锁定钢板外置联合封闭式负压引流治疗伴软组织缺损的胫骨远端粉碎性骨折的疗效 被引量：27

1

作者 陈磊 孙建华 +2 位作者 王维山 董金波 史晨辉 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期692-694,共3页

目的 探讨锁定钢板外置联合封闭式负压引流（VSD）治疗伴软组织缺损的胫骨远端粉碎性骨折的临床疗效.方法 回顾性分析新疆石河子大学医学院第一附属医院2009年9月-2012年1月收治的32例伴软组织缺损的胫骨远端粉碎性骨折患者,依据AO骨折... 目的 探讨锁定钢板外置联合封闭式负压引流（VSD）治疗伴软组织缺损的胫骨远端粉碎性骨折的临床疗效.方法 回顾性分析新疆石河子大学医学院第一附属医院2009年9月-2012年1月收治的32例伴软组织缺损的胫骨远端粉碎性骨折患者,依据AO骨折分型,均为43-A3型骨折.采用有限切开复位、锁定钢板外置固定胫骨骨折,多次清创、VSD覆盖创面治疗软组织缺损及创面感染.结果 32例患者均获得随访,随访时间13~17个月,平均随访15.7个月,软组织缺损及感染创面均获得愈合,平均愈合时间5周;胫骨远端骨折均获得骨性愈合,平均愈合时间为28周.按照Johner-Wruhs 方法进行功能评价,其中优27例,良5例,优良率100%.结论 锁定钢板外置联合VSD治疗伴软组织缺损的胫骨远端粉碎性骨折效果良好.有限切开保护骨折端血运、长跨度、少螺钉锁定板固定和及时负压引流是获得良好疗效的关键. 展开更多

关键词 胫骨骨折 骨折 粉碎性 软组织损伤 负压伤口疗法 外固定器

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膜型基质金属蛋白酶-1在骨性关节炎患者滑膜中的表达及意义 被引量：9

2

作者 张杰 王维山 +3 位作者 董金波 杨坚 何仁豪 史晨辉 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期494-497,共4页

目的:探讨膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP/MMP-14)在骨性关节炎(OA)患者膝关节滑膜中的表达和意义。方法:应用免疫组化和Western blot方法检测MT1-MMP蛋白在40例OA与40例非OA患者滑膜中的表达情况。结果:免疫组化结果表明MT1-MMP蛋白在O... 目的:探讨膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP/MMP-14)在骨性关节炎(OA)患者膝关节滑膜中的表达和意义。方法:应用免疫组化和Western blot方法检测MT1-MMP蛋白在40例OA与40例非OA患者滑膜中的表达情况。结果:免疫组化结果表明MT1-MMP蛋白在OA与非OA患者滑膜中的表达有显著性差异(χ2=29.46,P<0.01),且阳性表达多定位于滑膜细胞的胞质;Western blot分析结果显示MT1-MMP蛋白在OA患者滑膜(1.042±0.219)中表达显著高于非OA患者滑膜组织(0.256±0.050,F=12.838,P=0.001)。结论:MT1-MMP蛋白与骨性关节炎发生发展相关,可能作为诊断及判断骨性关节炎的一项重要指标。 展开更多

关键词 骨性关节炎 膜型基质金属蛋白酶-1 免疫组化 WESTERN BLOT

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骨性关节炎患者不同病变程度滑膜中基质金属蛋白酶-3的表达及意义 被引量：14

3

作者 霍红军 王维山 +2 位作者 董金波 李保驰 史晨辉 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第6期895-897,共3页

