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人外周血中NF-κB p65定量检测方法的建立及临床应用
被引量:
9
1
作者
林青
郑健
+3 位作者
陈宇新
艾斯
王芳
林礼兴
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第7期728-730,共3页
目的建立一种能定量测定人外周血中核转录因子-κB(nuclear transcription factor-kappa B,NF-κB)p65活化量的检测方法。方法采用密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,从细胞核成分中提取核蛋白,应用Bradford法进行核蛋白定量,以识别...
目的建立一种能定量测定人外周血中核转录因子-κB(nuclear transcription factor-kappa B,NF-κB)p65活化量的检测方法。方法采用密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,从细胞核成分中提取核蛋白,应用Bradford法进行核蛋白定量,以识别NF-κB p65不同抗原表位的2种抗NF-κB单克隆抗体为基础,建立可定量检测人外周血NF-κBp65活化量水平的双抗体夹心酶联免疫吸附实验法。应用已建立的NF-κB p65定量检测方法测定了68例微小病变型肾病综合征患者和20名健康人外周血中NF-κB p65活化量。结果本方法批内、批间变异系数分别为(9.78±3.99)%、(12.51±4.53)%,灵敏度为0.030mg/L,平均回收率为95.8%。与NF-κB突变型寡核苷酸不发生交叉反应。微小病变型肾病综合征患者治疗前外周血中NF-κB p65活化量较健康人显著增高(P<0.01),治疗后与治疗前NF-κB p65活化量差异有统计学意义(P<0.01),但与健康人NF-κB p65活化量差异无统计学意义(P>0.05)。结论本研究建立的人外周血中NF-κB p65活化量定量检测方法快速、特异且可靠,为临床监测NF-κB p65活化情况提供了条件。
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关键词
NF-κB
p65亚基
单个核细胞
酶联免疫吸附测定
微小病变型肾病综合征
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职称材料
慢性乙型肝炎患者外周血趋化因子CXCL10和CXCL11的表达及意义
被引量:
4
2
作者
祝先进
宋艳芳
+2 位作者
曹颖平
许伟群
张臣青
《临床肝胆病杂志》
CAS
2011年第8期804-806,共3页
目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血中趋化因子CXCL10和CXCL11的表达水平及与ALT和HBV DNA的关系。方法用ELISA方法定量检测CHB患者外周血中CXCL10和CXCL11含量;以实时定量PCR检测CHB患者HBV DNA含量。以全自动生化分析仪检测CHB患者...
目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血中趋化因子CXCL10和CXCL11的表达水平及与ALT和HBV DNA的关系。方法用ELISA方法定量检测CHB患者外周血中CXCL10和CXCL11含量;以实时定量PCR检测CHB患者HBV DNA含量。以全自动生化分析仪检测CHB患者血清中ALT含量。结果 CHB患者血清中CXCL10和CXCL11浓度分别为(123.38±88.37)pg/ml和(129.24±82.79)pg/ml,均高于正常对照组(P<0.05),且与ALT呈正相关(r值分别为0.739、0.597,P<0.05);但外周血中CX-CL10和CXCL11的含量与血清中HBV DNA含量无明显相关(r值分别为0.244、0.242,P>0.05)。结论 CHB患者外周血中CX-CL10和CXCL11介导了肝脏炎症细胞浸润和免疫损伤,参与了乙型肝炎慢性化病程。
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关键词
肝炎
乙型
慢性
趋化因子CXCL10
趋化因子CXCL11
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职称材料
SELDI-TOF-MS筛选微小病变型肾病综合征尿液生物标志物
被引量:
1
3
作者
林青
郑健
+1 位作者
陈蓉艳
艾斯
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第17期1842-1846,共5页
目的探讨应用优化的表面增强激光解析电离-飞行时间-质谱(surface enhanced laser desorption/ionizationtime of flight-mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)进行微小病变型肾病综合征(minimal-changed nephrotic syndrome,MCNS)大鼠尿液...
