牛磺酸对家兔油酸肺损伤的防治作用 被引量：6

1

作者 何芳 邓峰美 +3 位作者 李悦山 胡晓兰 王雪雯 张万江 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第7期666-668,共3页

目的：观察肺损伤家兔血浆丙二醛（ＭＤＡ）含量、红细胞超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性变化以及牛磺酸的影响作用。方法：实验用油酸复制肺损伤模型。结果：（１）家兔注射油酸后１５ｍｉｎ时血浆ＭＤＡ含量显著增加（Ｐ＜００１），... 目的：观察肺损伤家兔血浆丙二醛（ＭＤＡ）含量、红细胞超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性变化以及牛磺酸的影响作用。方法：实验用油酸复制肺损伤模型。结果：（１）家兔注射油酸后１５ｍｉｎ时血浆ＭＤＡ含量显著增加（Ｐ＜００１），而红细胞ＳＯＤ活性显著下降（Ｐ＜００１）。（２）牛磺酸可减轻上述变化。结论：提示牛磺酸对于急性肺损伤可能具有一定防治作用，其机制可能与抗自由基有关。 展开更多

关键词 牛磺酸 油酸类 呼吸窘迫综合征 家兔

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Orai3参与了HUVECs外钙敏感受体介导的钙内流和NO生成 被引量：9

2

作者 王腊梅 钟华 +4 位作者 赵慧 王静 庞丽娟 孙志萍 何芳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期1-10,共10页

目的:研究Ca2+通道蛋白Orai3在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)外钙敏感受体(CaR)介导的钙内流和一氧化氮(NO)生成中的作用和机制。方法:(1)利用转染技术将构建的Orai3干扰质粒(Orai3 shRNA)转染HUVECs,采用激光共聚焦显微镜观察细胞转染效果... 目的:研究Ca2+通道蛋白Orai3在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)外钙敏感受体(CaR)介导的钙内流和一氧化氮(NO)生成中的作用和机制。方法:(1)利用转染技术将构建的Orai3干扰质粒(Orai3 shRNA)转染HUVECs,采用激光共聚焦显微镜观察细胞转染效果,实时定量RT-PCR和Western blotting检测Orai3 shRNA转染后Orai3 mRNA和蛋白的表达以及抑制效率。(2)取第2~5代细胞随机分组:特异性质粒转染组即实验组(Orai3shRNA组)、未转染组即空白对照组(control组)和空质粒组(vehicle组),将上述3组细胞分别与CaR激动剂精胺[钙池操纵性钙通道(SOC)和受体操纵性钙通道(ROC)均激活]、ROC模拟剂12-O-十四烷酰佛波醇-13-乙酸酯(TPA)+CaR负性变构调节剂Calhex 231(激活ROC、阻断SOC)、蛋白激酶C(PKC)抑制剂Ro31-8220及经典型PKCs和PKCμ抑制剂Go6967(阻断ROC、激活SOC)孵育,用荧光探针Fura-2/AM和DAF-FM负载方法同步检测[Ca2+]i和NO生成的变化。结果:(1)实时定量RT-PCR及Western blotting检测结果显示:与control组相比较,shOrai3-77干扰后,Orai3 mRNA的表达明显降低(抑制率为84.5%,P<0.05),Orai3蛋白的表达亦明显降低(抑制率为70.68%,P<0.05)。(2)[Ca2+]iΔratio值和NO净荧光强度值的测定结果显示:与control组及vehicle组相比,在4种不同处理因素作用下,Orai3 shRNA转染组中[Ca2+]iΔratio值和NO净荧光强度值均明显降低(P<0.05),而vehicle组无显著差异(P>0.05)。结论:在HUVECs中Orai3参与了CaR经SOC和ROC激活介导的钙内流和NO生成。 展开更多

关键词 Orai3蛋白 一氧化氮 钙 人脐静脉内皮细胞

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ERK和Smad通路在TGF-β_1抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖中的作用 被引量：9

3

作者 钟华 何芳 +4 位作者 胡清华 张春军 邓峰美 孙志萍 李增春 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1665-1670,共6页