目的:探讨基质金属蛋白酶-3(MMP-3)在骨性关节炎(OA)患者不同病变程度滑膜中的表达及意义。方法:应用免疫组化检测MMP-3蛋白在90例关节炎组[关节炎组,又依据Kellgren和LawrenceX线诊断标准分为:Ⅰ级为第一亚组(轻度病变组,30例),Ⅱ、Ⅲ... 目的:探讨基质金属蛋白酶-3(MMP-3)在骨性关节炎(OA)患者不同病变程度滑膜中的表达及意义。方法:应用免疫组化检测MMP-3蛋白在90例关节炎组[关节炎组,又依据Kellgren和LawrenceX线诊断标准分为:Ⅰ级为第一亚组(轻度病变组,30例),Ⅱ、Ⅲ级为第二亚组(中度病变组,30例),Ⅳ级为第三亚组(重度病变组,30例)]与30例对照组患者滑膜组织中的表达情况。结果:MMP-3在所有滑膜组织中都能检测到。与对照组比较,MMP-3在关节炎组中的含量上升(P<0.05)。重度病变组MMP-3的表达水平与轻度病变组、中度病变组比较,差异有统计学意义(P<0.05);OA的严重程度与MMP-3的表达水平呈正相关(r=0.912,P<0.05)。结论:MMP-3蛋白与OA的致病机制密切相关,可能作为OA早期诊断和病情活动性的一项重要指标。 展开更多

关键词 骨性关节炎 基质金属蛋白酶-3 免疫组化

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社区老年女性不同风险程度骨质疏松性骨折相关知识调查分析 被引量：11

4

作者 何斌 张苇 +1 位作者 陆宁 王玉环 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期71-77,共7页

目的了解社区不同风险程度骨质疏松性骨折老年女性相关知识的知晓情况,为下一步制定该人群干预提供科学依据。方法采用调查问卷,以分层抽样方法,对社区225名60岁及以上的女性进行入户一对一问卷调查。结果高风险骨质疏松性骨折老年女性... 目的了解社区不同风险程度骨质疏松性骨折老年女性相关知识的知晓情况,为下一步制定该人群干预提供科学依据。方法采用调查问卷,以分层抽样方法,对社区225名60岁及以上的女性进行入户一对一问卷调查。结果高风险骨质疏松性骨折老年女性知识平均得分为16.40±9.19分,得分率为31.5%,得分32分及以上者6人,及格率仅为5.3%;低风险骨质疏松性骨折老年女性知识平均得分为16.60±9.51分,得分率为31.9%,得分32分及以上者8人,及格率为7.2%。多元线性逐步回归分析,文化程度及年龄是影响高、低风险骨质疏松性骨折老年女性相关知识的主要因素。结论重点加强教育程度低的老年女性及高龄女性骨质疏松相关知识健康教育力度。 展开更多

关键词 社区老年女性 不同风险程度骨质疏松性骨折 知识

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miR-27a、miR-146a在骨性关节炎患者滑膜组织中的表达及临床意义 被引量：6

5

作者 何仁豪 王维山 +2 位作者 董金波 张杰 史晨辉 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第9期1416-1419,共4页

目的:检测骨性关节炎(OA)患者与非OA患者滑膜中miR-146a和miR-27a的表达情况,并探讨其与该疾病的相关性。方法:应用实时荧光定量聚合酶链反应检测46例滑膜组织(OA患者23例,非OA患者23例)中miR-27a和miR-146a的相对表达量。结果:miR-27a... 目的:检测骨性关节炎(OA)患者与非OA患者滑膜中miR-146a和miR-27a的表达情况,并探讨其与该疾病的相关性。方法:应用实时荧光定量聚合酶链反应检测46例滑膜组织(OA患者23例,非OA患者23例)中miR-27a和miR-146a的相对表达量。结果:miR-27a和miR-146a在所有的滑膜组织中均能检测到,根据qRT-PC原理,ΔCt值越高其目的基因在相应组织中的表达水平越低,即OA患者滑膜组织的miR-27a和miR-146a的表达水平较对照组呈低表达趋势(P<0.05)。结论:miR-27a和miR-146a的差异性表达与OA滑膜病理变化有关,可能调控uPA的表达促进OA的发展。 展开更多

