福建香蕉种质资源的研究与利用现状 被引量：7

1

作者 代立春 刘金福 +3 位作者 潘东明 赖钟雄 吴少华 李英豪 《亚热带农业研究》 2008年第4期254-257,共4页

香蕉种质资源研究是香蕉研究中的一个重要方面。本文概述了国内外香蕉种质资源的研究利用情况,香蕉种质资源的研究,已经从最初的形态学水平深入到了分子水平,分子标记和基因工程等新的手段和方法已经得到了广泛应用;分析了福建香蕉种质... 香蕉种质资源研究是香蕉研究中的一个重要方面。本文概述了国内外香蕉种质资源的研究利用情况,香蕉种质资源的研究,已经从最初的形态学水平深入到了分子水平,分子标记和基因工程等新的手段和方法已经得到了广泛应用;分析了福建香蕉种质资源的研究现状,并对福建香蕉种质资源的研究发展方向作了讨论。 展开更多

关键词 香蕉 种质资源 利用

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幼胚胚性愈伤组织诱导的研究 被引量：12

2

作者 陈桂信 谢文龙 +2 位作者 潘东明 郭志雄 赖钟雄 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期44-49,共6页

试验以油（木奈）幼胚为材料，研究外植体大小、低温处理、基本培养基类型、碳源、培养基中的2，4-D浓度、AgNO3的添加与否对胚性愈伤组织诱导的影响，结果表明，长轴为5—7．9mm低温处理18h的幼胚，诱导胚性愈伤组织的效果最好；使用... 试验以油（木奈）幼胚为材料，研究外植体大小、低温处理、基本培养基类型、碳源、培养基中的2，4-D浓度、AgNO3的添加与否对胚性愈伤组织诱导的影响，结果表明，长轴为5—7．9mm低温处理18h的幼胚，诱导胚性愈伤组织的效果最好；使用山梨醇（浓度为3％）为碳源、含氮量低的WPM培养基，胚性愈伤组织的诱导效果优于蔗糖为碳源、含氮量高的MS培养基；幼胚胚性愈伤组织诱导的最适2，4-D浓度为2．0mg／L，培养基中附加5．0mg／LAgNO3有助于提高胚性愈伤组织的诱导率。 展开更多

关键词 (木奈) 幼胚 胚性愈伤组织 诱导

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中国水仙花基因工程的研究现状 被引量：5

3

作者 马传营 潘东明 +1 位作者 钟凤林 郭志雄 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期36-39,共4页

重点综述了中国水仙花香、花色、花发育、抗性和遗传转化等方面基因的研究现状;探讨了基因调控和改善花观赏价值的方法;简要指出了在研究中存在的问题及展望了其应用前景。

关键词 中国水仙 花香 花色 花发育 遗传转化 基因工程

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福建柚类种质资源的ISSR分析 被引量：9

4

作者 钟凤林 施维属 潘东明 《热带作物学报》 CSCD 2010年第11期1964-1968,共5页

从100条ISSR引物中筛选出14条具有多态性谱带的引物,对福建柚类16份种质资源进行ISSR分析。结果显示：14条引物共扩增出177个位点,有123个多态性位点,多态性百分率为69.49%,福建柚类种质资源的相似系数在0.5260.984之间。其中,‘胡柚’... 从100条ISSR引物中筛选出14条具有多态性谱带的引物,对福建柚类16份种质资源进行ISSR分析。结果显示：14条引物共扩增出177个位点,有123个多态性位点,多态性百分率为69.49%,福建柚类种质资源的相似系数在0.5260.984之间。其中,‘胡柚’与‘三明金柚’相似系数最高,为0.984;‘澳洲柚’与‘土柚’相似系数最低,为0.526。相似系数在0.553处,16份种质可分为两大类,‘胡柚’、‘三明金柚’、‘澳洲柚’、‘福柚’及‘新路比葡萄柚’属第一大类,其余柚类种质为第二大类。 展开更多

关键词 柚类 ISSR 亲缘关系 聚类分析

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六月早柚果实常温贮藏期间糖酸含量变化 被引量：1

5

作者 徐成妍 王乃玉 +2 位作者 蔡净蓉 赵俊跃 佘文琴 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期765-773,共9页