目的:探讨ERK通路是否参与TGF-β/Smad通路诱导的血管平滑肌细胞增殖及可能的分子机制。方法:原代培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞,细胞分4组:(1)对照组;(2)TGF-β1组;(3)ERK阻断剂(PD98059)组;(4)TGF-β1+ERK阻断剂(PD98059)组。MTT法测细... 目的:探讨ERK通路是否参与TGF-β/Smad通路诱导的血管平滑肌细胞增殖及可能的分子机制。方法:原代培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞,细胞分4组:(1)对照组;(2)TGF-β1组;(3)ERK阻断剂(PD98059)组;(4)TGF-β1+ERK阻断剂(PD98059)组。MTT法测细胞的增殖活性,Western blotting法检测VSMCs中细胞内核增殖抗原(PCNA)、Smad2/3、ERK1/2、Smad7蛋白表达及相关磷酸化蛋白含量,RT-PCR方法测VSMCs中Smad2、3、7mRNA的表达。结果:(1)各组PCNA蛋白表达和MTT法测得A值均低于对照组(P<0.05),TGF-β1+ERK阻断剂组与TGF-β1组相比无显著差异。(2)与对照组相比,TGF-β1组p-Smad2/3、p-ERK1/2蛋白含量和Smad7蛋白表达增高(P<0.05),ERK阻断剂组则明显降低(P<0.05);与TGF-β1组比,TGF-β1+ERK阻断剂组降低(P<0.05)。各组间Smad2/3、ERK1/2蛋白表达无显著差异。(3)与对照组相比,TGF-β1组Smad7 mRNA表达增高(P<0.05),ERK阻断剂组和TGF-β1+ERK阻断剂组降低(P<0.05);与TGF-β1组比,TGF-β1+ERK阻断剂组表达降低(P<0.05)。各组内VSMCs的Smad2、Smad3 mRNA表达无显著差异。结论:(1)TGF-β1诱导的Smad2/3蛋白磷酸化依赖ERK通路激活,但对TGF-β1的抑制平滑肌细胞增殖的作用无影响,可能有其它信号通路参与此过程。(2)ERK通路可通过蛋白和mRNA水平促进Smad7表达,反过来其又可促进ERK通路激活。(3)ERK通路对Smad2/3蛋白和mRNA水平无影响。 展开更多

关键词 转化生长因子Β 血管平滑肌细胞 SMAD通路 ERK通路

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缝隙连接在TGF-β1诱导的自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖中的作用 被引量：9

4

作者 钟华 胡清华 +4 位作者 王恩帮 赵丹 孙志萍 司军强 何芳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期16-21,共6页

目的:探讨缝隙连接是否参与转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的自发性高血压大鼠(SHR)血管平滑肌细胞增殖及可能的分子机制。方法:原代培养SHR胸主动脉平滑肌细胞,细胞分4组:对照组、TGF-β1组、缝隙连接阻断剂18α-甘草次酸(18α-GA)组和T... 目的:探讨缝隙连接是否参与转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的自发性高血压大鼠(SHR)血管平滑肌细胞增殖及可能的分子机制。方法:原代培养SHR胸主动脉平滑肌细胞,细胞分4组:对照组、TGF-β1组、缝隙连接阻断剂18α-甘草次酸(18α-GA)组和TGF-β1+18α-GA组。MTT法及流式细胞术检测细胞的增殖活性,免疫荧光技术观察细胞中缝隙连接蛋白(Cx)43和Cx40蛋白表达及定位,Western blotting法检测细胞中Cx43和Cx40蛋白表达,染料示踪分子传递法(划痕标记染料传输法)检测细胞的缝隙连接功能。结果:(1)与对照组相比,TGF-β1组MTT法测得A值及细胞周期S期比例增高(P<0.05),细胞增殖活性增强。18α-GA组降低(P<0.05);与TGF-β1组比,TGF-β1+18α-GA组A值及S值比例均降低(P<0.05),细胞增殖活性减弱。(2)免疫荧光技术检测细胞中Cx43与Cx40蛋白表达呈阳性,两者共定位于胞浆。(3)与对照组相比,TGF-β1组Cx43蛋白表达增强(P<0.05),Cx40表达无显著差异(P>0.05),18α-GA组Cx43和Cx40表达均减弱(P<0.05),与TGF-β1组比,TGF-β1+18α-GA组Cx43表达减弱(P<0.05),Cx40表达无显著差异(P>0.05)。(4)与对照组相比,TGF-β1组缝隙连接功能明显增强(P<0.05);18α-GA组缝隙连接功能明显减弱(P<0.05);与TGF-β1组比,TGF-β1+18α-GA组缝隙连接功能显著降低(P<0.05)。结论:TGF-β1主要通过上调SHR血管平滑肌细胞Cx43蛋白表达,引起缝隙连接通讯功能增强,从而促进了SHR血管平滑肌细胞的增殖,而Cx40蛋白表达可能不起主要作用。 展开更多