关键词 骨性关节炎 滑膜 miRNA-27a miRNA-146a

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局部注射Neuritin促进骨折愈合的实验研究 被引量：3

6

作者 刘京敏 史晨辉 +4 位作者 王维山 孙益明 彭方亮 张杰 董金波 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2012年第6期720-724,共5页

为了观察Neuritin在SD大鼠骨折模型中促进骨折愈合的作用。将96只健康雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组,实验组72只,对照组24只。各组动物取右侧股骨,切断中段股骨后行克氏针髓内固定术制作骨折模型。对照组不予特殊处理。实验组根据... 为了观察Neuritin在SD大鼠骨折模型中促进骨折愈合的作用。将96只健康雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组,实验组72只,对照组24只。各组动物取右侧股骨,切断中段股骨后行克氏针髓内固定术制作骨折模型。对照组不予特殊处理。实验组根据用药剂量实验组分为A、B、C 3组,各组分别每日给予Neuritin 0.1、0.05、0.025μm/L局部注射治疗,并分别于用药后1、2、4周处死,通过拍摄X线片、测量骨痂体积、做病理切片进行相关分析。结果显示:(1)大体标本观察及X线拍片显示:实验组各组与同期对照组比较,骨折愈合骨化速度明显增快,与对照组之间差异明显(P<0.05);而A组显著快于C组大鼠(P<0.05)。(2)骨痂体积测量结果显示:同期实验组与对照组比较骨痂体积明显增大,均明显大于对照组(P<0.05);实验各组之间,A组明显大于C组大鼠(P<0.05)。(3)病理切片HE染色显示:实验各组在相同时间点内其软骨细胞、成骨细胞明显多于对照组(P<0.05)。由此可知,局部注射Neuritin后可使动物骨折模型的骨痂含量增加,骨痂骨化速度增快。 展开更多

关键词 NEURITIN 骨折动物模型 骨折愈合 局部注射

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尿激酶型纤溶酶原激活物对关节软骨蛋白多糖的影响 被引量：1

7

作者 何斌 史晨辉 +2 位作者 王永明 孙建华 石辉 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2005年第4期442-445,共4页

观察尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator,uPA)对关节软骨基质中蛋白多糖的影响。实验选择健康新西兰大白兔42只并随机分为实验组和对照组,实验组24只,对照组18只;实验组在右膝关节内注射uPA 0.4μg/0.2mL,对... 观察尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator,uPA)对关节软骨基质中蛋白多糖的影响。实验选择健康新西兰大白兔42只并随机分为实验组和对照组,实验组24只,对照组18只;实验组在右膝关节内注射uPA 0.4μg/0.2mL,对照组注射等容量的生理盐水,注射后在4周、8周、12周分批处死取兔软骨提取测定葡糖氨基聚糖(glycosaminoglycan,GAG)含量。结果显示,在不同时期,GAG的总含量均减少,这些改变随时间的延长而渐不明显。由此可知,尿激酶型纤溶酶原激活物能降解关节软骨蛋白多糖,进而导致关节软骨的破坏。 展开更多

关键词 尿激酶型纤溶酶原激活物 关节软骨 蛋白多糖 尿激酶型纤溶酶原激活物 关节软骨 蛋白多糖 软骨基质 生理盐水 大白兔 实验 对照 新西兰

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神经突蛋白与骨折愈合

8

作者 刘京敏 董金波 《医药导报》 CAS 北大核心 2013年第3期339-341,共3页

骨折愈合的机制十分复杂,各种细胞因子对骨组织的作用也是多方面、多层次和相互交叉的。神经突蛋白可能在骨折愈合过程中起重要作用,其相关性的研究还处于起步阶段,还需要通过更多实验进一步探究。

关键词 神经突蛋白 骨折愈合

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MMP-3、MMP-13在骨性关节炎患者滑膜中的表达及意义 被引量：25

