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缝隙连接阻断剂18α-甘草次酸对大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用
被引量：
4
1
作者
吴玲玲
钟华
+3 位作者
王恩帮
唐娜
李佳蔚
何芳
《石河子大学学报（自然科学版）》
CAS
2013年第5期607-611,共5页
为探讨缝隙连接是否参与抑制大鼠血管平滑肌细胞的增殖及可能的分子机制,本研究以原代及传代培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞为模型,实验分2组:对照组、缝隙连接阻断剂18α-甘草次酸(18α-Glycyrrhetinic acid,18α-GA)组。MTT法及流式细胞...
为探讨缝隙连接是否参与抑制大鼠血管平滑肌细胞的增殖及可能的分子机制,本研究以原代及传代培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞为模型,实验分2组:对照组、缝隙连接阻断剂18α-甘草次酸(18α-Glycyrrhetinic acid,18α-GA)组。MTT法及流式细胞术检测细胞的增殖活性,染料示踪分子传递法(划痕标记染料传输法)检测细胞的缝隙连接功能,Western blotting法检测细胞中缝隙连接蛋白40(Cx40)和43(Cx43)表达。结果显示:(1)与对照组相比,18α-GA组MTT法测得的A570值及细胞周期S期比例均降低(P<0.01),细胞增殖活性减弱;(2)与对照组相比,18α-GA组罗氏黄荧光染料传递百分数显著降低,缝隙连接功能明显减弱(P<0.01);(3)与对照组相比,18α-GA组Cx40和总Cx43蛋白表达无显著差异(P>0.05),磷酸化Cx43与非磷酸化Cx43的比值显著降低(P<0.01)。由此可知,18α-GA可能主要通过下调血管平滑肌细胞磷酸化Cx43蛋白表达,引起缝隙连接通讯功能减弱,从而抑制了血管平滑肌细胞的增殖。
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关键词
缝隙连接
增殖
血管平滑肌细胞
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职称材料
人脐静脉内皮细胞中C-型瞬时型感受器电位通道3RNA干扰质粒构建及筛选
2
作者
王静
钟华
+5 位作者
吴玲玲
赵慧
王腊梅
孙志萍
庞丽娟
何芳
《石河子大学学报（自然科学版）》
CAS
2013年第4期463-467,共5页
为了探讨C-型瞬时型感受器电位通道3(TRPC3)在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的作用,本实验针对GenBank中人TRPC3的cDNA序列设计合成短发卡RNA(shRNA),将其转染到HUVEC中,在激光共聚焦显微镜下观察细胞的转染效率,实时定量PCR和免疫印记检测...
为了探讨C-型瞬时型感受器电位通道3(TRPC3)在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的作用,本实验针对GenBank中人TRPC3的cDNA序列设计合成短发卡RNA(shRNA),将其转染到HUVEC中,在激光共聚焦显微镜下观察细胞的转染效率,实时定量PCR和免疫印记检测TRPC3mRNA和蛋白表达及转染后的干扰效率。结果显示:(1)激光共聚焦显微镜下观察到绿色荧光,说明已成功将shTRPC3转入到HUVEC中;(2)转染48h后用G418进行稳定筛选后,TRPC3mRNA和蛋白表达均降低(P<0.05),干扰效率分别为71%和74%。由此可知,在HUVEC中成功构建了TRPC3干扰质粒。
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关键词
内皮细胞
瞬时型感受器电位通道
SHRNA
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职称材料
题名
缝隙连接阻断剂18α-甘草次酸对大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用
被引量：
4
1
作者
吴玲玲
钟华
王恩帮
唐娜
李佳蔚
何芳
机构
石河子大学医学院病理生理教研室/新疆地方病与民族高发病教育部重点实验室
出处
《石河子大学学报（自然科学版）》
CAS
2013年第5期607-611,共5页
基金
石河子大学科学技术研究发展计划"自然科学与技术创新"重点项目(ZRKX2009ZD03-1)
文摘
为探讨缝隙连接是否参与抑制大鼠血管平滑肌细胞的增殖及可能的分子机制,本研究以原代及传代培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞为模型,实验分2组:对照组、缝隙连接阻断剂18α-甘草次酸(18α-Glycyrrhetinic acid,18α-GA)组。MTT法及流式细胞术检测细胞的增殖活性,染料示踪分子传递法(划痕标记染料传输法)检测细胞的缝隙连接功能,Western blotting法检测细胞中缝隙连接蛋白40(Cx40)和43(Cx43)表达。结果显示:(1)与对照组相比,18α-GA组MTT法测得的A570值及细胞周期S期比例均降低(P<0.01),细胞增殖活性减弱;(2)与对照组相比,18α-GA组罗氏黄荧光染料传递百分数显著降低,缝隙连接功能明显减弱(P<0.01);(3)与对照组相比,18α-GA组Cx40和总Cx43蛋白表达无显著差异(P>0.05),磷酸化Cx43与非磷酸化Cx43的比值显著降低(P<0.01)。由此可知,18α-GA可能主要通过下调血管平滑肌细胞磷酸化Cx43蛋白表达,引起缝隙连接通讯功能减弱,从而抑制了血管平滑肌细胞的增殖。
关键词
缝隙连接
增殖
血管平滑肌细胞
Keywords
gap junction
proliferation
vascular smooth muscle cells
分类号
R743.34 [医药卫生—神经病学与精神病学]
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职称材料
题名
人脐静脉内皮细胞中C-型瞬时型感受器电位通道3RNA干扰质粒构建及筛选
2
作者
王静
钟华
吴玲玲
赵慧
王腊梅
孙志萍
庞丽娟
何芳
机构
石河子大学医学院病理生理教研室/新疆地方病与民族高发病教育部重点实验室
石河子大学
医学院
医学
机能
实验
中心
石河子大学
医学院
病理
系
出处
《石河子大学学报（自然科学版）》
CAS
2013年第4期463-467,共5页
基金
国家自然科学基金项目(31160239
81160018)
文摘
为了探讨C-型瞬时型感受器电位通道3(TRPC3)在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的作用,本实验针对GenBank中人TRPC3的cDNA序列设计合成短发卡RNA(shRNA),将其转染到HUVEC中,在激光共聚焦显微镜下观察细胞的转染效率,实时定量PCR和免疫印记检测TRPC3mRNA和蛋白表达及转染后的干扰效率。结果显示:(1)激光共聚焦显微镜下观察到绿色荧光,说明已成功将shTRPC3转入到HUVEC中;(2)转染48h后用G418进行稳定筛选后,TRPC3mRNA和蛋白表达均降低(P<0.05),干扰效率分别为71%和74%。由此可知,在HUVEC中成功构建了TRPC3干扰质粒。
关键词
内皮细胞
瞬时型感受器电位通道
SHRNA
Keywords
endothelial cells
Transient Receptor Potential Canonical-3
shRNA
分类号
R692.9 [医药卫生—泌尿科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
缝隙连接阻断剂18α-甘草次酸对大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用
吴玲玲
钟华
王恩帮
唐娜
李佳蔚
何芳
《石河子大学学报（自然科学版）》
CAS
2013
4
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职称材料
2
人脐静脉内皮细胞中C-型瞬时型感受器电位通道3RNA干扰质粒构建及筛选
王静
钟华
吴玲玲
赵慧
王腊梅
孙志萍
庞丽娟
何芳
《石河子大学学报（自然科学版）》
CAS
2013
0
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