目的探讨应用优化的表面增强激光解析电离-飞行时间-质谱(surface enhanced laser desorption/ionizationtime of flight-mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)进行微小病变型肾病综合征(minimal-changed nephrotic syndrome,MCNS)大鼠尿液生物标志物筛选的意义。方法 SD大鼠30只随机分为正常对照组(n=10)、模型对照组(n=10)和强的松治疗组(n=10)。除正常对照组外,其余大鼠经尾静脉一次性注射阿霉素5.5mg/kg复制MCNS模型,造模10d后分别予以强的松和蒸馏水灌胃治疗。21d后收集大鼠尿液,经弱阳离子交换芯片CM10捕获蛋白质,应用SELDI-TOF-MS获取3组大鼠的尿液蛋白质指纹图谱,采用Biomarker wizard软件比对分析差异蛋白。结果优化实验条件后获得较理想的尿液蛋白质指纹图谱,质控峰强度的平均CV值为18.0%(7.50%~35.89%)。在模型对照组与正常对照组之间检测到不同质荷比处有33个具统计学意义的差异蛋白峰(P<0.05),其中21个蛋白表达上调,12个蛋白表达下调。在正常对照组、模型对照组与强的松治疗组之间有6个蛋白质表达存在差异(P<0.05),这些差异蛋白峰在模型对照组中高表达,而在强的松治疗组中蛋白表达下调,峰强度接近正常对照组。结论通过优化实验条件并实行质量控制,SELDI-TOF-MS可为MCNS大鼠尿液生物标志物的筛选提供一个可行的检测途径。所获得的差异性蛋白峰对MCNS的早期诊断、治疗监测和寻找药物治疗的靶目标具有重要的意义。
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关键词
表面增强激光解析电离-飞行时间-质谱
微小病变型肾病综合征
尿液
生物标志物
质控
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职称材料
题名
人外周血中NF-κB p65定量检测方法的建立及临床应用
被引量:
9
1
作者
林青
郑健
陈宇新
艾斯
王芳
林礼兴
机构
福建中医学院附属人民医院检验科
福建
中医学院
附属
人民医院
儿
科
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第7期728-730,共3页
基金
福建省自然科学基金(C0740002
C0440015)
福建中医学院课题(XB2006011)
文摘
目的建立一种能定量测定人外周血中核转录因子-κB(nuclear transcription factor-kappa B,NF-κB)p65活化量的检测方法。方法采用密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,从细胞核成分中提取核蛋白,应用Bradford法进行核蛋白定量,以识别NF-κB p65不同抗原表位的2种抗NF-κB单克隆抗体为基础,建立可定量检测人外周血NF-κBp65活化量水平的双抗体夹心酶联免疫吸附实验法。应用已建立的NF-κB p65定量检测方法测定了68例微小病变型肾病综合征患者和20名健康人外周血中NF-κB p65活化量。结果本方法批内、批间变异系数分别为(9.78±3.99)%、(12.51±4.53)%,灵敏度为0.030mg/L,平均回收率为95.8%。与NF-κB突变型寡核苷酸不发生交叉反应。微小病变型肾病综合征患者治疗前外周血中NF-κB p65活化量较健康人显著增高(P<0.01),治疗后与治疗前NF-κB p65活化量差异有统计学意义(P<0.01),但与健康人NF-κB p65活化量差异无统计学意义(P>0.05)。结论本研究建立的人外周血中NF-κB p65活化量定量检测方法快速、特异且可靠,为临床监测NF-κB p65活化情况提供了条件。
关键词
NF-κB
p65亚基
单个核细胞
酶联免疫吸附测定
微小病变型肾病综合征
分类号
R446.11 [医药卫生—诊断学]
R446.6 [医药卫生—诊断学]
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职称材料
题名
慢性乙型肝炎患者外周血趋化因子CXCL10和CXCL11的表达及意义
被引量:
4
2
作者
祝先进
宋艳芳
曹颖平
许伟群
张臣青
机构
福建
医
科
大学
附属
协和
医院
检验
科
福建中医学院附属人民医院检验科
福建
医
科
大学免疫学系
出处
《临床肝胆病杂志》
CAS
2011年第8期804-806,共3页
文摘
