留学生医学微生物学教学探讨 被引量：4

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作者 何树梅 袁东亚 姜素华 《海南医学院学报》 CAS 2008年第6期817-818,共2页

关键词 微生物学 教学 学生 医科 留学生

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VNTR及RD105缺失检测法对新疆石河子市汉族MTB基因分型及其耐药的研究

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作者 张娟 米利古 +5 位作者 王远志 刘佩芝 梁海燕 黄艺 吕冰 袁俐 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2012年第2期220-224,共5页

了解新疆石河子地区汉族结核分枝杆菌基因型特征、"北京家族"基因型的分布及其与耐药的相关性。应用多位点可变串联重复序列(VNTR)技术、RD105缺失检测法分析结核分枝杆菌的基因型,聚类分析采用Bionum-berics5.0软件分析。55... 了解新疆石河子地区汉族结核分枝杆菌基因型特征、"北京家族"基因型的分布及其与耐药的相关性。应用多位点可变串联重复序列(VNTR)技术、RD105缺失检测法分析结核分枝杆菌的基因型,聚类分析采用Bionum-berics5.0软件分析。55株结核分枝杆菌临床分离株中,"北京家族"基因型47株;24位点VNTR检测结果显示明显的基因多态性,经基因聚类分析,可分为7个基因簇和46个独立的基因型,分为8个基因群(Ⅰ-Ⅷ群),其中46株属于Ⅵ群;耐药菌株为19株(34.5%)。新疆石河子地区结核分枝杆菌有明显的基因多态性;"北京家族"基因型为主要流行株,应引起重视;"北京家族"基因型与耐药无明显相关性。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 RD105 数目可变串联重复序列 基因分型 耐药性

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结核分枝杆菌FabG4的生物信息学分析及功能初探 被引量：3

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作者 杨赛丽 谢婉莹 +3 位作者 刘仪 牛宏红 曹旭东 袁俐 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2020年第1期96-103,共8页

目的预测结核分枝杆菌(H37Rv)的FabG4蛋白的结构、与其相互作用蛋白及T、B细胞抗原表位。方法从NCBI数据库获取FabG4基因序列和氨基酸序列,通过在线软件对FabG4的理化性质、二级和三级结构、T、B细胞抗原表位及其相互作用的蛋白进行预... 目的预测结核分枝杆菌(H37Rv)的FabG4蛋白的结构、与其相互作用蛋白及T、B细胞抗原表位。方法从NCBI数据库获取FabG4基因序列和氨基酸序列,通过在线软件对FabG4的理化性质、二级和三级结构、T、B细胞抗原表位及其相互作用的蛋白进行预测分析。结果H37Rv FabG4基因全长1365bp,编码454个氨基酸,预测到该蛋白性质稳定,无跨膜区,属于非分泌蛋白,二级结构显示α-螺旋(Th)、β-折叠(Ee)、β-转角(Tt)、无规则卷曲结构(Cc)分别为43.61%,14.98%,9.03%,32.38%;有多个T、B细胞抗原表位及多个与FabG4蛋白相互作用蛋白。mc 2155 FabG4过表达株生长曲线显示,过表达菌株较野生型的生存能力明显增强,差异有统计学意义(P<0.01),形态粗、长。结论结核分枝杆菌FabG4蛋白稳定,所含保守结构域与其功能密切相关,筛选出6个B细胞优势表位,CTL和Th细胞优势表位各8个,为研究FabG4蛋白的结构、功能和开发靶向新药、抗结核疫苗提供理论依据。 展开更多

关键词 FabG4基因 FabG4蛋白 生物信息学 结核分枝杆菌 生长曲线

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传统 BCG 初免 IL-12联合 Ag85A DNA 疫苗加强序贯免疫小鼠效果观察 被引量：2

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作者 王婵 王新敏 +6 位作者 季榕 张宇晴 王飞雨 吴江东 吴芳 张万江 章乐 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期997-1001,1008,共6页