【目的】探究六月早柚果实常温贮藏过程中糖酸组分含量变化与其风味品质的关系,为优化柚类品种结构提供理论和实践依据。【方法】以六月早柚为试验材料,琯溪蜜柚为对照,应用超高效液相色谱法测定并分析六月早柚果实贮藏期有机酸组分(柠... 【目的】探究六月早柚果实常温贮藏过程中糖酸组分含量变化与其风味品质的关系,为优化柚类品种结构提供理论和实践依据。【方法】以六月早柚为试验材料,琯溪蜜柚为对照,应用超高效液相色谱法测定并分析六月早柚果实贮藏期有机酸组分(柠檬酸、苹果酸、奎尼酸、顺乌头酸、酒石酸、琥珀酸、α-酮戊二酸)和可溶性糖组分(葡萄糖、果糖、蔗糖)含量的变化。【结果】常温贮藏期间六月早柚汁胞总酸、柠檬酸和苹果酸含量增加,于贮藏35 d达到最大值,分别是同时期琯溪蜜柚的81.18%、84.17%和1.90倍;六月早柚葡萄糖和果糖含量先降低后增加,均在贮藏10 d出现最小值,分别为同时期琯溪蜜柚的1.30倍和1.47倍;蔗糖含量先增加后降低,在贮藏10 d出现最大值,仅为同时期琯溪蜜柚的84.45%;六月早柚糖酸比逐渐降低,贮藏35 d最小,是同时期琯溪蜜柚的1.27倍,且与苹果酸含量呈显著负相关(P<0.01)。【结论】常温贮藏期间六月早柚汁胞柠檬酸和蔗糖的含量较低,糖酸比及苹果酸、果糖和葡萄糖的含量较高,这可能是导致贮藏期六月早柚果实风味变化优于琯溪蜜柚的原因。 展开更多

关键词 六月早柚 常温贮藏 可溶性糖 有机酸

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三红蜜柚肉桂酰辅酶A还原酶基因的克隆与表达分析

6

作者 蒋静怡 刘蕴暄 +3 位作者 王欣佳 郭志雄 佘文琴 潘腾飞 《福建农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第12期1365-1373,共9页

【目的】肉桂酰辅酶A还原酶(cinnamoyl-CoA reductase,CCR)基因是木质素合成的关键基因,本研究旨在探明该基因在柚汁胞粒化过程中的作用机制。【方法】通过生物信息学、基因克隆与亚细胞定位、荧光定量PCR技术,筛选克隆三红蜜柚CmCCR基... 【目的】肉桂酰辅酶A还原酶(cinnamoyl-CoA reductase,CCR)基因是木质素合成的关键基因,本研究旨在探明该基因在柚汁胞粒化过程中的作用机制。【方法】通过生物信息学、基因克隆与亚细胞定位、荧光定量PCR技术,筛选克隆三红蜜柚CmCCR基因,及其在两个品种(三红蜜柚和六月早1号柚)不同发育时期果实汁胞中的表达情况,并利用乙酰溴法测定柚汁胞木质素含量。【结果】从三红蜜柚汁胞转录组数据中筛选得到5个CmCCR基因,根据果实汁胞成熟期木质素含量与CmCCRs基因的转录水平变化的相关性,初步明确CmCCR1可能参与汁胞木质素代谢;克隆所得CmCCR1基因序列,其开放阅读框长度为1017 bp;生物信息学分析发现,该基因编码的CmCCR1蛋白分子量为37.5 kDa,等电点(pI)7.06,属于稳定亲水蛋白,含有NAD(P)H/NAD(P)(+)结合(NADB)域,与甜橙CcCCR1有3个相同的Motif,分布情况也大致相同;进化树分析结果表明,CmCCR1与甜橙CcCCR1的亲缘关系最近,且都归于双子叶植物分组;亚细胞定位结果表明CmCCR1定位于内质网(膜)上,与软件预测的结果相吻合;实时定量PCR结果显示CmCCR1基因的表达量中三红蜜柚汁胞成熟阶段显著上升,在六月早1号柚汁胞发育过程中的相对表达量一直处于较低水平,且显著低于同一发育阶段三红蜜柚汁胞的相对表达量;将CmCCR1瞬时转化至六月早1号柚汁胞,发现瞬时转化的汁胞中CmCCR1基因的表达量显著上升,间苯三酚染色程粉红色,说明汁胞中出现了木质素的积累。【结论】CmCCR1基因可能参与调控三红蜜柚汁胞木质素等次级代谢产物的生物合成,其表达量的上升与柚汁胞粒化的发生有关。 展开更多