关键词 缝隙连接 血管平滑肌细胞 转化生长因子Β

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缝隙连接阻断剂18α-甘草次酸对大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用 被引量：4

5

作者 吴玲玲 钟华 +3 位作者 王恩帮 唐娜 李佳蔚 何芳 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2013年第5期607-611,共5页

为探讨缝隙连接是否参与抑制大鼠血管平滑肌细胞的增殖及可能的分子机制,本研究以原代及传代培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞为模型,实验分2组:对照组、缝隙连接阻断剂18α-甘草次酸(18α-Glycyrrhetinic acid,18α-GA)组。MTT法及流式细胞... 为探讨缝隙连接是否参与抑制大鼠血管平滑肌细胞的增殖及可能的分子机制,本研究以原代及传代培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞为模型,实验分2组:对照组、缝隙连接阻断剂18α-甘草次酸(18α-Glycyrrhetinic acid,18α-GA)组。MTT法及流式细胞术检测细胞的增殖活性,染料示踪分子传递法(划痕标记染料传输法)检测细胞的缝隙连接功能,Western blotting法检测细胞中缝隙连接蛋白40(Cx40)和43(Cx43)表达。结果显示:(1)与对照组相比,18α-GA组MTT法测得的A570值及细胞周期S期比例均降低(P<0.01),细胞增殖活性减弱;(2)与对照组相比,18α-GA组罗氏黄荧光染料传递百分数显著降低,缝隙连接功能明显减弱(P<0.01);(3)与对照组相比,18α-GA组Cx40和总Cx43蛋白表达无显著差异(P>0.05),磷酸化Cx43与非磷酸化Cx43的比值显著降低(P<0.01)。由此可知,18α-GA可能主要通过下调血管平滑肌细胞磷酸化Cx43蛋白表达,引起缝隙连接通讯功能减弱,从而抑制了血管平滑肌细胞的增殖。 展开更多

关键词 缝隙连接 增殖 血管平滑肌细胞

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钙离子感受蛋白STIM1与Orai1在钙敏感受体介导钙内流及NO生成中的相互作用 被引量：2

6

作者 王腊梅 钟华 +3 位作者 唐娜 庞丽娟 张春军 何芳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1773-1780,共8页

目的:研究Ca^(2+)感受蛋白[基质相互作用分子1(STIM1)与钙释放激活钙通道蛋白1(Orai1)]在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)钙敏感受体(Ca SR)介导的钙内流和一氧化氮(NO)生成中的相互作用。方法:将Ca SR激动剂精胺[钙池操纵性钙通道(SOC)和受... 目的:研究Ca^(2+)感受蛋白[基质相互作用分子1(STIM1)与钙释放激活钙通道蛋白1(Orai1)]在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)钙敏感受体(Ca SR)介导的钙内流和一氧化氮(NO)生成中的相互作用。方法:将Ca SR激动剂精胺[钙池操纵性钙通道(SOC)和受体操纵性钙通道(ROC)均激活]单用或与ROC模拟剂12-O-十四烷酰佛波醇-13-醋酸酯(TPA)+Ca SR负性变构调节剂Calhex 231(激活ROC、阻断SOC)、蛋白激酶C(PKC)抑制剂Ro 31-8220和PKCα/β1选择性抑制剂Go 6976(激活SOC、阻断ROC)联合孵育HUVECs;利用免疫荧光技术检测HUVECs中STIM1和Orai1的蛋白表达和共定位;免疫共沉淀法检测STIM1和Orai1之间的相互作用;取2~3代HUVECs随机分为特异性的质粒转染组(sh STIM1+sh Orai1组)、空质粒组(vehicle-STIM1+vehicle-Orai1组)和未转染组(control组),将3组细胞分别加入上述4组不同药物刺激,采用荧光探针Fura-2/AM检测HUVECs中Ca^(2+)浓度的变化,NO荧光探针DAF-FM DA负载方法同步检测HUVECs中NO生成的变化。结果:STIM1和Orai1蛋白表达共定位于胞浆,与control组相比,加入Calhex 231+TPA、Ro 31-8220和Go 6976刺激后,STIM1和Orai1在胞浆中的定位均减少,且二者的相互作用均减弱;在4种不同处理因素作用下,sh STIM1+sh Orai1组细胞内Ca^(2+)浓度和NO净荧光强度均明显降低(P<0.05)。结论:STIM1与Orai1以二元复合物的形式共同调节Ca SR,并通过激活SOC和ROC介导钙内流及NO生成。 展开更多