9

作者 李保驰 王维山 +3 位作者 董金波 张杰 霍红军 史晨辉 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期593-596,697,共5页

目的探讨MMP-3、MMP-13在骨性关节炎患者滑膜中的表达及相关性。方法应用免疫组化和Western blotting法检测MMP-3、MMP-13蛋白在30例骨性关节炎(OA,实验组)与30例非OA(对照组)患者滑膜组织中的表达情况。结果免疫组化结果表明MMP-3、MMP... 目的探讨MMP-3、MMP-13在骨性关节炎患者滑膜中的表达及相关性。方法应用免疫组化和Western blotting法检测MMP-3、MMP-13蛋白在30例骨性关节炎(OA,实验组)与30例非OA(对照组)患者滑膜组织中的表达情况。结果免疫组化结果表明MMP-3、MMP-13蛋白在实验组与对照组患者滑膜中的表达有显著性差异(P<0.01),且阳性表达多定位于滑膜细胞的胞浆;Western blotting分析结果显示MMP-3、MMP-13蛋白在实验组患者滑膜中表达明显高于对照组患者,且二者在OA组中表达呈正相关性。结论 MMP-3、MMP-13蛋白与骨性关节炎发生发展密切相关,可能作为诊断及判断骨性关节炎的一项重要指标。 展开更多

关键词 骨性关节炎 基质金属蛋白酶-3-13 免疫组化 MMP-3-13

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在活细胞中应用FRET技术研究TGFβ/TβRI信号传导 被引量：2

10

作者 刘伟 曹薇薇 +2 位作者 何建伟 史晨辉 王维山 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期757-762,共6页

转移生长因子β(TGFβ)信号传导通路参与调节细胞的增殖、分化、凋亡、细胞迁移等一系列细胞过程,与骨代谢疾病的发病机制密切相关.本研究根据荧光共振能量转移(FRET)技术原理,构建包含CFP-TβRI-YFP融合蛋白的TβRI生物传感器,转染293... 转移生长因子β(TGFβ)信号传导通路参与调节细胞的增殖、分化、凋亡、细胞迁移等一系列细胞过程,与骨代谢疾病的发病机制密切相关.本研究根据荧光共振能量转移(FRET)技术原理,构建包含CFP-TβRI-YFP融合蛋白的TβRI生物传感器,转染293T细胞,观察转染效率.以TGFβ1为诱导剂,激活TGFβ/TβRI信号传导通路,在活细胞生理条件下,动态监测TβRI生物传感器的FRET效应.结果表明,成功构建了TβRI生物传感器,转染细胞效率达50%,在TGFβ1诱导刺激6min后,FRET效率增加并达到最大值,该过程经历9 min后,随时间的延长,FRET效率下降.研究结果表明:在活细胞生理条件下,TGFβ1/TβRI信号转导过程存在一定的时间特异性. 展开更多

关键词 转移生长因子Β TΒRI 生物传感器 荧光共振能量转移 活细胞

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显微内镜椎间盘切除术治疗腰椎间盘突出症104例 被引量：2

11

作者 史晨辉 王永明 +2 位作者 董金波 刘维钢 郁凯 《中国微创外科杂志》 CSCD 2006年第3期213-215,共3页

目的总结104例显微内镜椎间盘切除术（microendoscopic discectomy，MED）手术常见问题的处理经验。方法应用美国枢法模公司椎间盘镜手术系统，对104例椎问盘突出症行MED，总结术中常见问题。结果104例中因出血及粘连改开放手术4例，余... 目的总结104例显微内镜椎间盘切除术（microendoscopic discectomy，MED）手术常见问题的处理经验。方法应用美国枢法模公司椎间盘镜手术系统，对104例椎问盘突出症行MED，总结术中常见问题。结果104例中因出血及粘连改开放手术4例，余100例术中发生硬膜损伤3例，其中1例发生脑脊液漏。100例115个间隙平均每间隙手术时间50min（30～90min），术中出血量平均每间隙80ml（20—400m1）。100例随访3—32个月，平均18个月，疗效按Macnab标准，优65例，良29例，可6例，优良率94．0％（94／100）。结论术中最常见问题为出血及黄韧带切除费时，熟悉黄韧带薄弱部位及切除技巧，了解椎静脉解剖特点及其与腹压的关系，对预防和处理MED术中常见问题，减少硬膜囊及神经根损伤，减少出血对手术时间及疗效的影响至关重要。 展开更多

