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冠心病患者心外膜脂肪组织和血浆中脂联素相关miR-371b-5p表达及其对脂肪细胞因子分泌的影响 被引量：19
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作者 杜雅彦 刘洋 +3 位作者 卢沐 怀施涛 吕作利 魏育涛 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期643-650,I0006,共9页
目的:探讨冠心病(CAD)患者心外膜脂肪组织(EAT)和血浆中脂联素(APN,又称ADIPOQ相关差异表达miR-371b-5p对脂肪细胞因子APN、Kruppel样因子4 (KLF4)、白细胞介素6 (IL-6)和单核细胞因子趋化蛋白1 (MCP-1)分泌的影响,阐明miR-371b-5p在CA... 目的:探讨冠心病(CAD)患者心外膜脂肪组织(EAT)和血浆中脂联素(APN,又称ADIPOQ相关差异表达miR-371b-5p对脂肪细胞因子APN、Kruppel样因子4 (KLF4)、白细胞介素6 (IL-6)和单核细胞因子趋化蛋白1 (MCP-1)分泌的影响,阐明miR-371b-5p在CAD中的作用机制。方法:收集CAD (CAD组,n=34)和非CAD (non-CAD组,n=16)患者的EAT和血液标本,采用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)法检测2组患者EAT和血浆中miR-371b-5p的表达水平。将诱导成功的3T3-L1前体脂肪细胞分为空白对照组(不做任何处理)、miR-371b-5p过表达组(转染miR-371b-5p模拟物)和miR-371b-5p抑制剂组(转染miR-371b-5p抑制剂)。qRT-PCR法检测转染24h后各组3T3-L1前脂肪细胞中APN、KLF4、IL-6和MCP-1mRNA表达水平,并对miR-371b-5p进行生物信息学分析。结果:与non-CAD组比较,CAD组患者EAT和血浆中miR-371b-5p表达水平均升高(P<0.01)。与空白对照组比较,miR-371b-5p过表达组3T3-L1前脂肪细胞中APN和KLF4mRNA表达水平降低(P=0.043,P=0.045),IL-6和MCP-1mRNA表达水平升高(P=0.037,P=0.041);miR-371b-5p抑制剂组3T3-L1前脂肪细胞中APN和KLF4mRNA表达水平升高(P=0.025,P=0.027),IL-6和MCP-1mRNA表达水平降低(P=0.039,P=0.041)。miR-371b-5p预测靶基因富集于多个生物学功能及过程,KEGG通路主要富集于脂肪细胞因子等信号通路;蛋白互作,miR-371b-5p预测靶基因APN、瘦素(LEP)和AKT1编码蛋白位于互作网络中核心位置。结论:CAD患者EAT中过表达miR-371b-5p转染成熟的3T3-L1脂肪细胞后可使细胞的抗炎因子表达水平降低,炎性因子表达水平升高,miR-371b-5p有望成为CAD治疗的新靶点。 展开更多
关键词 冠心病 心外膜脂肪组织 微小RNA 脂肪细胞因子 生物信息学分析
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MiR-25-3p靶向NOTCH1对食管鳞癌细胞ECA109侵袭、迁移、增殖的影响 被引量：6
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作者 薛亚军 杜雅彦 +2 位作者 周奕君 董星星 魏育涛 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第1期75-80,共6页
目的探讨miR-25-3p靶向NOTCH1基因对食管鳞癌细胞侵袭、迁移和增殖的影响,阐明miR-25-3p和NOTCH1基因在食管鳞癌中的作用机制。方法将ECA109细胞以1×10~6/ml均匀接种于培养皿,每组设3个复孔,实验分为两组。第1组:miR-25-3p上调组(... 目的探讨miR-25-3p靶向NOTCH1基因对食管鳞癌细胞侵袭、迁移和增殖的影响,阐明miR-25-3p和NOTCH1基因在食管鳞癌中的作用机制。方法将ECA109细胞以1×10~6/ml均匀接种于培养皿,每组设3个复孔,实验分为两组。第1组:miR-25-3p上调组(转染miR-25-3p模拟物)、miR-25-3p下调组(转染miR-25-3p抑制剂)和NC组;第2组:NOTCH1上调组(转染NOTCH1模拟物)、NOTCH1下调组(转染NOTCH1抑制剂)和NC组。