小西葫芦黄花叶病毒石河子分离物的分子变异 被引量：3

1

作者 王志江 杨海燕 +1 位作者 向本春 郑银英 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2015年第6期677-682,共6页

为了研究小西葫芦黄花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus,ZYMV)石河子分离物的分子变异情况,本研究采用ELISA及一步法RT-PCR对2010-2014年采自石河子地区的30个葫芦科植物样品进行ZYMV检测,从阳性样品中通过一步法RT-PCR克隆其ZYMV... 为了研究小西葫芦黄花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus,ZYMV)石河子分离物的分子变异情况,本研究采用ELISA及一步法RT-PCR对2010-2014年采自石河子地区的30个葫芦科植物样品进行ZYMV检测,从阳性样品中通过一步法RT-PCR克隆其ZYMV分离物的CP基因,经PCR-SSCP分析,将带型一致的ZYMV分离物进行归类,每种类型中选取1个代表性的分离物进行CP基因测序,分析其核苷酸及推导的氨基酸序列的差异。结果显示:2种检测方法的检出率分别为63.33%和83.33%;根据ZYMV CP基因SSCP带型,将21个分离物分为5种不同的类型;其5个代表性分离物的CP核苷酸序列相似性为93.0%-99.8%,在系统进化树中位于2个不同的亚组;氨基酸序列的相似性为96.1%-99.6%,变异主要集中在N端的前41个氨基酸。这表明ZYMV石河子分离物间存在一定程度的分子变异。 展开更多

关键词 小西葫芦黄花叶病毒 DAS—ELISA PCR—SSCP 分子变异

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应用RNAi技术获得抗ToMV和CMV转基因烟草 被引量：2

2

作者 林涛 郑银英 +2 位作者 崔百明 乔亚红 向本春 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2013年第4期430-435,共6页

为了获得同时抗ToMV和CMV的转基因烟草,采用以ToMV和CMV部分CP基因片段作为干扰病毒的靶序列,构建了pBi35SG12RNAi表达载体。利用农杆菌介导法转化西方烟(Nicotiana occidentalis),经卡那霉素筛选、PCR鉴定证明干扰序列已整合到烟草基... 为了获得同时抗ToMV和CMV的转基因烟草,采用以ToMV和CMV部分CP基因片段作为干扰病毒的靶序列,构建了pBi35SG12RNAi表达载体。利用农杆菌介导法转化西方烟(Nicotiana occidentalis),经卡那霉素筛选、PCR鉴定证明干扰序列已整合到烟草基因组中,并对ToMV和CMV混合侵染表现抗性。 展开更多

关键词 番茄花叶病毒 黄瓜花叶病毒 RNAI载体 转基因烟草

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转过氧化氢酶基因KatG棉花的抗旱性 被引量：15

3

作者 蔡永智 祝建波 +2 位作者 郝晓云 王爱英 徐登献 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期56-61,共6页

以导入过氧化氢酶基因KatG的第3代转基因棉花为供试材料,通过大田试验,从卡那霉素检测出来的棉花植株中,经PCR筛选出阳性植株并进行抗旱性研究。结果显示,转基因棉花发芽率达86%以上,苗期叶绿素含量有显著增加;在苗期、蕾期和花期水分... 以导入过氧化氢酶基因KatG的第3代转基因棉花为供试材料,通过大田试验,从卡那霉素检测出来的棉花植株中,经PCR筛选出阳性植株并进行抗旱性研究。结果显示,转基因棉花发芽率达86%以上,苗期叶绿素含量有显著增加;在苗期、蕾期和花期水分胁迫下,转KatG基因棉花在蕾期与花期的过氧化氢酶(CAT)活性显著增加;净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、胞间CO2摩尔分数(Ci)和光系统Ⅱ最大光化学效率(Fv/Fm)显著高于对照;农艺性状的分析表明,转基因棉花抗旱性有明显提高;在干旱胁迫条件下,转KatG基因棉花表现出优良的生长和生理优势,可提高棉花抗旱能力。 展开更多

关键词 棉花 过氧化氢酶基因 农艺性状 生理指标 抗旱性

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转天山雪莲冷调节蛋白基因烟草的获得及其抗寒性鉴定 被引量：9

4

作者 郭新勇 程晨 +4 位作者 王重 王恒良 喻娜 王爱英 祝建波 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期1-10,共10页

