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悬浮培养肿瘤细胞的生物钟同步化细胞模型建立及其在择时给药研究中的应用 被引量:2
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作者 秦文娟 潘梅萍 +3 位作者 苏泽杰 侯茹蓉 陆海杰 乐志操 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期138-143,共6页
生物钟与肿瘤的发生和治疗都密切相关,但目前体外培养的肿瘤细胞同步化方法欠佳,导致体外培养的肿瘤细胞很难表现出生物钟节律现象.针对上述问题,采用悬浮培养的方法,同时进行同步化处理,定时取样分析,在体外细胞培养体系中可获得良好... 生物钟与肿瘤的发生和治疗都密切相关,但目前体外培养的肿瘤细胞同步化方法欠佳,导致体外培养的肿瘤细胞很难表现出生物钟节律现象.针对上述问题,采用悬浮培养的方法,同时进行同步化处理,定时取样分析,在体外细胞培养体系中可获得良好的周期性生物钟节律.将该同步化培养方法用于不同的生物钟节律阶段给药,能引起肿瘤细胞的差异反应,即择时给药的效果.该研究提供了一种可以在体外细胞培养体系中广泛采用的生物钟同步化新方案,可用于探讨生物钟调控肿瘤细胞药物反应的机制. 展开更多
关键词 生物钟 肿瘤治疗 同步化 药物反应 细胞培养
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利用果蝇模型筛选可用于动物组织光电关联的绿色荧光蛋白变体
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作者 陈捷 石丹妮 +3 位作者 齐佳苗 孙玲 杨宇丰 王道彪 《电子显微学报》 北大核心 2025年第1期81-90,共10页
荧光蛋白能够将分子分布与超微结构联系起来,对于光电关联(CLEM)技术的应用至关重要。然而,常规的绿色荧光蛋白及其变体在活体组织的电子显微镜(EM)制样过程中,常因诸多不可控因素导致荧光信号显著减弱,这限制了它们作为光电关联分子探... 荧光蛋白能够将分子分布与超微结构联系起来,对于光电关联(CLEM)技术的应用至关重要。然而,常规的绿色荧光蛋白及其变体在活体组织的电子显微镜(EM)制样过程中,常因诸多不可控因素导致荧光信号显著减弱,这限制了它们作为光电关联分子探针的应用。本研究在果蝇大脑神经束膜胶质细胞中特异性表达多种GFP变体(mEmerald、hfYFP、mhYFP和CoGFPv0),以评估它们在活体组织光电关联中的应用潜力。通过提高表达量和靶向线粒体等策略,本研究最终筛选出适用于CLEM技术在果蝇神经系统研究中的CoGFPv0。本工作表明,CoGFPv0可作为一种具有良好应用前景的光电关联分子探针,特别适用于复杂的活体组织环境。 展开更多
关键词 光电关联技术 荧光蛋白 GFP变体 CoGFPv0 果蝇
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利用帕金森症的果蝇模型测试具有神经保护作用的化学活性分子(英文) 被引量:3
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作者 乐志操 黄爱玲 杨宇丰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期128-133,共6页
帕金森症的果蝇模型对解析疾病的分子细胞机制贡献极大.为探讨利用地中海黑腹果蝇的疾病模型来筛选新型治疗帕金森症药物的可能性,我们构建了基于DJ-1A和PINK1两个遗传致病因子的帕金森症果蝇模型,测试抗氧化和消炎活性分子米诺环素和辅... 帕金森症的果蝇模型对解析疾病的分子细胞机制贡献极大.为探讨利用地中海黑腹果蝇的疾病模型来筛选新型治疗帕金森症药物的可能性,我们构建了基于DJ-1A和PINK1两个遗传致病因子的帕金森症果蝇模型,测试抗氧化和消炎活性分子米诺环素和辅酶Q10对脑多巴胺浓度的影响.结果表明,米诺环素对DJ-1A果蝇模型有明显保护作用,能显著提高脑多巴胺的浓度,但是对PINK1果蝇模型没有保护作用;辅酶Q10对两种模型均有保护作用.因此,帕金森病的果蝇模型能够反映药物分子的特异性作用,为筛选新的帕金森病治疗药物提供了一条便捷的途径. 展开更多
关键词 帕金森症 地中海黑腹果蝇 药物筛选 多巴胺
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CLARITY组织透明化技术在蜜蜂肠道组织上的运用 被引量:1
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作者 张洋逸 黄伟峰 +3 位作者 何楠 李佳欢 陈文锋 黄少康 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期703-709,共7页
【目的】以西方蜜蜂Apis mellifera工蜂肠道为例探究组织透明化技术--丙烯酰胺交联替换脂质透明硬化成像/免疫染色/原位杂交兼容组织水凝胶(clear lipid-exchanged acrylamide-hybridized rigid imaging/immunostaining/in situ hybridi... 【目的】以西方蜜蜂Apis mellifera工蜂肠道为例探究组织透明化技术--丙烯酰胺交联替换脂质透明硬化成像/免疫染色/原位杂交兼容组织水凝胶(clear lipid-exchanged acrylamide-hybridized rigid imaging/immunostaining/in situ hybridization-compatible tissue-hYdrogel, CLARITY)在昆虫组织上的应用,确定CLARITY与荧光原位杂交(FISH)相结合在昆虫肠道组织透明化中的适用性。【方法】依照CLARITY技术操作程序,用水凝胶固定西方蜜蜂肠道,并以被动方式透明化,再用靶向东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae 16S rRNA带异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate, FITC)标记和靶向真核细胞18S rRNA带Texas RED标记的寡核苷酸荧光探针进行肠道组织的荧光原位杂交,然后用DAPI(蓝色)进行细胞核复染,通过激光共聚焦显微镜观察透明化的染色组织。【结果】首次成功将西方蜜蜂肠道组织透明化。在激光共聚焦显微镜下,观察到马氏管的原始分布形态,以及东方蜜蜂微孢子虫在中肠末端分布更密集的空间分布特征,并实现了对肠道组织的3D重构。【结论】CLARITY能应用于蜜蜂肠道组织透明化,透明化组织能进行原位杂交和激光共聚焦观察。CLARITY和FISH相结合免除抗体制备和石蜡切片的麻烦,直观展示肠道内部的真实状态,为昆虫生理病理研究提供了一种可靠特异的标记方法。 展开更多
关键词 西方蜜蜂 东方蜜蜂微孢子虫 组织透明化技术 肠道 激光共聚焦显微镜 原位杂交
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