关键词 柚 肉桂酰辅酶A还原酶 基因克隆 表达分析

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柑橘基因组DNA快速提取及ISSR-PCR扩增体系优化 被引量：22

7

作者 施维属 潘腾飞 +5 位作者 钟凤林 潘东明 李开拓 王江波 郭志雄 刘天亮 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期109-113,共5页

对CTAB-mini法进行改良,得到一种效率较高的柑橘DNA提取方法。试验结果表明,得到的高质量DNA适合柑橘ISSR分析。同时,采用正交设计对影响柑橘ISSR-PCR因子进行优化。试验结果表明:20μl反应体系中采用5ng模板DNA、0.35mmol/LdNTPs、0.15... 对CTAB-mini法进行改良,得到一种效率较高的柑橘DNA提取方法。试验结果表明,得到的高质量DNA适合柑橘ISSR分析。同时,采用正交设计对影响柑橘ISSR-PCR因子进行优化。试验结果表明:20μl反应体系中采用5ng模板DNA、0.35mmol/LdNTPs、0.15μmol/LPrimer、1UTaq酶和3μl10×Buffer(含Mg2+)为柑橘ISSR-PCR最优反应体系。 展开更多

关键词 柑橘 CTAB-mini DNA提取 ISSR 正交设计 体系优化

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橄榄ISSR-PCR反应体系的优化 被引量：15

8

作者 刘天亮 潘东明 +3 位作者 许长同 李开拓 王江波 施维属 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期137-141,共5页

采用正交设计和单因素试验,以BDB(CA)7为引物,对ISSR-PCR扩增橄榄基因组DNA的主要影响因子进行了筛选和分析,优化了适宜于橄榄ISSR-PCR的扩增体系。结果表明,20μL的反应体系中采用40ng的模板DNA,0.2mmol/LdNTPs,0.25μmol/LISSR引物、1... 采用正交设计和单因素试验,以BDB(CA)7为引物,对ISSR-PCR扩增橄榄基因组DNA的主要影响因子进行了筛选和分析,优化了适宜于橄榄ISSR-PCR的扩增体系。结果表明,20μL的反应体系中采用40ng的模板DNA,0.2mmol/LdNTPs,0.25μmol/LISSR引物、1UTaq聚合酶,以及51.6℃-53℃的复性温度为橄榄ISSR-PCR扩增的最优条件。 展开更多

关键词 橄榄 ISSR 优化 PCR

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琯溪蜜柚汁胞在发育与粒化过程中APX活性变化及同工酶分析 被引量：7

9

作者 钟凤林 郭志雄 +2 位作者 李开拓 王江波 潘东明 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期27-31,共5页

对不同发育时期的琯溪蜜柚(Citrus grandis‘Guanximiyou’)汁胞进行APX活性测定及同工酶分析。结果表明,随着汁胞的发育,APX活性增大;而柚子衰老腐烂时,APX活性迅速降低。APX同工酶随着汁胞发育而发生变化,花后150d的APX同工酶增加了1... 对不同发育时期的琯溪蜜柚(Citrus grandis‘Guanximiyou’)汁胞进行APX活性测定及同工酶分析。结果表明,随着汁胞的发育,APX活性增大;而柚子衰老腐烂时,APX活性迅速降低。APX同工酶随着汁胞发育而发生变化,花后150d的APX同工酶增加了1个组分(迁移率0.66),且随着汁胞的成熟,其表达量增加。花后230d时柚子开始衰老腐烂,花后242d已难以看到大部分APX同工酶酶谱。粒化汁胞的APX活性比正常汁胞大,同工酶酶谱亮度和清晰度也大,推测溪蜜柚汁胞在粒化过程中APX可清除活性氧自由基,抵抗氧化损伤。 展开更多

