目的借助生物信息学分析和临床样本检测,探究人血浆白细胞分化抗原(CD8)、程序性死亡受体-1(programmed cell death protein-1,PD-1)、细胞程序性死亡配体-1(programmed cell death ligand-1,PD-L1)、转化生长因子-β_(1)(transforming ...目的借助生物信息学分析和临床样本检测,探究人血浆白细胞分化抗原(CD8)、程序性死亡受体-1(programmed cell death protein-1,PD-1)、细胞程序性死亡配体-1(programmed cell death ligand-1,PD-L1)、转化生长因子-β_(1)(transforming growth factor-β_(1),TGF-β_(1))和膜型基质金属蛋白酶-1(membrane type 1 matrix metalloproteinase, MT1-MMP,又名MMP-14)与冠心病发病过程及冠状动脉狭窄程度的相关性,为冠心病的早期筛查及预测提供新的思路。方法通过生物信息学分析,对CD8、PD-1、PD-L1、TGF-β_(1)、MMP-14进行GO和KEGG通路富集分析,并构建各分子间PPI网络图。选取39例冠心病患者作为研究对象,根据Gensini评分系统将其冠状动脉狭窄程度分为轻、中、重3组,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组CD8、PD-1、PD-L1、TGF-β_(1)、MMP-14血浆含量,并分析各分子血浆含量与患者Gensini评分的相关性,评估其对冠心病发病的预测价值。结果 GO和KEGG通路富集分析显示CD8、PD-1、PD-L1、TGF-β_(1)、MMP-14可作用于冠心病及其炎症反应通路,PPI网络分析显示各分子间具有一定相互作用关系。PD-L1血浆含量与Gensini评分呈显著正相关。CD8、PD-1、TGF-β_(1)、MMP-14与Gensini评分线性关系不显著,但是从趋势上看PD-1及MMP-14血浆含量与Gensini评分存在正相关趋势,CD8及TGF-β_(1)与Gensini评分存在负相关趋势。结论 CD8、PD-1、PD-L1、TGF-β_(1)、MMP-14可联合作用于冠心病的发生发展过程,各分子血浆含量与冠状动脉狭窄程度存在一定程度相关,可能作为冠状动脉狭窄程度的预测指标。展开更多
目的探讨脾脏组织CD20^+细胞的含量和心肌高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)与小鼠心肌缺血的相关性。方法 50只成年雄性C57BL/6小鼠,随机分为正常组(NC组)、正常+抗HMGB1抗体组(NC+抗HMGB1抗体组)、心肌缺血组(M...目的探讨脾脏组织CD20^+细胞的含量和心肌高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)与小鼠心肌缺血的相关性。方法 50只成年雄性C57BL/6小鼠,随机分为正常组(NC组)、正常+抗HMGB1抗体组(NC+抗HMGB1抗体组)、心肌缺血组(MI组)、心肌缺血+IgG抗体组(MI+IgG抗体组)、心肌缺血+抗HMGB1抗体组(MI+抗HMGB1抗体组),每组各10只。采用腹腔注射高剂量异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)法,建立小鼠急性心肌缺血模型。于第7天腹腔注射ISO 12h后,分别予以IgG抗体、抗HMGB1抗体腹腔注射。心脏超声检测小鼠心功能;苏木精-伊红染色、天狼星红染色观察心肌组织病理学变化;免疫组化测定心肌HMGB1表达;原位末端标记法检测心肌细胞凋亡指数;流式细胞术检测各组小鼠脾脏组织中CD20^+细胞含量。