目的探讨BCG初次免疫,IL-12联合结核分枝杆菌Ag85ADNA疫苗加强免疫对小鼠的免疫效果。方法实验小鼠随机分为7组,即PBS阴性对照组、BCG组、pcAg85A组、BCG初免pcAg85A加强免疫组、BCG初免pcAg85A联合IL-12加强免疫组、BCG初免IL-12加强... 目的探讨BCG初次免疫,IL-12联合结核分枝杆菌Ag85ADNA疫苗加强免疫对小鼠的免疫效果。方法实验小鼠随机分为7组,即PBS阴性对照组、BCG组、pcAg85A组、BCG初免pcAg85A加强免疫组、BCG初免pcAg85A联合IL-12加强免疫组、BCG初免IL-12加强免疫组、以及BCG初免pcDNA3.1加强免疫组。按BCG初免,细胞因子IL-12联合结核分枝杆菌Ag85ADNA加强的免疫程序进行免疫实验,在末次免疫后的4、6、8周通过检测小鼠血清总IgG抗体、特异性淋巴细胞增殖,细胞因子的水平,观测对小鼠的免疫效果。结果采用BCG初免,细胞因子IL-12联合结核分枝杆菌Ag85A DNA疫苗加强的免疫策略组的小鼠与其它免疫方式组相比,IgG明显升高(P<0.05)、特异性淋巴细胞明显增殖,加强免疫后IFN-γ水平、IL-2水平、IL-4水平BCG/Ag85A+IL-12组在3个时间段分别为128.2±20.4、190.2±16.51、244.2±39.14;146.2±17.29、271.6±16.36、419.3±28.12;68.6±6.62、96.6±5.5、117.4±10.71均高于其它各组(P<0.05)。结论采用BCG初免,细胞因子IL-12联合结核分枝杆菌Ag85ADNA疫苗加强的免疫能明显增强机体体液和细胞免疫,为进一步在动物体内进行保护性效应试验的研究提供了依据。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 序贯免疫策略 AG85A BCG 白介素-12

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MSMEG3150调控耻垢分枝杆菌细胞壁的结构与生物膜的形成 被引量：1

5

作者 牛宏红 刘仪 +2 位作者 杨赛丽 曹旭东 袁俐 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2022年第3期352-361,共10页

目的 探讨耻垢分枝杆菌中MSMEG_3150蛋白的功能。方法 构建耻垢分枝杆菌MSMEG_3150过表达株;采用CRISPRi技术构建耻垢分枝杆菌MSMEG_3150沉默株。使用MSMEG_3150过表达株、沉默株和野生型菌株进行实验研究。测定细菌生长曲线;刚果红实... 目的 探讨耻垢分枝杆菌中MSMEG_3150蛋白的功能。方法 构建耻垢分枝杆菌MSMEG_3150过表达株;采用CRISPRi技术构建耻垢分枝杆菌MSMEG_3150沉默株。使用MSMEG_3150过表达株、沉默株和野生型菌株进行实验研究。测定细菌生长曲线;刚果红实验检测细菌表面疏水性。透射电镜、扫描电镜等观察菌体形态、结构。LC-MS测定脂肪酸含量。结晶紫染色定量生物膜形成。结果 过表达MSMEG_3150导致菌体变长、细胞壁增厚,生长速度加快,脂质含量增多,增强细菌表面的疏水性,促进生物膜形成。结论 MSMEG_3150可能通过调控耻垢分枝杆菌细胞壁的脂质含量和表面疏水性从而影响细菌的生长特性及生物膜的形成。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 FabG1 生物膜 脂质合成 表面疏水性

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mazEF系统及生物膜对北京基因型结核分枝杆菌生存能力的影响

6

作者 谢婉莹 赵继利 +2 位作者 刘微 杨赛丽 袁俐 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2018年第6期661-668,共8页

目的探索生物膜形成能力、mazEF3,6,9系统的表达与北京基因型结核分枝杆菌生存力的相关性。方法检测北京、非北京基因型菌株与标准毒力株H37Rv在不同培养条件下的生存力、生物膜形成能力。采用PCR技术扩增上述菌株的mazE3,6,9系统,并进... 目的探索生物膜形成能力、mazEF3,6,9系统的表达与北京基因型结核分枝杆菌生存力的相关性。方法检测北京、非北京基因型菌株与标准毒力株H37Rv在不同培养条件下的生存力、生物膜形成能力。采用PCR技术扩增上述菌株的mazE3,6,9系统,并进行基因测序;使用荧光定量PCR检测所有菌株的mazEF3,6,9基因、mazF3,6,9毒素基因和mazEF3,6,9抗毒素基因的mRNA表达水平;利用WesternBlot技术检测MazF9蛋白表达水平。结果北京基因型菌株在不同培养条件下的生存力、生物膜形成能力高于非北京基因型菌株。北京、非北京基因型菌株mazF3基因193bp处发生碱基突变,由C突变为T。在mRNA表达水平上,与H37Rv相比,北京、非北京基因型菌株中mazE3低表达;非北京菌株中mazE6低表达,mazE9高表达(P<0.05)。与非北京基因型菌株相比,北京基因型菌株中mazEF3高表达、mazE9低表达、mazF3、mazF6、mazF9高表达,mazF9蛋白高表达(P<0.05)。结论北京基因型菌株具有较强的生存力和生物膜形成能力。mazEF系统的差异表达、生物膜成膜能力强可能与北京基因型菌株生存能力强相关。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 北京基因型结核分枝杆菌 毒素-抗毒素系统 生存力 生物膜

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不同因素与痰涂片抗酸杆菌检出关系探讨 被引量：10

7

作者 梁海燕 黄艺 +5 位作者 米利古 李永祥 袁俐 张文辉 褚福永 马静 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2013年第1期61-64,共4页