关键词 蜜柚 汁胞 发育 粒化 APX 同工酶

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24份甜橙种质资源的ISSR分析 被引量：16

10

作者 施维属 王江波 +2 位作者 李开拓 潘腾飞 潘东明 《热带作物学报》 CSCD 2010年第6期902-907,共6页

从97条ISSR引物中筛选出14条能扩增出清晰的具有多态性DNA谱带的引物,分别对24份甜橙种质基因组总DNA进行PCR扩增,共获得147个位点,其中54个位点具有多态性。利用SPSS13.0软件对数据进行分析,结果显示,24份甜橙种质间相似系数在0.815~0.... 从97条ISSR引物中筛选出14条能扩增出清晰的具有多态性DNA谱带的引物,分别对24份甜橙种质基因组总DNA进行PCR扩增,共获得147个位点,其中54个位点具有多态性。利用SPSS13.0软件对数据进行分析,结果显示,24份甜橙种质间相似系数在0.815~0.983之间,表明24份甜橙种质间亲缘关系较近;相似系数在0.851处,24份甜橙种质被分为3组,ISSR分子标记的分析结果与形态学观察及传统分类结果基本吻合。通过对PCR扩增谱带的分析,结果显示,引物CW39119为‘奈维林娜脐橙’种质的特异性标记,引物CW32439为‘红肉脐橙’红梗与白梗种质的特异性标记,引物CW32445为‘纽荷尔脐橙’与‘脐橙52号’种质的特异性标记。 展开更多

关键词 甜橙 ISSR 亲缘关系 聚类分析

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苦瓜果实β-半乳糖苷酶基因的克隆、表达及亚细胞定位 被引量：7

11

作者 高山 陈桂信 +3 位作者 许端祥 林碧英 林义章 潘东明 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1124-1129,共6页

根据已构建苦瓜果实均一化文库中获得的1个与β-Gal基因相关的EST序列,采用经3'RACE技术,克隆获得1个苦瓜β-Gal基因的cDNA序列McGAL,全长为2261 bp,开放阅读框2160 bp,编码719个氨基酸。该基因在GenBank基因数据库的登录号为AFD549... 根据已构建苦瓜果实均一化文库中获得的1个与β-Gal基因相关的EST序列,采用经3'RACE技术,克隆获得1个苦瓜β-Gal基因的cDNA序列McGAL,全长为2261 bp,开放阅读框2160 bp,编码719个氨基酸。该基因在GenBank基因数据库的登录号为AFD54987.1。应用生物信息学软件对McGAL氨基酸序列分析表明,McGAL含有糖苷水解酶家族35的保守结构域G-G-P-[LIVM]-x-Q-x-E-N-E-[FY],C端不含凝集素结构域。二级结构显示,该酶含有α-螺旋(19.89%)、伸展链(26.98%)、β-转角(6.54%)和无规卷曲(46.59%)。McGAL氨基酸序列与鹰嘴豆、苜蓿、绿豆、大豆、羽扇豆的氨基酸序列的同源性分别达到73%、73%、73%、72%和71%。亚细胞定位结果表明,McGAL定位在线粒体膜上。荧光定量结果表明,McGAL在果实绿熟期表达量最高并随之下降,该基因可能与果实成熟软化初期相关。 展开更多

关键词 苦瓜 Β-半乳糖苷酶 亚细胞定位 实时荧光定量PCR

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琯溪蜜柚汁胞RNA提取方法的比较 被引量：8

12

作者 钟凤林 郭志雄 +1 位作者 马传营 潘东明 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期109-112,共4页

比较了3种从琯溪蜜柚汁胞中提取RNA的方法,通过琼脂糖凝胶电泳及紫外分光光度计检测,对提取所得RNA的完整性、纯度及浓度进行分析。试验结果表明,Trizol法适合琯溪蜜柚汁胞RNA的提取,能有效获得纯度高、完整性好的RNA样品,而且Trizol法... 比较了3种从琯溪蜜柚汁胞中提取RNA的方法,通过琼脂糖凝胶电泳及紫外分光光度计检测,对提取所得RNA的完整性、纯度及浓度进行分析。试验结果表明,Trizol法适合琯溪蜜柚汁胞RNA的提取,能有效获得纯度高、完整性好的RNA样品,而且Trizol法步骤简单,RNA得率与质量均较高。通过RT-PCR检验表明该RNA适于后续分子生物学操作。 展开更多

