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神经营养因子neuritin在人体组织中的表达及验证 被引量:1
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作者 孟平平 朱井玲 +2 位作者 曹建 魏瑜 罗星 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第6期505-509,共5页
目的基于生物信息学探讨神经营养因子neuritin(NRN1)在人体组织中的表达并验证。方法利用人类蛋白图谱(HPA)数据库对NRN1基因进行组织表达谱分析;分别利用实时定量PCR和免疫组织化学检测NRN1 mRNA及蛋白表达。利用已构建的pEGFP-C1-neur... 目的基于生物信息学探讨神经营养因子neuritin(NRN1)在人体组织中的表达并验证。方法利用人类蛋白图谱(HPA)数据库对NRN1基因进行组织表达谱分析;分别利用实时定量PCR和免疫组织化学检测NRN1 mRNA及蛋白表达。利用已构建的pEGFP-C1-neuritin绿荧光蛋白融合表达载体转染人肾上皮细胞系293细胞,免疫荧光检测293细胞中NRN1蛋白定位情况;同时检测小鼠海马神经元细胞系HT22细胞中内源性NRN1蛋白定位情况。结果HPA数据库分析结果显示,NRN1主要在大脑皮层、甲状旁腺、脂肪组织、胎盘等组织中表达。验证结果显示,NRN1在上述组织中均有表达,其中,脑及脾脏组织中表达量最高。免疫荧光结果显示NRN1在HT22细胞主要定位在细胞膜上;在293细胞主要定位在细胞质中。结论NRN1在人体脑、心脏、肝脏、肺、小肠以及卵巢等多种组织中表达,在脑组织中呈高表达。NRN1主要定位在细胞膜及细胞质中。 展开更多
关键词 NEURITIN 组织分布 表达谱 免疫组织化学 亚细胞定位
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Neuritin对鸡胚尿囊膜及人脐静脉内皮细胞血管生成作用的影响
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作者 梁富华 张云华 +4 位作者 杨萱 侯艳萌 吕贵珍 唐文洁 杨丽 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第2期170-177,共8页
目的 探究神经营养因子Neuritin过表达对鸡胚尿囊膜(CAM)和人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血管生成作用的影响,为治疗血管生成性疾病提供新方向。方法 选择新鲜黄皮种蛋30枚建立CAM模型,采用随机数字表法分为3组:阳性对照组(bFGF)、阴性对照... 目的 探究神经营养因子Neuritin过表达对鸡胚尿囊膜(CAM)和人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血管生成作用的影响,为治疗血管生成性疾病提供新方向。方法 选择新鲜黄皮种蛋30枚建立CAM模型,采用随机数字表法分为3组:阳性对照组(bFGF)、阴性对照组(NS)和实验组(Neuritin),每组10枚。阳性对照组载入2 500 U/mL的bFGF,实验组载入10μg/mL的Neuritin蛋白,阴性对照组载入NS,各组载入量均为10μL且所有CAM的培养温度、相对湿度及孵育时间相同,记录孵育72 h后各组CAM的血管分支、数目及大小。选择健康孕妇的新鲜脐带制作原代HUVECs,将其分为3组:转染重组质粒组(HUVEC-neu组)、转染空载体组(HUVEC-3.1组)和未转染组(HUVEC组)。HUVEC-neu组的原代HUVECs经重组质粒Neuritin转染,HUVEC-3.1组经空载体质粒转染,HUVEC组不给予特殊处理,3组均接受相同的传代培养方案。Western blot检测Neuritin在HUVEC-3.1组与HUVEC-neu组的蛋白表达水平。CCK-8实验、细胞划痕实验、Transwell实验和管型形成实验检测HUVEC-3.1组和HUVEC-neu组的细胞增殖、迁移和管型形成能力。结果 (1)实验组的CAM血管分支点数及微小血管数较阴性对照组明显增加(P <0.01),但两组的大、中血管数差异无统计学意义(P> 0.05);(2)HUVEC-neu组中Neuritin在HUVECs成功过表达。(3)与HUVEC-3.1组相比,HUVEC-neu组的细胞增殖活力下降(P <0.05),但其迁移、管型形成能力明显增强(P <0.01)。结论 Neuritin过表达可促进血管生成,通过影响细胞增殖、迁移和管型形成能力参与新生血管的调控。 展开更多
关键词 血管生成 NEURITIN 鸡胚尿囊膜 人脐静脉血管内皮细胞
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B7家族新成员 被引量:4
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作者 曹旭东 孔令洪 王一理 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期F002-F002,F003,共2页
关键词 B7H1(B7 HOMOLOG 1) PD—L2(Programmed death—1 LIGAND 2) B7H2(B7 HOMOLOG 2) B7H3(B7 HOMOLOG 3)
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GFP-Rv2626c融合蛋白表达载体的构建及表达纯化 被引量:2
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作者 曹旭东 陈创夫 +1 位作者 张辉 王远志 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期361-364,共4页