从已建立的天山雪莲cDNA文库中随机挑取单克隆,采用通用引物M13扩增出基因序列并测序,然后将该序列在GenBank中进行比对,根据该序列设计特异引物进行PCR,最终获得了冷调节蛋白基因siCOR的完整开放读码框(ORF);构建植物表达载体,通过农... 从已建立的天山雪莲cDNA文库中随机挑取单克隆,采用通用引物M13扩增出基因序列并测序,然后将该序列在GenBank中进行比对,根据该序列设计特异引物进行PCR,最终获得了冷调节蛋白基因siCOR的完整开放读码框(ORF);构建植物表达载体,通过农杆菌介导法获得转基因烟草,用RT-PCR对转化烟草进行鉴定,收取种子后筛选出纯合的T3株系,并通过冷冻胁迫进行抗寒性分析。结果表明:(1)siCOR大小661bp,与禾本科植物粳稻的冷调节蛋白基因一致性最高(65.04%)。(2)与野生型植株相比,转siCOR基因烟草均叶片浓绿、无分支侧芽,生长快;在冷冻胁迫条件下,转siCOR基因的烟草叶片相对含水量、PSⅡ相对量子产率降低幅度、相对电导率和丙二醛含量的升高幅度均低于野生型烟草植株,而且转siCOR基因烟草植株叶片出现萎蔫症状的时间较迟、程度较轻,受到的伤害也较轻。研究发现,在冷冻胁迫条件下,转siCOR基因烟草植株表现出良好的生理和生长优势,显示出了较强的抗寒特征。 展开更多

关键词 天山雪莲 sicolR基因 烟草 抗寒性

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棉花高频体细胞胚胎发生及再生体系建立 被引量：9

5

作者 顾冉冉 薛金教 +2 位作者 袁英歌 彭明 崔百明 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期145-149,156,共6页

棉花的体细胞胚胎发生率低,限制了转基因棉花的发展。为了扩大可再生棉花的基因型,发展新疆优质棉花的特点,以新疆的主要栽培品种新陆早33为材料,以下胚轴为外植体,使用葡萄糖,麦芽糖作为主要碳源,用Phytagel固化,对不同激素的浓度组合... 棉花的体细胞胚胎发生率低,限制了转基因棉花的发展。为了扩大可再生棉花的基因型,发展新疆优质棉花的特点,以新疆的主要栽培品种新陆早33为材料,以下胚轴为外植体,使用葡萄糖,麦芽糖作为主要碳源,用Phytagel固化,对不同激素的浓度组合和培养条件进行探索,对棉花胚性愈伤的诱导到体细胞胚胎的发生阶段进行优化,体细胞胚胎成熟以后进行萌发培养可以获得正常的植株。通过试验证明,有利于棉花的愈伤组织生长的激素浓度为KT 0.1 mg/L,2,4-D 0.1 mg/L,下胚轴的中部诱导愈伤形态最好。体细胞胚胎发生阶段以KT,IBA组合,以低盐培养基进行子叶胚的成苗,建立了再生体系。 展开更多

关键词 棉花 体细胞胚胎 再生植株 组织培养

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芽胞杆菌高产纤维素酶菌株的诱变选育与培养基优化 被引量：7

6

作者 郭建强 柴秀娟 +2 位作者 庞学兵 裴娟 王爱英 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期263-270,共8页

为获得高产纤维素酶菌株,采用紫外(UV)诱变和紫外-亚硝基胍(UV-NTG)复合诱变方法对新疆吐鲁番地区土壤中分离得到的产纤维素酶菌株芽胞杆菌C-8进行诱变筛选,并通过二次正交旋转组合试验和响应面试验对诱变筛选得到的菌株进行培养基的优... 为获得高产纤维素酶菌株,采用紫外(UV)诱变和紫外-亚硝基胍(UV-NTG)复合诱变方法对新疆吐鲁番地区土壤中分离得到的产纤维素酶菌株芽胞杆菌C-8进行诱变筛选,并通过二次正交旋转组合试验和响应面试验对诱变筛选得到的菌株进行培养基的优化。结果表明,UV诱变菌株UV-5和UV-NTG比出发菌株C-8纤维素酶活分别提高了1.15倍和3.23倍;当发酵培养基中碳源浓度为3%、氮源浓度为1.5%、吐温-80的浓度为0.15%时,纤维素酶活达到453.20 U·m L-1,是出发菌株C-8的5.49倍和复合诱变菌株UV-NTG-10的1.7倍。本研究结果为纤维素酶的扩大发酵以及后期工业化生产提供了理论依据。 展开更多