关键词 琯溪蜜柚 汁胞 RNA TRIZOL法

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茉莉花JsPAL2基因的克隆与表达分析 被引量：11

13

作者 熊青 宋姣敏 +4 位作者 崔萌 许颖妍 俞滢 叶乃兴 陈桂信 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2018年第7期1359-1366,共8页

为了研究茉莉花花香代谢相关分子机制,本研究基于茉莉花转录组测序结果,采用PCR技术从双瓣茉莉花花瓣的c DNA文库中克隆出苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia lyase,PAL)的全长c DNA,命名为Js PAL2。该c DNA的全长为2 181 bp,其中ORF... 为了研究茉莉花花香代谢相关分子机制,本研究基于茉莉花转录组测序结果,采用PCR技术从双瓣茉莉花花瓣的c DNA文库中克隆出苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia lyase,PAL)的全长c DNA,命名为Js PAL2。该c DNA的全长为2 181 bp,其中ORF为2 079 bp,编码693个氨基酸的蛋白,分子量为75 599.19 u。序列分析结果表明,该基因编码的氨基酸序列与油橄榄(Olea europaea)的PAL具有82%的同源性。利用100μmol/L的外源激素茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,Me JA)喷施成熟花苞,并采用荧光定量PCR技术检测Js PAL2在茉莉花发育过程、开放过程以及经Me JA处理过后花朵中的表达量变化。结果表明,在花蕾生长发育时期,Js PAL2的表达量随着天数的增加而升高,在5 d时达到最高;在不同开放时期,18:00花朵未开放时Js PAL2表达量最低,22:00花朵半开放时表达量最高;经外源茉莉酸甲酯处理后,Js PAL2的表达量明显增加,在处理后7 h达到最高,随后逐渐降低,推测该基因可能与茉莉花香气物质的合成有关,同时Me JA可能对其表达有诱导的作用。 展开更多

关键词 茉莉花 PAL基因 生物信息学 茉莉酸甲酯 荧光定量PCR

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6种不同产地枳壳中化学成分含量的比较 被引量：13

14

作者 朱祥枝 潘东明 《福建农业学报》 CAS 2005年第1期58-60,共3页

采用反相高效液相色谱法,测定了6种不同产地枳壳中的黄酮类化合物柚皮苷、橙皮苷和生物碱辛弗林 的含量,比较这3种成分的相对比例。结果表明,由于产地不同,3种成分含量变化范围很大,柚皮苷含量介于12.05 ～59.80 mg·g-1、橙皮苷含... 采用反相高效液相色谱法,测定了6种不同产地枳壳中的黄酮类化合物柚皮苷、橙皮苷和生物碱辛弗林 的含量,比较这3种成分的相对比例。结果表明,由于产地不同,3种成分含量变化范围很大,柚皮苷含量介于12.05 ～59.80 mg·g-1、橙皮苷含量介于0.29～11.63 mg·g-1、辛弗林含量介于0.21～37.22 mg·g-1。 展开更多

关键词 枳壳 不同产地 化学成分

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琯溪蜜柚汁胞APX1 cDNA的克隆及原核表达 被引量：2

15

作者 钟凤林 郭志雄 +1 位作者 潘东明 李开拓 《热带作物学报》 CSCD 2010年第1期77-82,共6页

为了解琯溪蜜柚(Citrus grandis‘Guanximiyou’)汁胞在发育过程中,APX与汁胞活性氧自由基清除和汁胞粒化的关系,以琯溪蜜柚果肉为材料,运用cDNA克隆的方法,克隆得到琯溪蜜柚果肉APX1cDNA全长,并进行了原核表达。结果表明:获得了全长为1... 为了解琯溪蜜柚(Citrus grandis‘Guanximiyou’)汁胞在发育过程中,APX与汁胞活性氧自由基清除和汁胞粒化的关系,以琯溪蜜柚果肉为材料,运用cDNA克隆的方法,克隆得到琯溪蜜柚果肉APX1cDNA全长,并进行了原核表达。结果表明:获得了全长为1118bp的琯溪蜜柚汁胞APX1cDNA全序列,包含753bp的开放阅读框,编码250个通读的氨基酸序列。具有过氧化物酶活性位点信号和亚铁血红素结合基信号。目前APX1cDNA序列已在GenBank上注册,登录号为gb|FJ595794.1。通过构建重组质粒p32-APX1,转化至TransRosetta(DE3)中,在大肠杆菌宿主中获得了表达,从而为下一步制备该酶抗体及研究琯溪蜜柚汁胞粒化过程中APX1的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 琯溪蜜柚 APX1 CDNA 序列分析 原核表达

