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SYAP1真核表达载体的构建及蛋白表达定位
被引量:
1
1
作者
郝慧鑫
菅辉玲
+2 位作者
朱美意
黄瑾
罗星
《郑州大学学报(医学版)》
CAS
北大核心
2014年第1期18-20,共3页
目的:构建pcDNA3.1(-)-Myc-突触相关蛋白1(SYAP1)真核表达载体。方法:合成SYAP1基因序列,加入Myc标签序列、EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点,并与线性化pcDNA3.1(-)连接,得重组质粒pcDNA3.1(-)-Myc-SYAP1。重组质粒经菌落PCR、酶切及测序鉴定正...
目的:构建pcDNA3.1(-)-Myc-突触相关蛋白1(SYAP1)真核表达载体。方法:合成SYAP1基因序列,加入Myc标签序列、EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点,并与线性化pcDNA3.1(-)连接,得重组质粒pcDNA3.1(-)-Myc-SYAP1。重组质粒经菌落PCR、酶切及测序鉴定正确后,脂质体转染HEK293细胞,采用Western blot和间接免疫荧光法检测转染细胞中SYAP1蛋白的表达及定位情况。结果:Myc-SYAP1成功插入pcDNA3.1(-)载体,SYAP1蛋白成功表达且定位于胞浆。结论:pcDNA3.1(-)-Myc-SYAP1载体构建成功。
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关键词
突触相关蛋白1
亚细胞定位
真核表达载体
synapse-associated
PROTEIN
1
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职称材料
题名
SYAP1真核表达载体的构建及蛋白表达定位
被引量:
1
1
作者
郝慧鑫
菅辉玲
朱美意
黄瑾
罗星
机构
石河子大学
医学院生物化学教研室
石河子大学第一附属医院急诊外科
出处
《郑州大学学报(医学版)》
CAS
北大核心
2014年第1期18-20,共3页
基金
国家自然科学基金项目31160182
兵团国际科技合作计划项目2011BC009
文摘
目的:构建pcDNA3.1(-)-Myc-突触相关蛋白1(SYAP1)真核表达载体。方法:合成SYAP1基因序列,加入Myc标签序列、EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点,并与线性化pcDNA3.1(-)连接,得重组质粒pcDNA3.1(-)-Myc-SYAP1。重组质粒经菌落PCR、酶切及测序鉴定正确后,脂质体转染HEK293细胞,采用Western blot和间接免疫荧光法检测转染细胞中SYAP1蛋白的表达及定位情况。结果:Myc-SYAP1成功插入pcDNA3.1(-)载体,SYAP1蛋白成功表达且定位于胞浆。结论:pcDNA3.1(-)-Myc-SYAP1载体构建成功。
关键词
突触相关蛋白1
亚细胞定位
真核表达载体
synapse-associated
PROTEIN
1
Keywords
subcellular location
eukaryotic expression vector
分类号
R651.3 [医药卫生—外科学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
SYAP1真核表达载体的构建及蛋白表达定位
郝慧鑫
菅辉玲
朱美意
黄瑾
罗星
《郑州大学学报(医学版)》
CAS
北大核心
2014
1
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