文摘目的 本研究拟通过体外实验研究槲皮素(Quercetin,QCT)与AC16心肌细胞增殖的关系,探析QCT阻止AC16心肌细胞增殖作用与Wnt/β-catenin信号通路的关系。方法 选用不同浓度QCT对AC16细胞进行干预,使用倒置显微镜拍照观察法、台盼蓝计数法和CCK-8法检测QCT对AC16细胞增殖的影响。Western blot检测QCT对磷酸化-β-连环蛋白(Phosphorylated β-catenin,p-β-catenin)、细胞性骨髓瘤样癌基因(c-Myc)、β-连环蛋白(β-catenin)、低密度脂蛋白受体相关蛋白5(Low density lipoprotein receptor-related protein 5,LRP5)和低密度脂蛋白受体相关蛋白6(Low density lipoprotein receptor-related protein 6,LRP6)表达的影响。台盼蓝计数法检测过表达β-catenin ΔN、LRP5和LRP6基因后研究QCT对细胞增殖的影响以及沉默LRP5和LRP6基因后研究QCT对细胞增殖的影响。结果 与对照组比,QCT使得AC16细胞活细胞数下降,抑制增殖率,且具有浓度依赖性。条件摸索显示10和20μmol/L的QCT会导致AC16细胞中p-β-catenin蛋白修饰水平显著增加(P<0.05),c-Myc、β-catenin、LRP5和LRP6蛋白表达水平显著下调(P<0.05),因此后续实验选择10μmol/L的QCT作为干预浓度。而AC16细胞中过表达β-catenin ΔN、LRP5和LRP6基因,与单独给药组相比,过表达相关基因后10μmol/L的QCT引起的细胞增殖抑制现象被有效逆转(P<0.05)。另外,沉默LRP5和LRP6再联合10μmol/L的QCT干预,AC16细胞的增殖抑制并未产生协同现象(P>0.05)。结论 QCT可以通过下调LRP5/6表达以抑制Wnt/β-catenin信号通路从而发挥其阻止AC16心肌细胞增殖的作用。
