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水稻白叶枯病菌实时荧光定量PCR检测体系的建立及在防效评价中的应用
1
作者
邱曦锦
方绍兴
+7 位作者
杨宇
高顺玉
王振吉
阮文忠
段浩平
姚春
姬广海
杨俊
《江苏农业科学》
北大核心
2025年第10期145-152,共8页
水稻白叶枯病是引起水稻减产的主要病害之一,为了监测施用防治药剂后水稻叶片中白叶枯病病菌的含量,以评价防治效果,基于已完成基因组测序的水稻白叶枯病病菌(Xoo)糖基转移酶基因设计引物,构建实时荧光定量PCR(qPCR)技术,并对温室开展...
水稻白叶枯病是引起水稻减产的主要病害之一,为了监测施用防治药剂后水稻叶片中白叶枯病病菌的含量,以评价防治效果,基于已完成基因组测序的水稻白叶枯病病菌(Xoo)糖基转移酶基因设计引物,构建实时荧光定量PCR(qPCR)技术,并对温室开展的防治白叶枯病的药效试验开展评价。基于糖基转移酶基因设计特异性引物,以按梯度浓度(10^(-5)-10 ng/μL)稀释的Xoo DNA作为标准品进行扩增。结果表明,通过常规PCR扩增得到的目的基因条带大小为230 bp,Xoo DNA检测的灵敏度为1.43×10^(1) pg/μL;qPCR检测Xoo DNA的灵敏度为2.5 pg/μL。研究结果表明,qPCR的灵敏度比常规PCR高10倍左右,且标准曲线为y=-2.5793x+43.9460,r^(2)=0.9999。进一步利用qPCR技术对温室药效试验后的水稻叶片进行Xoo的定量分析,发现定量后叶片中的Xoo拷贝数与叶片病情指数成正相关,与温室防治效果结果一致。研究得出的qPCR技术的温室防效评价可为后续水稻白叶枯病的防治效果评价提供技术支持。
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关键词
水稻
白叶枯病
实时荧光定量PCR
定量检测
防效评价
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职称材料
题名
水稻白叶枯病菌实时荧光定量PCR检测体系的建立及在防效评价中的应用
1
作者
邱曦锦
方绍兴
杨宇
高顺玉
王振吉
阮文忠
段浩平
姚春
姬广海
杨俊
机构
楚雄师范学院资源环境与化学学院
云南
农业
大学植物保护学院
楚雄彝族自治州
农业
科学院
保山
市
农业
科学研究院
禄丰市中村乡农兴农业机械专业合作社
出处
《江苏农业科学》
北大核心
2025年第10期145-152,共8页
基金
云南省应用基础研究计划青年项目(编号:202201AU070194)
云南省基础研究计划地方高校联合专项-面上项目(编号:20221109144315)
+5 种基金
云南省基础研究计划基础研究专项面上项目(编号:202401AT070301)
云南农业大学国家重点实验室一般项目(编号:gzkf2022005)
乡村振兴科技专项-服务型科技特派员(编号:202304BK090504)
楚雄师范学院校级科研课题(编号:XSKY2303)
2024楚雄师范学院校级科研团队建设项目(编号:B05)
第九届全国大学生生命科学竞赛(科学探究类)(编号:910389)。
文摘
水稻白叶枯病是引起水稻减产的主要病害之一,为了监测施用防治药剂后水稻叶片中白叶枯病病菌的含量,以评价防治效果,基于已完成基因组测序的水稻白叶枯病病菌(Xoo)糖基转移酶基因设计引物,构建实时荧光定量PCR(qPCR)技术,并对温室开展的防治白叶枯病的药效试验开展评价。基于糖基转移酶基因设计特异性引物,以按梯度浓度(10^(-5)-10 ng/μL)稀释的Xoo DNA作为标准品进行扩增。结果表明,通过常规PCR扩增得到的目的基因条带大小为230 bp,Xoo DNA检测的灵敏度为1.43×10^(1) pg/μL;qPCR检测Xoo DNA的灵敏度为2.5 pg/μL。研究结果表明,qPCR的灵敏度比常规PCR高10倍左右,且标准曲线为y=-2.5793x+43.9460,r^(2)=0.9999。进一步利用qPCR技术对温室药效试验后的水稻叶片进行Xoo的定量分析,发现定量后叶片中的Xoo拷贝数与叶片病情指数成正相关,与温室防治效果结果一致。研究得出的qPCR技术的温室防效评价可为后续水稻白叶枯病的防治效果评价提供技术支持。
关键词
水稻
白叶枯病
实时荧光定量PCR
定量检测
防效评价
分类号
S435.111.47 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
水稻白叶枯病菌实时荧光定量PCR检测体系的建立及在防效评价中的应用
邱曦锦
方绍兴
杨宇
高顺玉
王振吉
阮文忠
段浩平
姚春
姬广海
杨俊
《江苏农业科学》
北大核心
2025
0
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