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下丘脑弓状核Kisspeptin神经元对骨代谢的调控作用
1
作者
许协宇
袁峰
+5 位作者
李连涛
王能颖
宗丽瑶
路荣梅
温俊平
梁继兴
《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》
北大核心
2025年第2期176-184,共9页
目的采用化学遗传学技术选择性激活雌鼠下丘脑弓状核(arcuate nucleus,ARC)Kisspeptin神经元以研究其在骨代谢方面的作用。方法采用双侧卵巢切除(ovariectomy,OVX)构建绝经后骨质疏松小鼠模型,将8~10周龄杂合型Kiss1-CreGFP雌鼠,按手术...
目的采用化学遗传学技术选择性激活雌鼠下丘脑弓状核(arcuate nucleus,ARC)Kisspeptin神经元以研究其在骨代谢方面的作用。方法采用双侧卵巢切除(ovariectomy,OVX)构建绝经后骨质疏松小鼠模型,将8~10周龄杂合型Kiss1-CreGFP雌鼠,按手术类型(OVX/SHAM)、病毒类型[人毒蕈碱型乙酰胆碱受体M3亚型(Gq蛋白偶联型)(human muscarinic acetylcholine receptor M3 subtype(Gq-coupled)),hM3D(Gq)/空载]、药物类型[氯氮平-N-氧化物(clozapine-N-oxide,CNO)/生理盐水(normal saline,NS)]三因素随机分为6组:Cre-OVX-hM3-CNO组、Cre-OVX-hM3-NS组、Cre-SHAM-hM3-CNO组、Cre-SHAM-hM3-NS组、Cre-OVX-空载-CNO组、Cre-OVX-空载-NS组,另设2组野生型对照:Control-OVX、Control-SHAM。通过脑立体定位技术对小鼠双侧下丘脑注射腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)-EF1α-DIO-hM3D(Gq)-mCherry,使小鼠表达hM3D(Gq),在饮用水中加入CNO,通过CNO和hM3D(Gq)受体的结合以激活Kisspeptin神经元。造模完成后,取小鼠全脑,进行冰冻切片和免疫荧光,以评估病毒的感染和表达情况;对小鼠股骨使用micro-CT扫描并进行三维图像重建和数据分析,同时进行骨组织切片和苏木素伊红(hematoxylin-eosin,HE)病理染色,以评估下丘脑ARC部位Kisspeptin神经元的激活对雌鼠骨量和骨髓腔脂肪细胞的影响。结果与Control-SHAM组小鼠相比,Control-OVX组雌鼠骨量减少,骨体积分数(bone volume/total volume,BV/TV)降低(P<0.01)、骨小梁数量(trabecular number,Tb.N)减少(P<0.001),骨小梁分离度(trabecular separation,Tb.Sp)升高(P<0.01);股骨远端骨小梁和骨髓细胞分布稀疏,骨髓腔中脂肪细胞数量增多。在Kiss1-CreGFP小鼠双侧下丘脑注射AAV-EF1α-DIO-hM3D(Gq)-mCherry,3周后病毒成功感染并表达相应受体。Cre-OVX-hM3-CNO组骨量减少,骨髓腔中脂肪细胞增多,BV/TV降低(P<0.01)、Tb.N减少(P<0.01),Tb.Sp升高(P<0.05)。结论雌鼠下丘脑ARC部位的Kisspeptin神经元对骨骼稳态起负性调控作用。
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关键词
化学遗传学
Kisspeptin神经元
女性
骨质疏松症
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职称材料
题名
下丘脑弓状核Kisspeptin神经元对骨代谢的调控作用
1
作者
许协宇
袁峰
李连涛
王能颖
宗丽瑶
路荣梅
温俊平
梁继兴
机构
福建医
科
大学
省立
临床医学院
福州大学附属省立医院内分泌科
出处
《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》
北大核心
2025年第2期176-184,共9页
基金
福建省自然科学基金(2020J011081,2021J01381)。
文摘
目的采用化学遗传学技术选择性激活雌鼠下丘脑弓状核(arcuate nucleus,ARC)Kisspeptin神经元以研究其在骨代谢方面的作用。方法采用双侧卵巢切除(ovariectomy,OVX)构建绝经后骨质疏松小鼠模型,将8~10周龄杂合型Kiss1-CreGFP雌鼠,按手术类型(OVX/SHAM)、病毒类型[人毒蕈碱型乙酰胆碱受体M3亚型(Gq蛋白偶联型)(human muscarinic acetylcholine receptor M3 subtype(Gq-coupled)),hM3D(Gq)/空载]、药物类型[氯氮平-N-氧化物(clozapine-N-oxide,CNO)/生理盐水(normal saline,NS)]三因素随机分为6组:Cre-OVX-hM3-CNO组、Cre-OVX-hM3-NS组、Cre-SHAM-hM3-CNO组、Cre-SHAM-hM3-NS组、Cre-OVX-空载-CNO组、Cre-OVX-空载-NS组,另设2组野生型对照:Control-OVX、Control-SHAM。通过脑立体定位技术对小鼠双侧下丘脑注射腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)-EF1α-DIO-hM3D(Gq)-mCherry,使小鼠表达hM3D(Gq),在饮用水中加入CNO,通过CNO和hM3D(Gq)受体的结合以激活Kisspeptin神经元。造模完成后,取小鼠全脑,进行冰冻切片和免疫荧光,以评估病毒的感染和表达情况;对小鼠股骨使用micro-CT扫描并进行三维图像重建和数据分析,同时进行骨组织切片和苏木素伊红(hematoxylin-eosin,HE)病理染色,以评估下丘脑ARC部位Kisspeptin神经元的激活对雌鼠骨量和骨髓腔脂肪细胞的影响。结果与Control-SHAM组小鼠相比,Control-OVX组雌鼠骨量减少,骨体积分数(bone volume/total volume,BV/TV)降低(P<0.01)、骨小梁数量(trabecular number,Tb.N)减少(P<0.001),骨小梁分离度(trabecular separation,Tb.Sp)升高(P<0.01);股骨远端骨小梁和骨髓细胞分布稀疏,骨髓腔中脂肪细胞数量增多。在Kiss1-CreGFP小鼠双侧下丘脑注射AAV-EF1α-DIO-hM3D(Gq)-mCherry,3周后病毒成功感染并表达相应受体。Cre-OVX-hM3-CNO组骨量减少,骨髓腔中脂肪细胞增多,BV/TV降低(P<0.01)、Tb.N减少(P<0.01),Tb.Sp升高(P<0.05)。结论雌鼠下丘脑ARC部位的Kisspeptin神经元对骨骼稳态起负性调控作用。
关键词
化学遗传学
Kisspeptin神经元
女性
骨质疏松症
Keywords
chemical genetics
Kisspeptin neurons
female
osteoporosis
分类号
R681 [医药卫生—骨科学]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
下丘脑弓状核Kisspeptin神经元对骨代谢的调控作用
许协宇
袁峰
李连涛
王能颖
宗丽瑶
路荣梅
温俊平
梁继兴
《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》
北大核心
2025
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