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中国水仙几丁质酶基因的克隆与表达分析 被引量：4

16

作者 林晓红 潘鹤立 潘东明 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2014年第12期173-178,共6页

【目的】克隆中国水仙几丁质酶基因,分析其在水仙不同组织中的表达,为提高中国水仙的抗病性提供参考。【方法】利用RT-PCR技术克隆得到中国水仙几丁质酶基因,对其序列及编码氨基酸序列进行生物信息学分析,通过qRT-PCR分析该基因在感染... 【目的】克隆中国水仙几丁质酶基因,分析其在水仙不同组织中的表达,为提高中国水仙的抗病性提供参考。【方法】利用RT-PCR技术克隆得到中国水仙几丁质酶基因,对其序列及编码氨基酸序列进行生物信息学分析,通过qRT-PCR分析该基因在感染基腐病、病毒病及褐斑病中国水仙根、叶中的表达。【结果】中国水仙几丁质酶基因的cDNA序列长768bp,编码230个氨基酸,其编码蛋白的分子质量为25.4ku,理论等电点为9.04,为不稳定蛋白,亲水性强,二级结构以α螺旋和无规则卷曲为主。该基因编码的蛋白与荷兰芹几丁质酶蛋白的亲缘关系最近,隶属于糖苷水解酶19家族,与溶菌酶相似超家族基因的保守结构域类似,推测其可能是兼具几丁质酶和溶菌酶的双功能酶。qRT-PCR分析表明,在水仙基腐病、病毒病及褐斑病发病过程中,水仙几丁质酶基因的表达量均显著提高。【结论】成功克隆得到中国水仙几丁质酶基因,推测该基因可能参与了水仙的抗病过程。 展开更多

关键词 中国水仙 几丁质酶基因 序列分析 抗病性

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玳玳花瓣脂氢过氧化物裂解酶基因cDNA的克隆及原核表达 被引量：1

17

作者 郭凤芝 许颖妍 +4 位作者 熊青 刘涛 吕恃衡 陈桂信 佘文琴 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期673-681,共9页

以玳玳花瓣为材料,采用RT-PCR和RACE技术,克隆了玳玳HPL基因cDNA全长,全长为1 776 bp,其中包含52 bp的5′非编码区,224 bp的3′非编码区,1 500 bp的编码区(编码499个氨基酸,分子量为55.7 ku)。将该HPL基因cDNA编码区的核苷酸序列及所推... 以玳玳花瓣为材料,采用RT-PCR和RACE技术,克隆了玳玳HPL基因cDNA全长,全长为1 776 bp,其中包含52 bp的5′非编码区,224 bp的3′非编码区,1 500 bp的编码区(编码499个氨基酸,分子量为55.7 ku)。将该HPL基因cDNA编码区的核苷酸序列及所推导的氨基酸序列与其他植物的HPL基因cDNA序列进行比较,推断玳玳花瓣HPL属于13-HPL类。通过PCR扩增得到了玳玳HPL基因组全长。测序结果显示玳玳HPL基因中包含1个长2 374 bp的内含子。将分离出来的玳玳HPL基因cDNA的编码区序列插入pET-15b载体上构建原核表达载体,在细菌BL21细胞中进行原核表达。结果表明:该编码区片段可在原核细胞中大量表达,其表达产物分子量大小约为55 ku,与13-HPL蛋白的分子量55.7 ku相符。本研究为下一步利用HPL基因cDNA进行遗传转化研究奠定基础,将为花卉香味的遗传改良提供一条新途径。 展开更多

关键词 玳玳(Citrus aurantium) 脂氢过氧化物裂解酶 CDNA全长 原核表达

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苦瓜果实S-腺苷蛋氨酸脱羧酶基因McSAMDC的克隆、表达及亚细胞定位 被引量：1

18

作者 高山 陈桂信 +3 位作者 许端祥 钟开勤 林义章 潘东明 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2013年第5期838-844,共7页