关键词 芽胞杆菌 诱变选育 纤维素酶 二次正交旋转组合试验 响应面优化

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小拟南芥高盐胁迫诱导cDNA文库的构建与测序分析 被引量：14

7

作者 院海英 徐芳 +2 位作者 吕新华 崔百明 黄先忠 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2012年第1期1-4,共4页

以新疆小拟南芥为材料,分离了小拟南芥经500mmol/L NaCl胁迫处理的幼苗总RNA,采用改良的SMARTcDNA合成方法合成第一链cDNA,采用LD PCR的方法合成第二链cDNA,经BP反应重组到入门载体pDONR207上,构建了小拟南芥高盐胁迫的入门cDNA文库。... 以新疆小拟南芥为材料,分离了小拟南芥经500mmol/L NaCl胁迫处理的幼苗总RNA,采用改良的SMARTcDNA合成方法合成第一链cDNA,采用LD PCR的方法合成第二链cDNA,经BP反应重组到入门载体pDONR207上,构建了小拟南芥高盐胁迫的入门cDNA文库。文库插入片段平均大小为1.1kb,阳性克隆率为94%。文库经随机挑选克隆测序,生物信息学分析初步获得了10个有功能的基因,其中包含各种酶如水解酶、氧化还原酶等;功能蛋白如离子运输通道蛋白、胁迫诱导蛋白,细胞色素蛋白及激素受体蛋白基因等。可以利用入门文库构建各种目的cDNA文库,本研究为将来从小拟南芥中筛选耐盐基因奠定了基础。 展开更多

关键词 新疆小拟南芥 耐盐 入门文库 表达文库 BP重组

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棉花DELLA蛋白GhGAI2b基因的克隆和功能初步分析 被引量：7

8

作者 陈英杰 詹杰鹏 +2 位作者 王志江 崔百明 郑银英 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2014年第5期635-640,共6页

DELLA蛋白是赤霉素信号途径的负调节因子,在棉花纤维发育中有着重要作用。本研究采用同源克隆方法,从棉花中克隆DELLA蛋白Gh GAI2b基因,构建p BP35S:Gh GAI2b和p BP35S:Ghgai2b植物过表达载体,通过农杆菌介导的滴花法转化Col野生型拟南... DELLA蛋白是赤霉素信号途径的负调节因子,在棉花纤维发育中有着重要作用。本研究采用同源克隆方法,从棉花中克隆DELLA蛋白Gh GAI2b基因,构建p BP35S:Gh GAI2b和p BP35S:Ghgai2b植物过表达载体,通过农杆菌介导的滴花法转化Col野生型拟南芥。结果表明,棉花DELLA蛋白Gh GAI2b包含了DELLA蛋白家族中所有的典型保守区域;转基因拟南芥表现出莲座叶半径变短,植株矮化,花序紧凑,花器官发育迟缓等生长发育受抑制表型。说明棉花DELLA蛋白Gh GAI2b基因可能参与GA信号途径抑制植物生长发育。 展开更多

关键词 棉花 赤霉素 DELLA蛋白 GhGAI2b基因

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棉花脱氢抗坏血酸还原酶基因的克隆、原核表达与纯化 被引量：14

9

作者 李学宁 杜军伟 李鸿彬 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2010年第5期542-545,共4页

为进一步探讨脱氢抗坏血酸还原酶的生物学功能,克隆棉花的脱氢抗坏血酸还原酶基因,对该基因进行了原核表达,并对重组蛋白进行纯化和分析。通过RT-PCR方法扩增脱氢抗坏血酸还原酶基因全长,利用BamH I和Xhol I酶切位点将其克隆至组氨酸(hi... 为进一步探讨脱氢抗坏血酸还原酶的生物学功能,克隆棉花的脱氢抗坏血酸还原酶基因,对该基因进行了原核表达,并对重组蛋白进行纯化和分析。通过RT-PCR方法扩增脱氢抗坏血酸还原酶基因全长,利用BamH I和Xhol I酶切位点将其克隆至组氨酸(histidine,His)融合蛋白表达载体pET28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,经异丙基硫代--βD-半乳糖苷(isopropy--βD-5-thiogalactoside,IPTG)诱导表达,用SDS-PAGE鉴定表达产物,并用亲和层析柱纯化重组表达的pET28a-DHAR蛋白。结果表明:重组体PET28a-DHAR经测序和酶切鉴定证实构建成功。导入大肠杆菌BL21进行表达,SDS-PAGE分析目的蛋白高效表达,相对分子量为26 kD左右,并获得了纯化的His-DHAR融合蛋白。 展开更多