关键词 腰椎间盘突出症 显微内镜 椎间盘切除术 出血 脑脊液漏

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使用VSD治疗的开放外伤患者血清中炎症因子水平变化及相关性研究 被引量：3

12

作者 陈磊 王维山 +2 位作者 阮智 董金波 史晨辉 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2014年第2期208-212,共5页

为探讨开放外伤患者在使用VSD治疗后，血清中炎症因子：肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）、白介素-8（IL-8）、白介素-10（IL-10）的变化及影响。采用随机选取2013年1月-2013年10月在我院骨科住院的开放外伤患者，60例使用VS... 为探讨开放外伤患者在使用VSD治疗后，血清中炎症因子：肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）、白介素-8（IL-8）、白介素-10（IL-10）的变化及影响。采用随机选取2013年1月-2013年10月在我院骨科住院的开放外伤患者，60例使用VSD治疗的患者为研究组，50例常规换药治疗的患者作为对照组。分别于第一次治疗后第0.5、1、2、3、5、7天采集外周静脉血,用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清中TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10的含量并对照研究。结果显示，治疗前研究组和对照组静脉血TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10含量无显著性差异（P〉0.05）；治疗后两组TNF-α、IL-6、IL-8、IL -10含量均开始升高。治疗后12h开始，研究组的外周静脉血TNF-α含量较对照组明显降低，且具有统计学差异（P〈0.05）；治疗后1 d开始，研究组患者的外周静脉血IL-6、IL-8、IL-10含量较对照组均明显降低，具有统计学差异（P〈0.05）。由此可知，开放外伤患者使用VSD技术治疗后，可以在很大程度上早期清除创面局部的炎症因子，从而降低激发的炎症放大效应，避免了炎症反应失控和病情恶化，有利于创面的恢复。 展开更多

关键词 VSD 开放外伤 炎症因子

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金属蛋白酶-1和组织金属蛋白酶抑制因子-1在膝关节病理性滑膜皱襞中的表达及意义 被引量：2

13

作者 李宽新 史晨辉 +4 位作者 王永明 董金波 刘维钢 李茂强 王维山 《中国微创外科杂志》 CSCD 2006年第8期621-623,共3页

目的探讨病理性滑膜皱襞发病机制中对软骨破坏有基质金属蛋白酶的参与。方法关节镜检查确诊为病理性滑膜皱襞和正常滑膜皱襞,分别进行免疫组化染色,观察金属蛋白酶-1(MMP-1)和组织金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的表达及分布。结果MMP-1... 目的探讨病理性滑膜皱襞发病机制中对软骨破坏有基质金属蛋白酶的参与。方法关节镜检查确诊为病理性滑膜皱襞和正常滑膜皱襞,分别进行免疫组化染色,观察金属蛋白酶-1(MMP-1)和组织金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的表达及分布。结果MMP-1、TIMP-1在病理性滑膜皱襞和正常皱襞内的阳性表达,差异具有显著性(2χ=16.014,P=0.000;2χ=4.059,P=0.044)。MMP-1在滑膜衬里层细胞、单核和淋巴细胞、血管内皮细胞和化生的软骨细胞呈阳性表达,而在正常滑膜皱襞组织中不表达。TIMP-1只在滑膜衬里层细胞和少量的成纤维细胞有表达,而MMP-1免疫组化显示阳性细胞数和着色强度强于TIMP-1。结论病理性滑膜皱襞可产生MMP-1、TIMP-1,而且两者分布不平衡,可能是导致软骨破坏的生物学因素。 展开更多

