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神经介素B和受体对H9N2亚型流感病毒感染诱导的ITCH表达的影响
1
作者
田世茂
田珂
+5 位作者
刘玉钤
辜晴新
沈昀知
张骋怀
包银莉
杨桂红
《畜牧兽医学报》
北大核心
2025年第4期1834-1842,共9页
甲型流感病毒(IAV)编码的基质蛋白1(M1)通过调控E3泛素连接酶ITCH介导的泛素化修饰反应拮抗宿主的抗病毒免疫反应。本课题前期研究表明,神经介素B(NMB)和其受体NMBR具有抑制IAV的先天性免疫应答反应的作用,但二者对IAV感染诱导的E3泛素...
甲型流感病毒(IAV)编码的基质蛋白1(M1)通过调控E3泛素连接酶ITCH介导的泛素化修饰反应拮抗宿主的抗病毒免疫反应。本课题前期研究表明,神经介素B(NMB)和其受体NMBR具有抑制IAV的先天性免疫应答反应的作用,但二者对IAV感染诱导的E3泛素连接酶ITCH和M1表达的影响如何,尚未见报道。因此,本文采用外源性NMB及H9N2亚型禽流感病毒刺激模型,适时干扰和过表达NMBR,分别从体内外水平分析NMB和NMBR对ITCH和M1蛋白的表达水平的影响。结果显示:添加外源性NMB和过表达NMBR均可显著抑制H9N2亚型禽流感病毒感染的A549细胞和小鼠肺组织中ITCH表达;与之相对,干扰NMBR表达则可显著促进A549细胞和小鼠肺组织中ITCH表达;此外,NMB和NMBR对H9N2亚型禽流感病毒感染诱导的ITCH的表达趋势与M1蛋白的表达呈现正相关。以上结果表明,NMB和NMBR可通过调节ITCH的表达而影响H9N2编码的M1蛋白的表达,从而发挥抗H9N2亚型禽流感病毒感染的先天性免疫反应。
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关键词
神经介素B
神经介素B受体NMBR
H9N2流感病毒
E3泛素连接酶ITCH
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职称材料
一株猪CD56单克隆抗体的制备及抗原表位的初步鉴定
2
作者
辛航阔
谢青青
+4 位作者
刘坤
林圣宇
陈炜
郑小惠
朱婷
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第6期2662-2671,共10页
CD56作为NK细胞的重要表面分子,在NK细胞的发育、亚群分型和功能发挥等方面发挥重要的作用。因此,为了便于筛选不同亚群的猪NK细胞并探究其生物学功能,本研究制备了猪CD56单克隆抗体并对其抗原表位进行了初步鉴定。首先,通过生物信息软...
CD56作为NK细胞的重要表面分子,在NK细胞的发育、亚群分型和功能发挥等方面发挥重要的作用。因此,为了便于筛选不同亚群的猪NK细胞并探究其生物学功能,本研究制备了猪CD56单克隆抗体并对其抗原表位进行了初步鉴定。首先,通过生物信息软件预测并选取猪CD56蛋白胞外区的优势抗原表位的氨基酸序列(50-499aa),利用原核表达系统表达猪CD56胞外区的优势抗原表位蛋白并进行纯化和复性,之后,将猪CD56重组蛋白免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合、亚克隆等试验,获得一株稳定分泌猪CD56单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为1G8。Western blot结果显示,制备的猪CD56单抗可以与猪脑和脾总蛋白发生特异性结合;为了进一步验证CD56单抗的特异性,作者分离了猪外周血NK细胞,以制备的猪CD56单抗作为一抗进行间接免疫荧光试验,结果显示,制备的单抗能够与NK细胞膜特异性结合。最后,为了进一步探究单抗识别的抗原表位,作者将选取的猪CD56基因进一步截短为四个截短体(50-192 aa、193-294 aa、295-397 aa、398-499 aa)并构建真核表达重组质粒,然后转染至293T细胞进行真核表达,Western blot和间接免疫荧光结果显示,制备的CD56单抗识别的抗原表位为猪CD56蛋白的193-294 aa。综上,本研究成功制备了猪CD56单克隆抗体,并对其特异性及抗原表位进行了初步鉴定,对猪NK细胞亚群的筛选及探究猪NK细胞的生物学功能具有重要意义。
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关键词
猪
NK细胞
CD56
单克隆抗体
抗原表位
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职称材料
题名
神经介素B和受体对H9N2亚型流感病毒感染诱导的ITCH表达的影响
1
作者
田世茂
田珂
刘玉钤
辜晴新
沈昀知
张骋怀
包银莉
杨桂红
机构
福建农林大学
动物
科学
学院
闽台
动物
病原
生物学
重点
实验室
出处
《畜牧兽医学报》
北大核心
2025年第4期1834-1842,共9页
基金