关键词 棉花 脱氢抗坏血酸还原酶基因 克隆 原核表达

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棉花DELLA蛋白GhGAI4a基因在拟南芥中功能初步分析 被引量：6

10

作者 吕西洋 崔百明 +3 位作者 段琛 陈英杰 黄先忠 郑银英 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2013年第5期529-535,共7页

为了探究棉花DELLA蛋白基因GhGAI4a在拟南芥中的功能,构建植物表达载体pBP35S∶GhGAI4a和pBP35S∶Ghgai4a,利用农杆菌介导的花滴法将其转入Col野生型拟南芥。结果显示,2个载体各自获得6个独立的转基因拟南芥纯合株系。分别统计48-96h种... 为了探究棉花DELLA蛋白基因GhGAI4a在拟南芥中的功能,构建植物表达载体pBP35S∶GhGAI4a和pBP35S∶Ghgai4a,利用农杆菌介导的花滴法将其转入Col野生型拟南芥。结果显示,2个载体各自获得6个独立的转基因拟南芥纯合株系。分别统计48-96h种子萌发率,测量生长7d后幼苗的主根长度,与非转基因植株相比,过量表达GhGAI4a、Ghgai4a对拟南芥种子萌发及主根生长具有明显的抑制作用。1μmol/L GA处理转基因植株,GhGAI4a转基因植株主根长和萌发率均增大,而Ghgai4a转基因植株主根长度和萌发率均无显著变化。 展开更多

关键词 棉花 GhGAI4a基因 DELLA蛋白 赤霉素

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MLL启动子驱动SST基因转化甜菜的抗旱性分析 被引量：5

11

作者 梁文洁 张丽 +3 位作者 郭新勇 王爱英 向本春 祝建波 《江苏农业科学》 2018年第5期43-48,共6页

将洋葱(Allium cepa)的蔗糖-果糖基转移酶基因SST与甜菜根部特异性启动子MLL重组,以p BI121为起始载体,构建p BI121-MLL-SST,通过农杆菌介导法转化甜菜(Beta vulgaris)品种STFD4,利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,简称PCR... 将洋葱(Allium cepa)的蔗糖-果糖基转移酶基因SST与甜菜根部特异性启动子MLL重组,以p BI121为起始载体,构建p BI121-MLL-SST,通过农杆菌介导法转化甜菜(Beta vulgaris)品种STFD4,利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,简称PCR)鉴定转化植株,并用逆转录PCR(reverse transcription PCR,简称RT-PCR)技术检测SST基因的表达。利用干旱胁迫处理进行抗旱性分析,结果表明,与对照(CK)相比,转SST植株叶片萎蔫较迟且程度较轻,其叶片相对含水量和光系统Ⅱ相对量子产率的降低幅度、相对电导率和丙二醛含量的提高幅度均低于对照甜菜植株。以上结果表明,SST基因可明显提高甜菜的抗旱性,为进一步研究该基因在甜菜中的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 蔗糖-果糖基转移酶(SST) 植物表达载体 根部特异性启动子 甜菜 转化

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HRAP基因诱导型植物表达载体的构建及烟草转化 被引量：2

12

作者 王爱英 缪建锟 +2 位作者 彭晓明 沈海涛 祝建波 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期157-160,共4页

系统获得性抗性是植物抵御病菌侵染的一种独特的防御机制。HRAP基因是一种从甜胡椒中克隆的蛋白质激发子,可以有效引发植物系统性抗性。SAR8.2b基因是烟草系统获得性抗性信号传导途径中下游响应基因,受病原物和水杨酸诱导。本试验根据Ge... 系统获得性抗性是植物抵御病菌侵染的一种独特的防御机制。HRAP基因是一种从甜胡椒中克隆的蛋白质激发子,可以有效引发植物系统性抗性。SAR8.2b基因是烟草系统获得性抗性信号传导途径中下游响应基因,受病原物和水杨酸诱导。本试验根据Genebank发布SAR8.2b基因的启动子序列,利用PCR技术,克隆了SAR8.2b基因的完整启动子,命名为SAR8.2bP,然后将SAR8.2bP构建到pUC18-HRAP载体中命名为pUC18-SAR8.2bP-HRAP,然后用SAR8.2bP-HRAP替换p2300-121载体中的35S启动子和GUS基因,重组子命名p2300-SAR8.2bP-HRAP。将构建的植物表达载体转化农杆菌GV3101,利用叶盘法转化烟草,通过PCR筛选,获得了转基因植株。为进一步验证转基因烟草的抗病效果奠定了基础。 展开更多