关键词 基质相互作用分子1 钙释放激活钙通道蛋白1 钙敏感受体 一氧化氮

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血管疾病治疗新靶标:STIM1和Orai1 被引量：4

7

作者 赵慧 何芳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期179-182,187,共5页

钙离子（Ca^2＋）是常见的第二信使，不同于其它第二信使，其主要位于细胞外或存储于内质网（endoplasmicreticulum，ER）等细胞器内。静息状态下细胞内游离Ca^2＋浓度（intracellular Ca^2＋ concentra．tion，[Ca^2＋]i）约为细胞外的... 钙离子（Ca^2＋）是常见的第二信使，不同于其它第二信使，其主要位于细胞外或存储于内质网（endoplasmicreticulum，ER）等细胞器内。静息状态下细胞内游离Ca^2＋浓度（intracellular Ca^2＋ concentra．tion，[Ca^2＋]i）约为细胞外的1／20000，受体激活或生物信号刺激可通过改变[Ca^2＋]i进一步发挥生物放大效应。[Ca^2＋]； 展开更多

关键词 钙 钙通道 基质相互作用分子1 Orai1 血管疾病 钙库操纵钙通道

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PAK6基因沉默对前列腺癌细胞放疗敏感性研究 被引量：2

8

作者 王新敏 章乐 +5 位作者 赵静 李强 倪钊 李应龙 钱彪 王勤章 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2015年第6期732-735,共4页

为探讨p21活化激酶6基因沉默对雄激素依赖性前列腺癌细胞株LNCa P细胞放疗敏感性的影响。采用利用蛋白质免疫印迹技术检测筛选出的靶向PAK6的sh RNA对LNCa P细胞中PAK6蛋白表达抑制情况。并以靶向PAK6的sh RNA转染LNCa P细胞,分别给予0... 为探讨p21活化激酶6基因沉默对雄激素依赖性前列腺癌细胞株LNCa P细胞放疗敏感性的影响。采用利用蛋白质免疫印迹技术检测筛选出的靶向PAK6的sh RNA对LNCa P细胞中PAK6蛋白表达抑制情况。并以靶向PAK6的sh RNA转染LNCa P细胞,分别给予0、1、3、5Gy单次剂量放射治疗,观察放疗对PAK6基因沉默的前列腺癌细胞的抑制作用。用CCK-8法检测前列腺癌细胞的增殖活性;流式细胞仪测定其凋亡变化。结果显示,放疗能抑制前列腺癌细胞的增殖,增加其凋亡率;接受等剂量照射的PAK6基因沉默组前列腺癌细胞增殖减缓更明显,凋亡的肿瘤细胞显著增多。由此可知,PAK6基因沉默的前列腺癌细胞对放射治疗更敏感。 展开更多