结果与NC组相比,MI组心肌组织明显损伤、纤维化加重,凋亡指数升高,射血分数和左室短轴缩短率降低,脾脏组织中CD20^+细胞含量升高(均P<0.05);与MI组相比,MI+IgG抗体组心肌组织损伤减轻不明显、纤维化无减少,凋亡指数、射血分数和左室短轴缩短率、脾脏组织中CD20^+细胞含量等均无明显变化(均P>0.05);与MI组相比,MI+抗HMGB1抗体组心肌组织损伤减轻、纤维化减少,射血分数和左室短轴缩短率升高,凋亡指数、脾脏组织中CD20^+细胞含量均降低(均P<0.05)。结论 CD20^+细胞含量的变化在心肌缺血的发展中起着重要作用,抗HMGB1抗体对心肌缺血具有保护作用,其保护机制可能与抗HMGB1抗体抑制了CD20^+细胞活化,减轻心肌缺血过程中的免疫反应有关。展开更多
文摘目的探讨脾脏组织CD20^+细胞的含量和心肌高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)与小鼠心肌缺血的相关性。方法 50只成年雄性C57BL/6小鼠,随机分为正常组(NC组)、正常+抗HMGB1抗体组(NC+抗HMGB1抗体组)、心肌缺血组(MI组)、心肌缺血+IgG抗体组(MI+IgG抗体组)、心肌缺血+抗HMGB1抗体组(MI+抗HMGB1抗体组),每组各10只。采用腹腔注射高剂量异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)法,建立小鼠急性心肌缺血模型。于第7天腹腔注射ISO 12h后,分别予以IgG抗体、抗HMGB1抗体腹腔注射。心脏超声检测小鼠心功能;苏木精-伊红染色、天狼星红染色观察心肌组织病理学变化;免疫组化测定心肌HMGB1表达;原位末端标记法检测心肌细胞凋亡指数;流式细胞术检测各组小鼠脾脏组织中CD20^+细胞含量。结果与NC组相比,MI组心肌组织明显损伤、纤维化加重,凋亡指数升高,射血分数和左室短轴缩短率降低,脾脏组织中CD20^+细胞含量升高(均P<0.05);与MI组相比,MI+IgG抗体组心肌组织损伤减轻不明显、纤维化无减少,凋亡指数、射血分数和左室短轴缩短率、脾脏组织中CD20^+细胞含量等均无明显变化(均P>0.05);与MI组相比,MI+抗HMGB1抗体组心肌组织损伤减轻、纤维化减少,射血分数和左室短轴缩短率升高,凋亡指数、脾脏组织中CD20^+细胞含量均降低(均P<0.05)。结论 CD20^+细胞含量的变化在心肌缺血的发展中起着重要作用,抗HMGB1抗体对心肌缺血具有保护作用,其保护机制可能与抗HMGB1抗体抑制了CD20^+细胞活化,减轻心肌缺血过程中的免疫反应有关。
文摘目的研究氯化钴(CoCl_2)诱导的低氧条件下,脂连蛋白(APN)对RAW264. 7巨噬细胞凋亡的保护作用及其机制。方法巨噬细胞分为CoCl_2处理组和APN预处理组,前者给予100μmol/L CoCl_2,后者先用(0. 5、1、2)μg/m L APN预处理2 h,再给予100μmol/L的CoCl_2处理。CCK-8法检测各组细胞活力;免疫荧光法观察细胞胱天蛋白酶3(caspase-3)的分布及CoCl_2和APN对其表达的影响;流式细胞术检测各组细胞的凋亡比例;分光光度计法检测各组细胞内超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量; Western blot法检测各组细胞B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、BAX、裂解型caspase-3(c-caspase-3)及低氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白水平。结果与CoCl_2组相比,APN预处理能提高细胞活力,减少细胞凋亡并升高SOD含量、降低MDA含量;Caspase-3主要分布在细胞膜上,与CoCl_2组相比,APN预处理能上调Bcl2的表达,下调BAX、c-caspase-3及HIF-1α的表达。结论 APN可减少CoCl_2诱导的巨噬细胞凋亡,可能是通过增强细胞内抗氧化活性,以及上调Bcl2、下调BAX、c-caspase-3及HIF-1α的表达来实现的。