目的构建含Rv2626c基因的原核表达载体,获得GFP-Rv2626c融合蛋白,为今后开发鉴别结核感染的血清学诊断试剂打下基础。方法以结核杆菌H37Rv基因组DNA为模板,经PCR法扩增得到Rv2626c基因DNA片段。将扩增片段克隆到pGM-T载体中测序,并进一... 目的构建含Rv2626c基因的原核表达载体,获得GFP-Rv2626c融合蛋白,为今后开发鉴别结核感染的血清学诊断试剂打下基础。方法以结核杆菌H37Rv基因组DNA为模板,经PCR法扩增得到Rv2626c基因DNA片段。将扩增片段克隆到pGM-T载体中测序,并进一步将Rv2626c亚克隆到pET28a-GFP中,构建原核重组表达载体pET28a-GFP-Rv2626c。将pET28a-GFP-Rv2626c转化E.coli BL21(DE3),用IPTG诱导目的基因表达,经SDS-PAGE和Western-blot分析和纯化该表达产物。结果经核苷酸序列测定和酶切鉴定,成功构建了重组质粒pET28a-GFP-Rv2626c。用IPTG诱导该质粒转化的E.coliBL21后,获得分子量约46kD的GFP-Rv2626c融合蛋白。经Ni-NTA Agarose试剂盒进行蛋白纯化,获得纯化的GFP-Rv2626c融合蛋白。结论成功制备出重组GFP-Rv2626c融合蛋白,为开发鉴别结核感染的血清学诊断试剂打下了基础。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 Rv2626c GFP 原核表达载体
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GFRa1不同剪接变异体mRNA在胃癌及结肠癌组织中的表达 被引量:1
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作者 许彭 刘兆君 +4 位作者 李伟 王翠喆 哈晓丹 谢建新 张君 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2015年第6期727-731,共5页
为检测正常胃粘膜及胃癌组织和正常结肠及结肠癌组织中GFRa1 m RNA表达量,以及两种剪接体GFRa1a和GFRa1b的m RNA含量。初步明确胃及结肠组织中GFRa1剪接体存在形式以及与胃癌、结肠癌发生的相关性。采用收集23例正常胃粘膜/胃炎组织、2... 为检测正常胃粘膜及胃癌组织和正常结肠及结肠癌组织中GFRa1 m RNA表达量,以及两种剪接体GFRa1a和GFRa1b的m RNA含量。初步明确胃及结肠组织中GFRa1剪接体存在形式以及与胃癌、结肠癌发生的相关性。采用收集23例正常胃粘膜/胃炎组织、20对胃癌及其切缘组织和6例非癌患者正常结肠活检组织、20对结肠癌及其切缘组织的方法。选择并提取结肠癌细胞系RKO,正常人胃粘膜上皮细胞系GES-1和人胃癌细胞SGC-7901这3种细胞系的RNA。以Alu m RNA为内参照,用定量RT-PCR的方法对胃组织、结肠组织以及所选的细胞系中GFRa1总m RNA含量进行分析。运用DHPLC技术区分GFRa1不同的剪接体,定量测定两种转录本剪接体的比值。结果显示,胃及结肠组织中,与正常及癌组织相比,切缘组织GFRa1总m RNA、剪接体a及剪接体b的m RNA相对拷贝数均显著增加(P<0.05)。所有组织中GFRa1剪接体b的m RNA相对拷贝数均高于剪接体a。细胞系RKO、GES-1和SGC-7901均检测到GFRa1剪接体b的表达,而未检测到剪接体a。由此可知,胃和结肠组织以及相应的细胞系中GFRa1主要以剪接体b的形式存在;GFRa1剪接体b的高表达可能在胃及结肠组织癌变过程发挥作用。 展开更多
关键词 胃癌 结肠癌 GFRa1 剪接体
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新疆地区汉族、维吾尔族和哈萨克族脂代谢异常检出率分析 被引量:12
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作者 哈晓丹 王翠喆 +4 位作者 李伟 许彭 王婷婷 王燕 张君 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2016年第1期63-68,共6页
为了解新疆地区汉族、维吾尔族和哈萨克族脂代谢特征,阐明代谢综合征各指标间的相互关系,以2014年612月新疆维吾尔自治区人民医院门诊体检个体为研究对象,包括年龄在2090岁之间的汉族1359名、维吾尔族172名、哈萨克族630名,收集其一般资... 为了解新疆地区汉族、维吾尔族和哈萨克族脂代谢特征,阐明代谢综合征各指标间的相互关系,以2014年612月新疆维吾尔自治区人民医院门诊体检个体为研究对象,包括年龄在2090岁之间的汉族1359名、维吾尔族172名、哈萨克族630名,收集其一般资料,检测空腹血糖、血浆总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇等指标,并对不同民族血脂异常检出率进行分析比较。结果显示,维吾尔族体重、腰围、臀围、腰臀比、体质指数、肥胖及腹型肥胖检出率、血压,以及各项血脂指标均显著高于汉族及哈萨克族。新疆地区汉族、维吾尔族和哈萨克族体检人群血脂异常总检出率为23.23%,男性(32.40%)显著高于女性(17.61%)(P〈0.001);高胆固醇血症检出率、高三酰甘油血症检出率以及低密度脂蛋白胆固醇血症检出率维吾尔族显著高于汉族和哈萨克族(P〈0.001);各项血脂指标中除高密度脂蛋白胆固醇与体重、体质指数、腰围、臀围、腰臀比、收缩压、舒张压、空腹血糖、2 h后血糖、空腹胰岛素以及2 h后胰岛素等指标在汉族和哈萨克族人群中显著负相关,其余指标均与上述资料显著正相关(P〈0.01)。而在维吾尔族人群中仅有总胆固醇与身高、臀围、舒张压显著正相关,低密度脂蛋白与2 h血糖显著正相关(P〈0.01),其余指标之间均无显著相关性。结果表明,血脂异常的发生在民族及性别间存在显著差异,维吾尔族更易发生脂代谢紊乱,可能与其独特的遗传背景有关。 展开更多
关键词 汉族 维吾尔族 哈萨克族 脂代谢异常
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