关键词 前列腺癌 p21活化激酶6 放射治疗 基因沉默 LNCAP细胞

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老年性白内障患者脂质过氧化反应的研究 被引量：3

9

作者 杨炜 薛磊 +4 位作者 马玉华 罗文萍 李悦山 王雪雯 邓峰美 《眼科新进展》 CAS 2000年第2期124-125,共2页

目的　探讨脂质过氧化反应与老年性白内障的发病关系。方法　本文测定了 39例老年性白内障患者晶状体 MDA含量、SOD活力 ;48例血浆 MDA含量、红细胞 SOD活力 ,并以 12例正常人对照。结果　老年性白内障患者晶状体内 MDA含量高于对照组 (... 目的　探讨脂质过氧化反应与老年性白内障的发病关系。方法　本文测定了 39例老年性白内障患者晶状体 MDA含量、SOD活力 ;48例血浆 MDA含量、红细胞 SOD活力 ,并以 12例正常人对照。结果　老年性白内障患者晶状体内 MDA含量高于对照组 (P<0 .0 5 ) ,SOD活力显著低于对照组 (P<0 .0 1) ,眼内脂质过氧化损伤明显增强 ;血浆 MDA含量显著高于对照组 (P<0 .0 1) ,红细胞 SOD活力低于显著对照组 (P<0 .0 1) ,机体脂质过氧化水平明显升高。结论　自由基引发的脂质过氧化损伤增强、机体抗氧化能力降低与老年性白内障的发病有密切关系 ;晶状体的过氧化损伤及眼内抗氧化能力降低与整体的抗氧化酶活力降低有关。 展开更多

关键词 老年人 白内障 丙二醛 超乳化物歧化酶

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小凹蛋白-1下调人脐静脉内皮细胞外钙敏感受体介导的钙内流的作用机制 被引量：1

10

作者 钟华 龚艳 +5 位作者 吴玲玲 赵慧 王静 孙志萍 邓峰美 何芳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期577-583,共7页

目的:研究小凹蛋白-1(Cav-1)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)细胞外钙敏感受体(CaR)介导钙内流的作用机制。方法:取2～3代HUVECs,采用细胞膜穴样凹陷(caveolae)结构破坏剂非律平(filipin)和甲基-β-环糊精(MβCD)及Cav-1基因沉默,配合CaR激... 目的:研究小凹蛋白-1(Cav-1)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)细胞外钙敏感受体(CaR)介导钙内流的作用机制。方法:取2～3代HUVECs,采用细胞膜穴样凹陷(caveolae)结构破坏剂非律平(filipin)和甲基-β-环糊精(MβCD)及Cav-1基因沉默,配合CaR激动剂精胺(spermine)和负性变构调节剂Calhex 231。Fura-2/AM负载检测细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)。Western blotting检测HUVECs中Cav-1以及CaR蛋白表达,免疫共沉淀技术检测Cav-1和CaR相互作用。用蔗糖密度梯度离心的方法提取并鉴定caveolae,Western blotting检测caveolae的标志蛋白Cav-1和浮舰蛋白1(flotillin-1)及CaR表达。同时检测胞膜、胞浆和高尔基体标志蛋白:转铁蛋白受体(TfR)、β-肌动蛋白(β-actin)和β-外被体蛋白(β-COP)。检测富含Cav-1膜(CEM)区、非caveolae I区(NCF I)和II区(NCF II)的Cav-1和CaR表达。结果:(1)细胞外液为含钙液时,Calhex 231完全阻断精胺刺激引起的[Ca2+]i升高(P<0.05),MβCD可加强精胺升高[Ca2+]i的作用(P<0.05)。不同浓度MβCD处理后各组Cav-1和CaR相互作用的差异无统计学意义(P>0.05);(2)免疫共沉淀结果显示,各组Cav-1和CaR蛋白表达的差异无统计学意义(P>0.05);(3)与control组比较,spermine+Ca2+组、filipin+spermine+Ca2+组和MβCD+spermine+Ca2+组CEM区的Cav-1和CaR蛋白表达均降低(P<0.05),NCF I区的Cav-1和CaR蛋白表达增加(P<0.05),NCF II区Cav-1蛋白表达增加(P<0.05),而CaR蛋白表达的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在HUVECs中,Cav-1和CaR共定位于同一caveolae区,同时Cav-1对CaR介导的Ca2+内流有下调作用,其机制可能与Cav-1抑制CaR膜定位、促使其向非caveolae区转位及减弱其对激动剂的反应性有关。 展开更多

关键词 小凹蛋白-1 人脐静脉内皮细胞 受体 钙敏感 钙信号

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STIM1/ORAI1复合体参与调节人脐静脉内皮细胞SOC和ROC介导的钙内流和NO生成 被引量：1

11

作者 王腊梅 胡清华 +3 位作者 钟华 唐娜 孙志萍 何芳 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2017年第3期354-362,共9页

