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Mcl-1短发夹RNA在Raw264.7细胞内特异性的筛选
被引量:
4
1
作者
王婵
王新敏
+6 位作者
王飞雨
张雨晴
曹旭东
吴江东
吴芳
张万江
章乐
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第2期151-155,共5页
目的:将Mcl-1shRNA转染到Raw264.7细胞内,针对shRNA对小鼠Raw264.7巨噬细胞系中Mcl-1表达的影响,筛选出沉默Mcl-1基因效果最明显的特异性shRNA真核表达质粒。方法:将特异性shRNA经脂质体介导转染小鼠巨噬细胞系Raw264.7;半定量RT-PCR和W...
目的:将Mcl-1shRNA转染到Raw264.7细胞内,针对shRNA对小鼠Raw264.7巨噬细胞系中Mcl-1表达的影响,筛选出沉默Mcl-1基因效果最明显的特异性shRNA真核表达质粒。方法:将特异性shRNA经脂质体介导转染小鼠巨噬细胞系Raw264.7;半定量RT-PCR和Western blot分别检测转染24、48 h后Mcl-1 mRNA水平变化和Mcl-1蛋白表达情况,分析对应不同位点的三对特异性shRNA片段对Mcl-1的沉默效果。结果:特异性shRNA片段在24、48 h均能有效降低Mcl-1 mRNA和蛋白水平,沉默效率高于正常组、脂质体组和阴性对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);对应不同位点的三对shRNA真核表达质粒,其中Mcl-1 shRNA3对Mcl-1 mRNA和蛋白的抑制作用均最强。结论:RNA干扰技术可有效下调小鼠Raw264.7巨噬细胞系中Mcl-1 mRNA水平,明显下调Mcl-1蛋白表达。成功筛选出了沉默Mcl-1基因效果最明显的特异性shRNA真核表达质粒。
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关键词
MCL-1
RNA干扰
RAW264.7
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职称材料
题名
Mcl-1短发夹RNA在Raw264.7细胞内特异性的筛选
被引量:
4
1
作者
王婵
王新敏
王飞雨
张雨晴
曹旭东
吴江东
吴芳
张万江
章乐
机构
石河子大学医学院病原生物学与免疫学教研室/病理生理学教研室
石河子大学
<新疆地方与民族高发病>教育部重点实验室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第2期151-155,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81260241)
石河子大学项目(RCZX200922)
文摘
目的:将Mcl-1shRNA转染到Raw264.7细胞内,针对shRNA对小鼠Raw264.7巨噬细胞系中Mcl-1表达的影响,筛选出沉默Mcl-1基因效果最明显的特异性shRNA真核表达质粒。方法:将特异性shRNA经脂质体介导转染小鼠巨噬细胞系Raw264.7;半定量RT-PCR和Western blot分别检测转染24、48 h后Mcl-1 mRNA水平变化和Mcl-1蛋白表达情况,分析对应不同位点的三对特异性shRNA片段对Mcl-1的沉默效果。结果:特异性shRNA片段在24、48 h均能有效降低Mcl-1 mRNA和蛋白水平,沉默效率高于正常组、脂质体组和阴性对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);对应不同位点的三对shRNA真核表达质粒,其中Mcl-1 shRNA3对Mcl-1 mRNA和蛋白的抑制作用均最强。结论:RNA干扰技术可有效下调小鼠Raw264.7巨噬细胞系中Mcl-1 mRNA水平,明显下调Mcl-1蛋白表达。成功筛选出了沉默Mcl-1基因效果最明显的特异性shRNA真核表达质粒。
关键词
MCL-1
RNA干扰
RAW264.7
Keywords
Mcl-1
RNA interference
Raw264. 7
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Mcl-1短发夹RNA在Raw264.7细胞内特异性的筛选
王婵
王新敏
王飞雨
张雨晴
曹旭东
吴江东
吴芳
张万江
章乐
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015
4
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