国家自然科学基金重点项目(U23A20235)
国家自然科学基金项目(32030110)
+2 种基金
福建农林大学科技创新项目(KFB23100,KFB23094)
福建农林大学大学生创业实践项目(202410389447)
动物源性人兽共患病防控福建省高校工程研究中心开放基金课题项目(2023K05)。
文摘
甲型流感病毒(IAV)编码的基质蛋白1(M1)通过调控E3泛素连接酶ITCH介导的泛素化修饰反应拮抗宿主的抗病毒免疫反应。本课题前期研究表明,神经介素B(NMB)和其受体NMBR具有抑制IAV的先天性免疫应答反应的作用,但二者对IAV感染诱导的E3泛素连接酶ITCH和M1表达的影响如何,尚未见报道。因此,本文采用外源性NMB及H9N2亚型禽流感病毒刺激模型,适时干扰和过表达NMBR,分别从体内外水平分析NMB和NMBR对ITCH和M1蛋白的表达水平的影响。结果显示:添加外源性NMB和过表达NMBR均可显著抑制H9N2亚型禽流感病毒感染的A549细胞和小鼠肺组织中ITCH表达;与之相对,干扰NMBR表达则可显著促进A549细胞和小鼠肺组织中ITCH表达;此外,NMB和NMBR对H9N2亚型禽流感病毒感染诱导的ITCH的表达趋势与M1蛋白的表达呈现正相关。以上结果表明,NMB和NMBR可通过调节ITCH的表达而影响H9N2编码的M1蛋白的表达,从而发挥抗H9N2亚型禽流感病毒感染的先天性免疫反应。
关键词
神经介素B
神经介素B受体NMBR
H9N2流感病毒
E3泛素连接酶ITCH
Keywords
neuromedin B
neuromedin B receptor NMBR
H9N2 influenza virus
E3 ubiquitin ligase ITCH
分类号
R511.7 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
一株猪CD56单克隆抗体的制备及抗原表位的初步鉴定
2
作者
辛航阔
谢青青
刘坤
林圣宇
陈炜
郑小惠
朱婷
机构
福建农林大学动物科学学院闽台动物病原生物学实验室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第6期2662-2671,共10页
基金
福建农林大学科技专项创新基金项目(KFb22065XA)。
文摘
CD56作为NK细胞的重要表面分子,在NK细胞的发育、亚群分型和功能发挥等方面发挥重要的作用。因此,为了便于筛选不同亚群的猪NK细胞并探究其生物学功能,本研究制备了猪CD56单克隆抗体并对其抗原表位进行了初步鉴定。首先,通过生物信息软件预测并选取猪CD56蛋白胞外区的优势抗原表位的氨基酸序列(50-499aa),利用原核表达系统表达猪CD56胞外区的优势抗原表位蛋白并进行纯化和复性,之后,将猪CD56重组蛋白免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合、亚克隆等试验,获得一株稳定分泌猪CD56单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为1G8。Western blot结果显示,制备的猪CD56单抗可以与猪脑和脾总蛋白发生特异性结合;为了进一步验证CD56单抗的特异性,作者分离了猪外周血NK细胞,以制备的猪CD56单抗作为一抗进行间接免疫荧光试验,结果显示,制备的单抗能够与NK细胞膜特异性结合。最后,为了进一步探究单抗识别的抗原表位,作者将选取的猪CD56基因进一步截短为四个截短体(50-192 aa、193-294 aa、295-397 aa、398-499 aa)并构建真核表达重组质粒,然后转染至293T细胞进行真核表达,Western blot和间接免疫荧光结果显示,制备的CD56单抗识别的抗原表位为猪CD56蛋白的193-294 aa。综上,本研究成功制备了猪CD56单克隆抗体,并对其特异性及抗原表位进行了初步鉴定,对猪NK细胞亚群的筛选及探究猪NK细胞的生物学功能具有重要意义。
关键词
猪
NK细胞
CD56
单克隆抗体
抗原表位
Keywords
pig
NK cells
CD56
monoclonal antibody
epitope
分类号
S852.4 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
神经介素B和受体对H9N2亚型流感病毒感染诱导的ITCH表达的影响
田世茂
田珂
刘玉钤
辜晴新
沈昀知
张骋怀
包银莉
杨桂红
《畜牧兽医学报》
北大核心
2025
0
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职称材料
2
一株猪CD56单克隆抗体的制备及抗原表位的初步鉴定
辛航阔
谢青青
刘坤
林圣宇
陈炜
郑小惠
朱婷
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
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