为研究基质交联分子1(STIM1)/钙释放激活钙通道调节分子1(ORAI1)复合体在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)钙池操纵性钙通道(SOC)和受体操纵性钙通道(ROC)介导Ca^(2+)内流和NO生成中的作用。采取2-3代HUVECs随机分组,将构建的STIM1和ORAI1干扰... 为研究基质交联分子1(STIM1)/钙释放激活钙通道调节分子1(ORAI1)复合体在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)钙池操纵性钙通道(SOC)和受体操纵性钙通道(ROC)介导Ca^(2+)内流和NO生成中的作用。采取2-3代HUVECs随机分组,将构建的STIM1和ORAI1干扰质粒分别转染入HUVECs。用激光共聚焦显微镜观察细胞转染效果,Real-time PCR和Western blotting检测STIM1、ORAI1 mRNA和蛋白的表达。细胞随机分组:特异性质粒转染组即实验组,未转染组即空白对照组(Control组)及空质粒组(Scrambled组),将上述3组细胞分别与四种不同处理因素刺激后用荧光探针Fura-2/AM检测[Ca^(2+)]i变化,NO荧光探针DAF-FM负载方法同步检测NO生成的变化。随后将构建的STIM1和ORAI1干扰质粒同时转染入HUVECs,与Ca R激动剂精胺孵育后检测[Ca^(2+)]i和NO,用免疫共沉淀法检测STIM1和ORAI1的相互作用。结果显示,(1)与对照组相比,STIM1及ORAI1组,m RNA和蛋白表达均明显降低(P<0.05);(2)在4种不同处理因素作用下,STIM1及ORAI1转染组中[Ca^(2+)]i△ratio值和NO净荧光强度值均明显降低(P<0.05);(3)与对照组及单转染STIM1及ORAI1组比,共转染组[Ca^(2+)]i△ratio值和NO净荧光强度值均明显降低(P<0.05);(4)STIM1与ORAI1相互作用形成复合体,且在Ca R激动剂的剌激下相互作用增强。由此可知,STIM1与ORAI1复合体共同调节Ca R经SOC和ROC激活介导的Ca^(2+)内流和NO生成。 展开更多

关键词 STIM1 ORAI1 一氧化氮 钙离子 人脐静脉内皮细胞

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胱硫醚β-合成酶基因rs719037、rs719038多态性与新疆哈萨克族原发性高血压的相关性研究 被引量：1

12

作者 钟华 张春军 +3 位作者 赵丹 石晓鹏 杨建峰 何芳 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2011年第6期716-721,共6页

研究新疆哈萨克族原发性高血压(EH)患者胱硫醚β-合成酶(CBS)基因多态性与EH的关系。采用整群抽取随机抽样的方式,以新疆沙湾县733名哈萨克族人(EH组366人,对照组367人)为研究对象,进行流行病学调查和临床检查,并采集血样,采用SnaPshot... 研究新疆哈萨克族原发性高血压(EH)患者胱硫醚β-合成酶(CBS)基因多态性与EH的关系。采用整群抽取随机抽样的方式,以新疆沙湾县733名哈萨克族人(EH组366人,对照组367人)为研究对象,进行流行病学调查和临床检查,并采集血样,采用SnaPshot技术进行基因分型。结果显示:CBS rs719037基因型及等位基因在EH组和对照组分布差异无显著性(P>0.05);CBS rs719038基因型及等位基因在EH组和对照组分布差异无显著性(P>0.05)。结论新疆哈萨克族人群中存在CBS基因rs719038、rs719037多态性位点。同时rs719038、rs719037位点与EH缺乏关联。 展开更多

关键词 CBS 基因多态性 高血压 新疆哈萨克族

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转化生长因子β_1基因标签单核苷酸多态性与新疆汉族原发性高血压相关性研究

13

作者 何芳 邓峰美 +5 位作者 钟华 杨建峰 石晓鹏 王刚 王振焕 陈雄英 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第A10期1976-1976,共1页

关键词 原发性高血压 转化生长因子 采集血样 单体型频率 单核苷酸 流行病学调查 患病风险

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结核杆菌Ag85B基因疫苗与结核杆菌Ag85B和细胞因子GM-CSF共表达基因疫苗在小鼠体内的免疫效应比较