关键词 HRAP基因 SAR8.2b启动子 系统获得性抗性 转基因烟草

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响应面分析法优化乙酸乙酯萃取番茄红素条件的研究 被引量：3

13

作者 沈海涛 王爱英 祝建波 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期83-92,共10页

采用响应面方法对番茄酱提取番茄红素过程中的乙醇预处理方法、萃取剂萃取时间等工艺条件进行了优化。采用Central Composite Design(CCD)设计法,对超声波提取法和微波提取法中的乙醇预处理、萃取剂萃取时间、超声波或微波萃取功率、溶... 采用响应面方法对番茄酱提取番茄红素过程中的乙醇预处理方法、萃取剂萃取时间等工艺条件进行了优化。采用Central Composite Design(CCD)设计法,对超声波提取法和微波提取法中的乙醇预处理、萃取剂萃取时间、超声波或微波萃取功率、溶剂量4个因素对番茄红素提取率的影响进行评价。结果显示,最佳提取方法为超声波提取法,无水乙醇∶番茄酱的2.05∶1(V/W);乙酸乙酯∶番茄酱10.1∶1(V/W);提取时间为490 s;超声波提取功率为405 W;提取率为94.42%。微波提取最佳方法为,无水乙醇∶番茄酱的2.11∶1(V/W);乙酸乙酯∶番茄酱10.1∶1(V/W);提取时间为372.6 s;微波提取功率为569.5 W;提取率为81.51%。 展开更多

关键词 番茄酱 番茄红素 微波处理 超声波处理

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天山雪莲rbcS基因启动子的克隆及序列分析 被引量：2

14

作者 张亚敏 杨晶 +1 位作者 王爱英 祝建波 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期146-152,共7页

以天山雪莲(S.involucrata Kar.et Kir.)为材料,根据已获得的天山雪莲1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基基因组序列设计引物,采用热不对称交错PCR(TAIL-PCR)和高效TAIL-PCR(hiTAIL-PCR)扩增到rbcS基因5′上游启动子序列,长为1 668bp。... 以天山雪莲(S.involucrata Kar.et Kir.)为材料,根据已获得的天山雪莲1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基基因组序列设计引物,采用热不对称交错PCR(TAIL-PCR)和高效TAIL-PCR(hiTAIL-PCR)扩增到rbcS基因5′上游启动子序列,长为1 668bp。用PlantCare和PLACE软件序列分析表明,该序列具有启动子的基本元件TATA-box、CA AT-box,包含多个胁迫诱导元件,如光诱导元件、赤霉素、低温诱导元件,昼夜节律调控元件等。构建pBI-PsikrbcS-GUS植物表达载体,并成功将其转化进入农杆菌。sikrbcS基因启动子的克隆与分析为进一步研究雪莲1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基基因的表达调控奠定了基础。 展开更多

关键词 天山雪莲 RBCS 热不对称交错PCR 高效TAIL-PCR 启动子 序列分析

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拟南芥冷诱导型启动子CBF3驱动IPT基因在烟*草中的表达 被引量：2

15

作者 郭新勇 程晨 +1 位作者 张选 祝建波 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期123-131,共9页

用PCR的方法获得拟南芥冷诱导型启动子CBF3和农杆菌Ti质粒上的IPT基因,构建由启动子CBF3驱动IPT植物表达载体,并经农杆菌介导将基因整合到烟草的基因组中,利用Kan筛选、PCR和RT-PCR检测,最终获得转基因的植株。通过对烟草的植物学性状... 用PCR的方法获得拟南芥冷诱导型启动子CBF3和农杆菌Ti质粒上的IPT基因,构建由启动子CBF3驱动IPT植物表达载体,并经农杆菌介导将基因整合到烟草的基因组中,利用Kan筛选、PCR和RT-PCR检测,最终获得转基因的植株。通过对烟草的植物学性状和农艺学性状的分析发现,随着启动子CBF3驱动的IPT基因在烟草中的表达,使得植株性状发生很大的改变,如株型变为塔型,株高增高,节距增长,且有很多的分枝和侧芽,叶片明显增多,表现出短窄且平滑的性状,茎围、腰叶长和腰叶宽都减小许多,相应的最大叶面积、顶叶面积和叶质量也都下降,但叶的密度却有所增加。 展开更多