关键词 基质金属蛋白酶-1 滑膜皱襞 膝关节

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等离子刀行颈椎间盘髓核成形术安全性的实验观察 被引量：2

14

作者 康波 李宽新 史晨辉 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期130-133,I0002,共5页

目的:观察等离子刀在不同能量档位、相同消融时间行颈椎间盘髓核成形术(coblation nucleoplasty,CN)时的效能及安全性。方法:7具18月龄新鲜宰杀羊颈椎标本(包括周围肌肉及组织),每具含6个颈椎间盘,将其中40个椎间盘随机分为3个实验组和... 目的:观察等离子刀在不同能量档位、相同消融时间行颈椎间盘髓核成形术(coblation nucleoplasty,CN)时的效能及安全性。方法:7具18月龄新鲜宰杀羊颈椎标本(包括周围肌肉及组织),每具含6个颈椎间盘,将其中40个椎间盘随机分为3个实验组和1个对照组,每组10个间盘。实验组分别用80W(1档,A组)、100W(2档,B组)、120W(3档,C组)行CN,消融时间相同;对照组模拟手术操作,不行消融。术中测量椎间盘前缘、后缘、椎间孔处温度,术后测量CN在椎间盘中形成的消融腔截面积大小,并取对应节段双侧脊神经节用免疫组化S-P法测定热休克蛋白70(Heat shock Protein70,HSP70)的表达。结果:术中各组椎体前缘、后缘、椎间孔处的温度无显著性差异,取三个测量点温度平均值,对照组、A组、B组、C组的温度分别为20.60℃±0.22℃、28.69℃±0.39℃、35.47℃±0.51℃、41.73℃±0.31℃,各组间比较有统计学意义;对照组穿刺形成的穿刺腔截面积为2.01±0.00mm2,A、B、C组消融腔截面积分别为3.00±0.45mm2、9.447±1.27mm2、27.36±2.00mm2,A组与对照组比较无显著性差异(P>0.05),B组与A组和对照组比较有显著性差异(P<0.05),C组与其余三组比较均有显著性差异(P<0.05)。温度和消融腔截面积与能量成正相关(温度与能量r=0.97,消融腔与能量r=0.96,P<0.05)。C组免疫组化染色HSP70阳性表达,阳性率为95%(19/20),对照组和A、B组HSP70表达阴性。讨论:相同消融时间下等离子刀髓核成形术的效能、邻近组织的温度与能量成正相关,周围组织热损伤与能量的选择密切相关,相比较而言选择100W能量(2档)行CN手术效果和安全性都较为可靠。 展开更多

关键词 颈椎间盘 等离子刀髓核成形术 热休克蛋白

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伦理学视野中的护理审美 被引量：2

15

作者 刘丽 李玲 《护理学杂志》 2008年第10期79-80,共2页

阐述护理道德与护理审美的关系及两者的逻辑趋向,即关怀照顾的超越通向护理审美,护理道德人格走向护理审美人格。提出为提高护士道德修养及审美情趣,有必要在护理教育中将护理道德教育与护理审美教育相结合。