根据已构建苦瓜果实均一化文库中获得的1个与SAMDC基因相关的EST序列,采用3′RACE技术,克隆获得1个苦瓜SAMDC基因的cDNA全长序列,命名为McSAMDC(GenBank登录号为KC632099)。生物信息分析结果表明,该cDNA全长1 900 bp,5′UTR和3′UTR分别... 根据已构建苦瓜果实均一化文库中获得的1个与SAMDC基因相关的EST序列,采用3′RACE技术,克隆获得1个苦瓜SAMDC基因的cDNA全长序列,命名为McSAMDC(GenBank登录号为KC632099)。生物信息分析结果表明,该cDNA全长1 900 bp,5′UTR和3′UTR分别长501、325 bp。该cDNA序列存在3个开放读码框(微型tORF、上游读码框uORF和主读码框mORF),其中mORF长1 077 bp,编码358个氨基酸,预测分子量为39.31 ku,含有酶原剪切位点结构域和蛋白快速降解有关的PEST二个保守结构域。二级结构分析显示,McSAMDC含有无规卷曲(45.53%)、α-螺旋(29.33%)、伸展链(19.83%)、β-转角(5.31%)。序列分析结果表明,McSAMDC与拟南芥(CAA69073.1)、琴叶拟南芥(XP 002882231.1)和雪里红(AAS45435.1)的氨基酸序列相似性分别达到69%、68%和68%。亚细胞定位结果表明,McSAMDC定位在细胞质中。荧光定量结果表明,McSAMDC在果实膨大期表达量最高,并随之迅速下降,并从成熟初期至完全成熟期该基因表达量逐渐增大。 展开更多

关键词 苦瓜 S-腺苷蛋氨酸脱羧酶基因 亚细胞定位 实时荧光定量PCR

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中国水仙自然变异体的IRAP分析 被引量：2

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作者 林晓红 潘东明 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2013年第3期242-245,共4页

以漳州水仙花主产区主栽品种"金盏"和"玉玲珑"为参照,利用IRAP标记技术对花变异体"金三角"及叶色变异体"金边水仙"进行变异分析.4对IRAP引物共获得177个位点,有123个多态性位点,4份中国水仙种... 以漳州水仙花主产区主栽品种"金盏"和"玉玲珑"为参照,利用IRAP标记技术对花变异体"金三角"及叶色变异体"金边水仙"进行变异分析.4对IRAP引物共获得177个位点,有123个多态性位点,4份中国水仙种质资源间的相似系数介于0.946-0.657之间.研究结果表明,变异体"金三角"和"金边水仙"与主栽品种"金盏"和"玉玲珑"的区别明显,转座插入和逆转座子间重组可能是引起中国水仙变异的重要机制之一. 展开更多

关键词 中国水仙 变异体 IRAP分子标记

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琯溪蜜柚汁胞Beta-tubulin cDNA的克隆及序列分析

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作者 钟凤林 郭志雄 +2 位作者 林琳 马传营 潘东明 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2010年第3期241-245,共5页

以琯溪蜜柚汁胞为材料,采用cDNA克隆方法进行Beta-tubulin cDNA的克隆和表达.结果表明:琯溪蜜柚果肉Beta-tubulin cDNA全长1636 bp,有完整的阅读框,编码444个氨基酸;5′非翻译区60 bp,3′非翻译区243 bp(不包含终止密码子TAA),其中包括... 以琯溪蜜柚汁胞为材料,采用cDNA克隆方法进行Beta-tubulin cDNA的克隆和表达.结果表明:琯溪蜜柚果肉Beta-tubulin cDNA全长1636 bp,有完整的阅读框,编码444个氨基酸;5′非翻译区60 bp,3′非翻译区243 bp(不包含终止密码子TAA),其中包括1个多聚腺苷酸化信号AATAAA以及1个含21个腺苷酸的poly(A)尾.由琯溪蜜柚果肉Beta-tubulin cDNA推导的氨基酸序列与陆地棉(Gossypium hirsutum)、大豆(Glycine max)、杨属植物(Populus)等的同源性较高,分别为86%、85%、84%等.通过构建重组质粒p28-PTU,并转化至Trans Rosetta(DE3)中,在诱导温度为37℃、IPTG浓度为1 mm、诱导时间为4 h的条件下,其在大肠杆菌宿主中获得了表达. 展开更多

关键词 琯溪蜜柚 BETA-TUBULIN CDNA 序列分析 同源性分析

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