关键词 异戊烯基转移酶基因(IPT) 烟草 冷诱导型启动子 表型

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转大肠杆菌过氧化氢酶基因棉花的抗旱生理研究 被引量：1

16

作者 王海霞 杨晶 +4 位作者 张亚敏 胡鸢雷 王爱英 祝建波 沈海涛 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期2034-2040,共7页

以导入大肠杆菌过氧化氢酶基因KatE的T3代转基因棉花为供试材料,经卡那霉素检测和PCR鉴定,将筛选出的阳性转基因植株与对照棉花进行整个生育期的持续水分胁迫处理直至收获,比较材料间的生理生化指标的差异,鉴定转基因植株的耐旱能力。... 以导入大肠杆菌过氧化氢酶基因KatE的T3代转基因棉花为供试材料,经卡那霉素检测和PCR鉴定,将筛选出的阳性转基因植株与对照棉花进行整个生育期的持续水分胁迫处理直至收获,比较材料间的生理生化指标的差异,鉴定转基因植株的耐旱能力。结果显示:(1)干旱胁迫持续至初蕾期时,转基因棉花与对照植株间各项抗旱生理指标差异均未达到显著水平。(2)水分胁迫持续至盛蕾和盛花期时,转基因棉花叶片相对含水量、光系统Ⅱ最大光化学效率(Fv/Fm)、CAT活性,以及叶片的净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)和蒸腾速率(Tr)均显著或极显著高于对照植株,叶绿素含量也都明显高于对照植株。干旱胁迫持续至吐絮期时,转基因棉花的株高、果枝数和铃数均显著或极显著高于对照植株,且转基因棉花和对照的籽棉产量分别比正常灌溉处理降低57.5%和60.1%,全生育期的水分胁迫严重影响了棉花籽棉产量,但转基因棉花的籽棉产量仍显著高于对照。研究表明,在新疆石河子当地自然降水(干旱胁迫)条件下,转KatE基因棉花表现出了较好的生理和生长优势,KatE基因有助于提高棉花的抗旱性。 展开更多

关键词 转基因棉花 大肠杆菌过氧化氢酶基因 抗旱性 农艺性状 产量

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转菜豆几丁质酶和葡聚糖酶基因抗病棉花与野西瓜苗和苘麻间的基因漂移和生存竞争力分析 被引量：1

17

作者 邱红林 张林华 +4 位作者 刘超 吴名付 何黎 祝建波 王爱英 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2013年第5期432-439,共8页

利用培育的转菜豆几丁质酶和葡聚糖酶双价基因(pBLGC)的抗病棉花高代株系与同科植物(野西瓜苗和苘麻)杂交及其DNA渗入试验,研究北疆生态区基因漂移的可能性。通过裸地种植的方式,在棉花苗期、蕾期、花铃期和吐絮期对转基因抗病棉花与田... 利用培育的转菜豆几丁质酶和葡聚糖酶双价基因(pBLGC)的抗病棉花高代株系与同科植物(野西瓜苗和苘麻)杂交及其DNA渗入试验,研究北疆生态区基因漂移的可能性。通过裸地种植的方式,在棉花苗期、蕾期、花铃期和吐絮期对转基因抗病棉花与田间杂草的株高、群落的种类及种群密度、生物多样性和生物量进行监测,分析转基因抗病棉花与田间杂草的生存竞争能力。试验结果表明:棉花与同科植物(野西瓜苗和苘麻)远缘杂交不能正常结实。通过转基因棉花花粉DNA将目标基因渗入杂草基因组经检测均未获得阳性植株,说明转基因抗病棉花的靶标基因转移至杂草基因组的可能性很小。在裸地种植的田间正常灌水和自然条件下,不同区域物种植株株高以及种群密度等指标表明转基因棉花并未增强自身与杂草的竞争能力,转化为杂草的可能性几乎为零。 展开更多

