA;Norm Finder计算排名前5的内参基因依次为EF1a>UBI-ep>Actin4>CYC>Actin3;ge Norm分析排名前5的基因依次为Actin4=Actin3>Actin1>EF1a>UBI-ep。不同胁迫处理中,Best-Keeper计算排名前5的基因依次为18s rRNA>Actin3>Actin4>EF1a>UBI-ep;Norm Finder分析排名前5的基因依次为EF1a>UBIep>Actin4>CYC>18s rRNA;ge Norm分析排名前5的基因依次为EF1a=UBI-ep>Actin4>CYC>Actin1。总体而言EF1a在不同组织器官和不同胁迫处理中的综合排名均较为稳定;Actin4、Actin3、Actin1和EF1a是不同组织器官中较为稳定的内参基因组合;EF1a和UBI-ep是4种胁迫条件下较稳定的内参基因组合。【结论】EF1a在甜瓜不同组织器官及不同胁迫条件下均可稳定表达,是较为合适的内参基因;同时可通过设置双内参基因进一步降低试验误差。 展开更多
关键词 甜瓜 内参基因 实时荧光定量PCR 组织器官 胁迫
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模拟盐渍化对甜瓜种子萌发和幼苗生理特性的影响 被引量：8
2
作者 张贝贝 樊佳茹 +4 位作者 王景荣 韩晓云 袁慧敏 Gefu WANG-PRUSKI 张志忠 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2020年第5期912-920,共9页
为了解盐渍化对甜瓜种子萌发的影响,本研究以甜瓜品种’新银辉’为材料,采用NaCl和NaHCO3单独处理和复合处理模拟盐渍化,观测不同处理下甜瓜种子萌发情况以及生理生化指标的变化。结果表明:NaCl、NaHCO3、NaCl和NaHCO3复合处理模拟的盐... 为了解盐渍化对甜瓜种子萌发的影响,本研究以甜瓜品种’新银辉’为材料,采用NaCl和NaHCO3单独处理和复合处理模拟盐渍化,观测不同处理下甜瓜种子萌发情况以及生理生化指标的变化。结果表明:NaCl、NaHCO3、NaCl和NaHCO3复合处理模拟的盐渍化几乎都对甜瓜种子萌发产生了抑制作用,胁迫浓度越高,抑制作用越明显;仅低浓度(50 mmol/L)的NaCl表现出一定的促进作用。NaCl和NaHCO3复合处理后甜瓜种子萌发过程中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性随着处理时间增加,呈升-降-升的趋势;过氧化物酶(POD)活性先上升后下降;脯氨酸(Pro)含量持续上升;可溶性糖含量持续下降;丙二醛(MDA)含量始终显著高于蒸馏水对照;淀粉含量随着处理时间增加呈下降的趋势,α-淀粉酶活性和β-淀粉酶活性均呈先下降、后上升的趋势。模拟盐渍化明显抑制甜瓜种子的萌发和幼苗生长,保护酶活性、淀粉代谢在应对胁迫中起到了明显作用,研究结果有助于为甜瓜耐盐机制和设施栽培提供有益的参考。 展开更多
关键词 甜瓜 盐渍化 种子萌发 保护酶 淀粉代谢
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自毒胁迫下外源硅对甜瓜幼苗生长和叶绿素荧光的影响 被引量：2
3
作者 樊佳茹 章丽珍 +3 位作者 王景荣 张贝贝 Gefu Wang-Pruski 张志忠 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期638-645,共8页
【目的】通过筛选可以有效缓解甜瓜幼苗自毒胁迫的硅酸钠浓度,对不同处理条件下幼苗生长指标和叶绿素荧光参数的变化进行测定,初步明确外源硅缓解甜瓜自毒胁迫的形态学和光合基础,以期为克服甜瓜连作障碍提供有益参考。【方法】以甜瓜2... 【目的】通过筛选可以有效缓解甜瓜幼苗自毒胁迫的硅酸钠浓度,对不同处理条件下幼苗生长指标和叶绿素荧光参数的变化进行测定,初步明确外源硅缓解甜瓜自毒胁迫的形态学和光合基础,以期为克服甜瓜连作障碍提供有益参考。【方法】以甜瓜2叶1心幼苗为材料,利用质量浓度为0.03g·mL^-1的植株浸提液模拟自毒胁迫,分别添加不同浓度硅酸钠(0、1、2、4、8、16、32mmol·L^-1)溶液进行复合处理;通过观测幼苗生长状态,测量株高、根长、鲜重、茎粗及根系表面积等形态学指标,筛选出能有效缓解自毒胁迫的硅酸钠浓度。采用筛选出的最佳硅酸钠浓度处理自毒胁迫条件下的甜瓜幼苗,于不同取样时间点测定幼苗株高、叶面积、鲜重、地上部分干重和叶绿素荧光特征,分析这一缓解作用的形态学和光合基础。【结果】4mmol·L^-1的硅酸钠可以有效缓解甜瓜幼苗的自毒胁迫。自毒胁迫显著抑制了幼苗株高,减少了叶面积,Fv'/Fm'、Y(Ⅱ)、qP和Y(NPQ)值均表现出不同程度的下降,NPQ和Y(NO)有所升高。添加硅酸钠可以明显缓解自毒胁迫对幼苗生长的影响,Fv'/Fm'、Y(Ⅱ)、NPQ、qP、Y(NPQ)和Y(NO)等参数接近或优于对照。【结论】适当浓度的外源硅处理可以改善自毒胁迫条件下甜瓜幼苗的生长状态,在一定程度上维持叶片光合系统的稳定,进而提高甜瓜植株对自毒胁迫的抵抗能力。 展开更多
关键词 甜瓜 硅 自毒作用 叶绿素荧光
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