目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血中趋化因子CXCL10和CXCL11的表达水平及与ALT和HBV DNA的关系。方法用ELISA方法定量检测CHB患者外周血中CXCL10和CXCL11含量;以实时定量PCR检测CHB患者HBV DNA含量。以全自动生化分析仪检测CHB患者血清中ALT含量。结果 CHB患者血清中CXCL10和CXCL11浓度分别为(123.38±88.37)pg/ml和(129.24±82.79)pg/ml,均高于正常对照组(P<0.05),且与ALT呈正相关(r值分别为0.739、0.597,P<0.05);但外周血中CX-CL10和CXCL11的含量与血清中HBV DNA含量无明显相关(r值分别为0.244、0.242,P>0.05)。结论 CHB患者外周血中CX-CL10和CXCL11介导了肝脏炎症细胞浸润和免疫损伤,参与了乙型肝炎慢性化病程。
关键词
肝炎
乙型
慢性
趋化因子CXCL10
趋化因子CXCL11
Keywords
hepatitis B, chronic
chemokine CXCL10
chemokine CXCL11
分类号
R512.62 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
SELDI-TOF-MS筛选微小病变型肾病综合征尿液生物标志物
被引量:
1
3
作者
林青
郑健
陈蓉艳
艾斯
机构
福建中医学院附属人民医院检验科
福建
中医学院
附属
人民医院
儿
科
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第17期1842-1846,共5页
基金
福建省自然科学基金(2007J0307
2008J0093)~~
文摘
目的探讨应用优化的表面增强激光解析电离-飞行时间-质谱(surface enhanced laser desorption/ionizationtime of flight-mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)进行微小病变型肾病综合征(minimal-changed nephrotic syndrome,MCNS)大鼠尿液生物标志物筛选的意义。方法 SD大鼠30只随机分为正常对照组(n=10)、模型对照组(n=10)和强的松治疗组(n=10)。除正常对照组外,其余大鼠经尾静脉一次性注射阿霉素5.5mg/kg复制MCNS模型,造模10d后分别予以强的松和蒸馏水灌胃治疗。21d后收集大鼠尿液,经弱阳离子交换芯片CM10捕获蛋白质,应用SELDI-TOF-MS获取3组大鼠的尿液蛋白质指纹图谱,采用Biomarker wizard软件比对分析差异蛋白。结果优化实验条件后获得较理想的尿液蛋白质指纹图谱,质控峰强度的平均CV值为18.0%(7.50%~35.89%)。在模型对照组与正常对照组之间检测到不同质荷比处有33个具统计学意义的差异蛋白峰(P<0.05),其中21个蛋白表达上调,12个蛋白表达下调。在正常对照组、模型对照组与强的松治疗组之间有6个蛋白质表达存在差异(P<0.05),这些差异蛋白峰在模型对照组中高表达,而在强的松治疗组中蛋白表达下调,峰强度接近正常对照组。结论通过优化实验条件并实行质量控制,SELDI-TOF-MS可为MCNS大鼠尿液生物标志物的筛选提供一个可行的检测途径。所获得的差异性蛋白峰对MCNS的早期诊断、治疗监测和寻找药物治疗的靶目标具有重要的意义。
关键词
表面增强激光解析电离-飞行时间-质谱
微小病变型肾病综合征
尿液
生物标志物
质控
Keywords
surface enhanced laser desorption/ionization time of flight-mass spectrometry
minimally-changed nephrotic syndrome
urine
biomarker
quality control
分类号
R446 [医药卫生—诊断学]
R446.12 [医药卫生—诊断学]
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职称材料
题名
作者
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发文年
被引量
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1
人外周血中NF-κB p65定量检测方法的建立及临床应用
林青
郑健
陈宇新
艾斯
王芳
林礼兴
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
9
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职称材料
2
慢性乙型肝炎患者外周血趋化因子CXCL10和CXCL11的表达及意义
祝先进
宋艳芳
曹颖平
许伟群
张臣青
《临床肝胆病杂志》
CAS
2011
4
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职称材料
3
SELDI-TOF-MS筛选微小病变型肾病综合征尿液生物标志物
林青
郑健
陈蓉艳
艾斯
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
1
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