关键词 转基因抗病棉花 杂草群落 生物量 生物多样性 生物安全性评价

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加工番茄马铃薯Y病毒一步法RT-PCR检测及CP基因的克隆与序列分析 被引量：1

18

作者 梁学超 向本春 +2 位作者 程朝玲 苏海娣 郑银英 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第6期2340-2344,共5页

本文通过一步法RT-PCR技术,检测新疆加工番茄马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)感染率。结果表明,新疆加工番茄马铃薯Y病毒感染率为25%。选取10个样品利用RT-PCR技术,克隆CP基因,获得807 bp全长CP基因,编码268个氨基酸。CP基因序列比对... 本文通过一步法RT-PCR技术,检测新疆加工番茄马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)感染率。结果表明,新疆加工番茄马铃薯Y病毒感染率为25%。选取10个样品利用RT-PCR技术,克隆CP基因,获得807 bp全长CP基因,编码268个氨基酸。CP基因序列比对分析与系统进化树分析表明,侵染新疆加工番茄的马铃薯Y病毒属于PVYN:O株系。 展开更多

关键词 马铃薯Y病毒 加工番茄 一步法RT—PCR CP基因

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天山雪莲SikP基因提高类黄酮质量分数的研究 被引量：1

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作者 张丽 黎玉顺 +1 位作者 管岩岩 祝建波 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期119-127,共9页

通过分子克隆技术人工调控天山雪莲类黄酮代谢过程,以提高其类黄酮质量分数。采用农杆菌介导法将SikP基因的植物表达载体转入天山雪莲叶片,成功获得转SikP基因天山雪莲抗性愈伤组织及从生芽;提取并检测对照组和转SikP基因天山雪莲的类黄... 通过分子克隆技术人工调控天山雪莲类黄酮代谢过程,以提高其类黄酮质量分数。采用农杆菌介导法将SikP基因的植物表达载体转入天山雪莲叶片,成功获得转SikP基因天山雪莲抗性愈伤组织及从生芽;提取并检测对照组和转SikP基因天山雪莲的类黄酮,结果显示,转SikP基因天山雪莲的类黄酮质量分数明显提高,是对照组天山雪莲类黄酮质量分数的9.63倍。说明,天山雪莲Myb转录调控因子SikP基因对天山雪莲次生代谢具有重要的调控作用,能够有效地提高天山雪莲类黄酮的质量分数。 展开更多

关键词 天山雪莲 SikP基因 农杆菌介导法 类黄酮

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GDSL脂肪酶增强棉花对大丽轮枝菌的抗性

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作者 安晶 潘泽 李鸿彬 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2017年第4期420-424,共5页

大丽轮枝菌是影响棉花生长发育的一种通过土传真菌维管束的病菌,严重影响棉花纤维的产量和品质。为研究棉花GDSL脂肪酶(GDSL lipase,GLIP)在植物响应大丽轮枝菌中的重要功能,本研究利用大丽轮枝菌悬浮液对新陆早42号及其转GhGLIP基因的... 大丽轮枝菌是影响棉花生长发育的一种通过土传真菌维管束的病菌,严重影响棉花纤维的产量和品质。为研究棉花GDSL脂肪酶(GDSL lipase,GLIP)在植物响应大丽轮枝菌中的重要功能,本研究利用大丽轮枝菌悬浮液对新陆早42号及其转GhGLIP基因的棉花株系叶片进行处理,分析转GhGLIP棉花株系对大丽轮枝菌的生理生化响应。结果表明,棉花GDSL脂肪酶基因GhGLIP能够响应大丽轮枝菌的刺激,转GhGLIP基因棉花株系可显著抑制大丽轮枝菌导致的叶片细胞死亡。与未处理相比,经大丽轮枝菌处理后的野生型和转基因棉花株系植株的GDSL脂肪酶活力显著增加。同时,转基因棉花株系植株过氧化氢酶、过氧化物酶、超氧化物歧化酶、苯丙氨酸解氨酶和多酚氧化物酶的表达显著提升,说明GhGLIP基因诱导了棉花对大丽轮枝菌的抗性。本研究为棉花抵抗大丽轮枝菌的分子机制解析,及进一步利用基因工程技术培育抗病棉花材料提供了有效参考。 展开更多

关键词 GDSL脂肪酶 大丽轮枝菌 棉花抗病 抗氧化系统酶类

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