关键词 护理道德 护理审美 关怀照顾 道德人格 审美人格

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颈椎等离子刀髓核成形术量效及安全性研究 被引量：1

16

作者 康波 史晨辉 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第22期3778-3780,共3页

目的:探讨颈椎间盘等离子刀髓核成形术(coblation nucleoplasty,CN)量效及安全性。方法:分别通过相同时间不同能量等离子刀行羊颈椎间盘CN,观察记录CN在椎间盘形成的效能腔、椎间盘周围温度变化并取CN间盘节段双侧神经节观察热休克蛋白7... 目的:探讨颈椎间盘等离子刀髓核成形术(coblation nucleoplasty,CN)量效及安全性。方法:分别通过相同时间不同能量等离子刀行羊颈椎间盘CN,观察记录CN在椎间盘形成的效能腔、椎间盘周围温度变化并取CN间盘节段双侧神经节观察热休克蛋白70的表达,对数据进行统计学分析。结果:三实验组手术效能腔与对照组穿刺腔比较有统计学意义,其中3、2档组与对照组比较有显著差异(P<0.05);三实验组温度与对照组比较有显著差异(P<0.05);三种能量手术时,2档温度在安全范围内,3档形成的有效效能腔最大,3档HSP70免疫组化染色阳性表达,1、2档无表达。CN效能腔、温度与能量成正相关。结论:等离子刀髓核成形术的量效、温度变化与能量成正相关,临床使用2档行颈椎间盘CN较为安全。 展开更多

关键词 椎间盘移位 等离子刀髓核成形术 热休克蛋白

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基于FRET技术的TβRI生物传感器载体的构建 被引量：2

17

作者 陈召 刘伟 +3 位作者 王维山 曹薇薇 何建伟 史晨辉 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2012年第4期488-492,共5页

根据已发表的人类TβRI(Type I TGFβreceptor)基因序列设计2对引物,利用PCR扩增得到了1个长度为1512bp的TβRI基因全长序列。序列分析结果表明与数据库公布的人类序列(Genebank登录号:NM_004612)一致。通过基因工程的方法,构建含有ECF... 根据已发表的人类TβRI(Type I TGFβreceptor)基因序列设计2对引物,利用PCR扩增得到了1个长度为1512bp的TβRI基因全长序列。序列分析结果表明与数据库公布的人类序列(Genebank登录号:NM_004612)一致。通过基因工程的方法,构建含有ECFP-TβRI-YFP融合蛋白的真核表达TβRI生物传感器载体。该载体转染293T细胞后能够稳定高效表达。结果表明构建的TβRI生物传感器载体能用于TGFβ信号通路中的功能研究。 展开更多

关键词 TΒRI 生物传感器 构建 骨性关节炎

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尿激酶型纤溶酶原激活物生物传感器的构建及鉴定

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作者 崔钢华 饶烽 +4 位作者 王琰 曹薇薇 刘伟 王维山 史晨辉 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1124-1129,I0012,共7页

目的:构建含有增强型青色荧光蛋白-尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)作用底物(substrate)-黄色荧光蛋白变体(YPet)融合蛋白的真核表达载体(ECFP-uPA substrate-linker-YPet),即uPA的生物传感器。方法:以Src-biosensor为模板,Primer Premier ... 目的:构建含有增强型青色荧光蛋白-尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)作用底物(substrate)-黄色荧光蛋白变体(YPet)融合蛋白的真核表达载体(ECFP-uPA substrate-linker-YPet),即uPA的生物传感器。方法:以Src-biosensor为模板,Primer Premier 5.0软件设计YPet引物,设计时5′端引入uPA底物序列及Linker,两端连接酶切位点及保护碱基。以pMDTM-18T为中间载体,通过基因工程方法构建含有ECFP-uPA substrate-linker-YPet的真核表达载体。然后转染293T细胞,24h后观察转染效率和融合蛋白表达情况,在荧光显微镜下,应用MetaFlour FRET 4.6软件观察并测量uPA生物传感器荧光共振能量转移(FRET)。结果:经过PCR和双酶切鉴定,克隆片段和酶切片段均与uPA substrate分子大小相符。细胞转染后转染效率达40%。免疫荧光检测,uPA生物传感器在293T细胞膜表达,用重组人uPA(rhuPA)刺激转染细胞可以检测到FRET现象。结论:成功构建uPA生物传感器,该生物传感器能够作为活细胞分子探针用于研究uPA的时空变化。 展开更多

关键词 尿激酶型纤溶酶原激活物 生物传感器 荧光共振能量转移 骨性关节炎

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