实时荧光定量PCR法分别检测各组miR-25-3p、NOTCH1表达水平,Transwell小室检测转染miR-25-3p、NOTCH1后ESCC细胞侵袭能力,CCK-8检测细胞增殖能力,生物信息学分析和荧光素酶活性测定以确定NOTCH1是否为miR-25-3p的靶基因。结果①NOTCH1是miR-25-3p的靶基因;②细胞实验结果显示,与NC组相比,miR-25-3p上调组促进ECA109细胞的侵袭(P<0.05),CCK-8增殖试验显示在ECA109细胞中miR-25-3p上调组促进细胞增殖(P<0.05);③下调NOTCH1促进细胞生长(P<0.05),下调NOTCH1可增强ECA109细胞的侵袭能力(P<0.005),上调NOTCH1可抑制ECA109细胞的侵袭能力(P<0.005)。结论 miR-25-3p通过靶向调节NOTCH1促进人ESCC细胞的侵袭、迁移和增殖,miR-25-3p有望成为ESCC治疗的新靶点。 展开更多
关键词 miR-25-3p ESCC NOTCH1 侵袭 增殖 生物信息学分析
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冠心病EAT中miR-455b-3p调控脂肪细胞分化及炎症因子 被引量：7
3
作者 杜雅彦 刘洋 +3 位作者 卢沐 怀施涛 吕作利 魏育涛 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第10期1594-1600,共7页
目的筛选在冠状动脉粥样硬化性心脏病(CAD)患者和非冠心病(non-CAD)患者心外膜脂肪组织(EAT)中差异性表达的microRNAs(DE-miRNAs),探讨其中miR-455b-3p对脂肪细胞因子APN、Kruppel样因子4(KLF4)、白细胞介素6(IL-6)和单核细胞因子趋化蛋... 目的筛选在冠状动脉粥样硬化性心脏病(CAD)患者和非冠心病(non-CAD)患者心外膜脂肪组织(EAT)中差异性表达的microRNAs(DE-miRNAs),探讨其中miR-455b-3p对脂肪细胞因子APN、Kruppel样因子4(KLF4)、白细胞介素6(IL-6)和单核细胞因子趋化蛋白1(MCP-1)分泌及对脂肪细胞分化的影响。方法收集冠心病(CAD)34例和非冠心病(non-CAD)16例EAT和血液标本,分别为实验组(CAD组)和对照组(Non-CAD组),采用miRNA芯片技术筛选出EAT中DE-miRNAs,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测标本中miR-455b-3p的表达水平。分别将miR-455b-3p的mimics、miR-455b-3p的inhibitors和NC转染入前体3T3-L1细胞及已诱导成熟的3T3-L1细胞,分为上调组、下调组和NC组。采用qRT-PCR法检测转染24 h后细胞中APN、KLF4、IL-6、MCP-1 mRNA及脂肪细胞分化标志物过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPARγ)、CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)、脂肪酸结合蛋白4(FABP4)mRNA的相对表达水平。结果与实验组比较,对照组EAT标本中共筛选出29个DE-miRNAs(P<0.05;差异倍数>2,差异有统计学意义),其中下调10个,上调19个。miR-455b-3p是与ADIPOQ 3’-UTR有互补结合位点或密切相关的1条DE-miRNA。qRT-PCR验证结果显示,与对照组比较,miR-455b-3p在实验组中的表达均升高。与NC组比较,转染miR-455b-3p的mimics后,上调组成熟3T3-L1脂肪细胞中APN、KLF4 mRNA表达减少,IL-6、MCP-1 mRNA表达增多;脂肪细胞分化标志物PPARγ、C/EBPα、FABP4 mRNA表达升高;转染miR-455b-3p inhibitor后,下调组APN、KLF4 mRNA表达水平升高,IL-6、MCP-1 mRNA表达减少。结论在CAD组患者EAT中存在差异性表达的miRNAs,其中miR-455b-3p高表达,miR-455b-3p影响脂肪细胞因子APN、KLF4、IL-6以及MCP-1的表达,并且促进脂肪细胞分化成熟,从而影响冠心病的发生发展。 展开更多
关键词 冠心病 心外膜脂肪组织 微小RNA 脂联素 脂肪细胞分化
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