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题名豇豆疫霉LAMP检测方法的建立
被引量：5
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作者
李本金
刘小丽
刘裴清
王荣波
翁启勇
陈庆河
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机构
福建省农业科学院植物保护研究所
福建农林大学、闽台作物有害生物生态防控国家重点实验室
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出处
《植物保护》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第4期119-124,共6页
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基金
福建省属公益类科研院所基本科研专项(2015R1024-2、2016R1023-1)
生物农药与化学生物学教育部重点实验室开放基金(Keylab2016-01)
福建省农业科学院植物保护科技创新团队(STIT2017-1-8)
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文摘
本研究以豇豆疫霉Phytophthora vignae Purss核糖体内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)序列为靶标片段,设计4条特异性引物,建立了环介导等温扩增(LAMP)检测方法。特异性检测结果表明:8株不同地理来源的豇豆疫霉菌株LAMP检测均为阳性(绿色),扩增产物用2.0%琼脂糖凝胶电泳出现特有的梯形条带,而其他11种卵菌近缘种及12种常见病原真菌和细菌共42个菌株均未观察到这些现象。灵敏度分析显示:该方法检测灵敏度在DNA水平上可达到100fg/25μL。采用LAMP方法对福建建瓯和宁德采集的62份疑似豇豆疫病病株样本进行检测,并用组织分离方法进行验证。结果表明,LAMP和组织分离方法的检出率分别为67.7%(42/62)和61.3%(38/62)。综合以上结果,LAMP方法具有特异性强、灵敏度高、快速高效、操作简单的特点,适合基层部门用于田间豇豆疫霉快速检测。
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关键词
豇豆疫霉
内转录间隔区(ITS)
环介导等温扩增技术(LAMP)
分子检测
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Keywords
Phytophthora vignae
ITS
loop-mediated isothermal amplification （LAMP）
molecular detection
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分类号
S436.43
[农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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