14

作者 张万江 邓喜玲 +4 位作者 赵海军 曹文江 吴芳 黄春 曹旭东 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期846-850,共5页

目的比较结核杆菌Ag85B基因疫苗与结核杆菌Ag85B和细胞因子GM-CSF共表达基因疫苗在小鼠体内的免疫效应,为研制高效结核杆菌基因疫苗奠定基础。方法将雌性C57BL/6健康小鼠54只,随机分为3组,即结核杆菌Ag85B和细胞因子GM-CSF共表达基因疫... 目的比较结核杆菌Ag85B基因疫苗与结核杆菌Ag85B和细胞因子GM-CSF共表达基因疫苗在小鼠体内的免疫效应,为研制高效结核杆菌基因疫苗奠定基础。方法将雌性C57BL/6健康小鼠54只,随机分为3组,即结核杆菌Ag85B和细胞因子GM-CSF共表达基因疫苗(pIRES-Ag85B/GM-CSF)组、结核杆菌Ag85B基因疫苗(pIRES-Ag85B)组和空载体(pIRES)组,分别小鼠肌内注射疫苗,检测小鼠体内特异性体液免疫和细胞免疫应答相关指标,同时另取C57BL/6小鼠,随机分成4组,第1、2、3组免疫方法与上述各组免疫方法相对应,第4组每只小鼠背部皮下注射1×106CFU卡介苗(BCG),作为阳性对照,进行动物免疫保护性实验,比较分析两种基因疫苗在小鼠体内的免疫效应。结果结核杆菌Ag85B和细胞因子GM-CSF共表达基因疫苗在小鼠体内的免疫原性和免疫保护性明显强于结核杆菌Ag85B基因疫苗。结论结核杆菌Ag85B和细胞因子GM-CSF共表达基因疫苗能增强结核病基因疫苗的免疫原性和免疫保护性。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 Ag85B基因 细胞因子GM—CSF 免疫应答 免疫保护

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人脐静脉内皮细胞中C-型瞬时型感受器电位通道3RNA干扰质粒构建及筛选

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作者 王静 钟华 +5 位作者 吴玲玲 赵慧 王腊梅 孙志萍 庞丽娟 何芳 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2013年第4期463-467,共5页

为了探讨C-型瞬时型感受器电位通道3(TRPC3)在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的作用,本实验针对GenBank中人TRPC3的cDNA序列设计合成短发卡RNA(shRNA),将其转染到HUVEC中,在激光共聚焦显微镜下观察细胞的转染效率,实时定量PCR和免疫印记检测... 为了探讨C-型瞬时型感受器电位通道3(TRPC3)在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的作用,本实验针对GenBank中人TRPC3的cDNA序列设计合成短发卡RNA(shRNA),将其转染到HUVEC中,在激光共聚焦显微镜下观察细胞的转染效率,实时定量PCR和免疫印记检测TRPC3mRNA和蛋白表达及转染后的干扰效率。结果显示:(1)激光共聚焦显微镜下观察到绿色荧光,说明已成功将shTRPC3转入到HUVEC中;(2)转染48h后用G418进行稳定筛选后,TRPC3mRNA和蛋白表达均降低(P<0.05),干扰效率分别为71%和74%。由此可知,在HUVEC中成功构建了TRPC3干扰质粒。 展开更多

关键词 内皮细胞 瞬时型感受器电位通道 SHRNA

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微血管张力测定技术在血管内皮去除中的应用 被引量：2

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作者 张文文 唐娜 +2 位作者 孙瑞霞 钟华 何芳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期104-109,共6页

目的通过建立离体小动脉血管内皮去除的研究方法,提高微血管测量技术研究数据的可信度。方法选取♂自发性高血压大鼠(SHR)和正常血压大鼠(WKY),测量血压后,获取肠系膜动脉环。采取机械(血管环围绕电极尖端旋转、推注气体)和药物(L-NAME... 目的通过建立离体小动脉血管内皮去除的研究方法,提高微血管测量技术研究数据的可信度。方法选取♂自发性高血压大鼠(SHR)和正常血压大鼠(WKY),测量血压后,获取肠系膜动脉环。采取机械(血管环围绕电极尖端旋转、推注气体)和药物(L-NAME和吲哚美辛)相结合的方式去除内皮。采用压力肌动图技术检测苯肾上腺素(PE)、乙酰胆碱(ACh)、硝普钠(SNP)对肠系膜动脉直径变化的影响。结果(1)SHR血压值高于WKY大鼠(P<0.01);(2)PE浓度依赖地收缩肠系膜动脉。内皮完整和内皮去除时,与WKY相比,SHR的收缩增强(P<0.05);(3)ACh、SNP能够浓度依赖地舒张肠系膜动脉。内皮完整时,与WKY相比,SHR的舒张减弱(P<0.01);内皮去除时,与WKY相比,SHR的舒张增强(P<0.01)。结论(1)成功建立离体微小动脉血管内皮去除的研究方法。(2)高血压大鼠存在明显的血管舒缩功能障碍。 展开更多

关键词 高血压 血管内皮 肠系膜动脉 血管收缩 血管舒张 压力肌动图技术

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钙敏感受体在高血压大鼠心肌重塑和视网膜血管病变中的作用研究

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作者 赵佳琪 刘薇 +5 位作者 唐娜 王腊梅 屈媛媛 席冬梅 钟华 何芳 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2023年第5期576-582,共7页

背景临床中对于高血压靶器官损害主要以全身降压辅以局部用药治疗为主,但因各组织对药物的反应不同甚至相斥,治疗效果不佳。现已关注到钙敏感受体(CaSR)与高血压的关系,然而其在高血压视网膜疾病中的作用和机制仍缺乏相关研究。目的探讨... 背景临床中对于高血压靶器官损害主要以全身降压辅以局部用药治疗为主,但因各组织对药物的反应不同甚至相斥,治疗效果不佳。现已关注到钙敏感受体(CaSR)与高血压的关系,然而其在高血压视网膜疾病中的作用和机制仍缺乏相关研究。目的探讨CaSR在高血压视网膜中的表达水平以及其与高血压心肌重塑、视网膜血管改变的关系。方法2021年5—12月选取10只8周龄健康正常血压大鼠(WKY)作为WKY组,20只同周龄同源的自发性高血压大鼠(SHR)随机分为SHR组及抑制剂(SHR+NPS2143)组。SHR+NPS2143组腹腔注射CaSR抑制剂NPS2143,WKY组和SHR组注射等量的0.9%氯化钠溶液,共注射16周。干预0周、16周通过无创血压仪监测大鼠血压;干预0周、16周分别选取5只大鼠处死,通过马松(Masson)染色观察大鼠心肌胶原沉积,通过苏木素-伊红(HE)染色检测视网膜病理变化;通过免疫组织化学染色、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)观察CaSR和血管内皮生长因子A(VEGFA)在视网膜的分布和表达。结果SHR组干预0周、16周收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉压(MAP)高于WKY组(P<0.05);SHR组干预16周SBP、DBP、MAP均低于SHR+NPS2143组(P<0.05);SHR组、SHR+NPS2143组干预16周SBP、DBP、MAP均高于干预0周(P<0.05)。SHR组干预16周心脏/体质量(HW/BW%)和左心室/体质量(LVW/BW%)、心肌组织胶原容积分数(CVF)高于WKY组,低于SHR+NPS2143组(P<0.05);SHR组、SHR+NPS2143组干预16周HW/BW%、LVW/BW%、CVF高于干预0周(P<0.05)。SHR组干预0周、16周视网膜总厚度、内丛状层厚度高于WKY组(P<0.05);SHR组干预16周视网膜总厚度、内丛状层厚度低于SHR+NPS2143组(P<0.05);SHR组干预16周视网膜内核层厚度高于WKY组、低于SHR+NPS2143组(P<0.05)。干预16周SHR组视网膜中CaSR低于WKY组、高于SHR+NPS2143组(P<0.05);SHR组视网膜中VEGFA高于WKY组、低于SHR+NPS2143组(P<0.05)。结论应用CaSR抑制剂,可减少CaSR活化,促进视网膜中VEGFA表达增加,加剧高血压引起的心肌重塑与视网膜血管病变的发展。 展开更多

关键词 原发性高血压 受体 钙敏感 血管内皮生长因子 视网膜血管 心肌重塑 大鼠

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