阐明痰的性状、不同咳痰时间、痰量和性别对疑似肺结核病人痰涂阳率的影响。收集2010年11月-2012年6月新疆南、北疆主要地区怀疑有活动性肺结核而去当地医院就诊的患者痰液。采用痰直接涂片、萋-尼抗酸染色、光学显微镜镜检,统计不同性... 阐明痰的性状、不同咳痰时间、痰量和性别对疑似肺结核病人痰涂阳率的影响。收集2010年11月-2012年6月新疆南、北疆主要地区怀疑有活动性肺结核而去当地医院就诊的患者痰液。采用痰直接涂片、萋-尼抗酸染色、光学显微镜镜检,统计不同性状、不同咳痰时间、不同量的痰标本以及性别对痰涂片阳性率的影响。在接受检查的2018份痰标本中,有470份涂片阳性痰,其中男性313例,女性157例,痰的性状和不同咳痰时间在两种性别之间均与涂片阳性有关;但痰量仅在女性患者与涂片阳性相关。痰的性状、不同咳痰时间和痰量均与涂阳率相关。疑似结核病的女性应至少提供3mL痰液以用于涂片镜检。鼓励疑似结核病患者留取合格痰标本,以提高阳性检出率,便于更好的防治结核病。 展开更多

关键词 结核病 涂片镜检 痰 涂阳率

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靶向沉默Mcl-1基因对感染不同毒力结核杆菌小鼠腹腔巨噬细胞凋亡的影响 被引量：5

8

作者 王飞雨 王新敏 +6 位作者 王婵 王小芳 张宇晴 吴江东 吴芳 张万江 章乐 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期2195-2201,共7页

目的:通过RNA干扰技术特异性沉默Mcl-1基因,探讨下调Mcl-1基因对感染不同毒力结核杆菌小鼠腹腔巨噬细胞凋亡的影响。方法:分别用制备好的新疆地区流行的优势强毒结核分枝杆菌临床分离株(简称强毒株)、结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv(... 目的:通过RNA干扰技术特异性沉默Mcl-1基因,探讨下调Mcl-1基因对感染不同毒力结核杆菌小鼠腹腔巨噬细胞凋亡的影响。方法:分别用制备好的新疆地区流行的优势强毒结核分枝杆菌临床分离株(简称强毒株)、结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv(简称H37Rv)、结核分枝杆菌国际标准无毒株H37Ra(简称H37Ra)和卡介苗(BCG)菌悬液感染BALB/c小鼠,再以筛选并构建好的Mcl-1-shRNA作用于感染的小鼠模型,同时设立相应对照组,于作用后1 d、3 d、5 d和7 d提取小鼠腹腔巨噬细胞,应用实时荧光定量PCR和Western blot检测各组小鼠腹腔巨噬细胞中Mcl-1 mRNA和蛋白的表达;应用流式细胞术检测各组巨噬细胞的凋亡水平。结果:小鼠被不同毒力的结核杆菌感染后其腹腔巨噬细胞中Mcl-1 mRNA和蛋白的表达水平均有不同程度的升高,其中以感染了强毒株和H37Rv的腹腔巨噬细胞升高最为明显(P<0.05);应用RNA干扰技术沉默Mcl-1基因后,Mcl-1mRNA和蛋白的表达水平明显低于对照组(P<0.05);流式细胞术分析显示,下调Mcl-1基因的表达可诱导小鼠腹腔巨噬细胞凋亡。结论:应用Mcl-1-shRNA可有效沉默Mcl-1在感染了不同毒力结核杆菌小鼠腹腔巨噬细胞中的表达,并能上调巨噬细胞的凋亡水平。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 MCL-1基因 腹腔巨噬细胞 RNA干扰 细胞凋亡

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Mcl-1信号通路阻断剂对H37Rv感染小鼠巨噬细胞凋亡的影响 被引量：5

9

作者 张宇晴 王新敏 +8 位作者 王婵 王飞雨 王小芳 赵瑾 吴芳 吴江东 季榕 张万江 章乐 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2059-2064,共6页

目的:探讨Mcl-1信号通路阻断剂在结核分枝杆菌H37Rv感染小鼠模型中对Mcl-1表达、巨噬细胞凋亡情况及结核分枝杆菌的影响。方法:小鼠腹腔注射H37Rv菌悬液,建立感染小鼠模型,针对Mcl-1的信号通路选用JAK/STAT信号通路阻断剂AG490、MAPK信... 目的:探讨Mcl-1信号通路阻断剂在结核分枝杆菌H37Rv感染小鼠模型中对Mcl-1表达、巨噬细胞凋亡情况及结核分枝杆菌的影响。方法:小鼠腹腔注射H37Rv菌悬液,建立感染小鼠模型,针对Mcl-1的信号通路选用JAK/STAT信号通路阻断剂AG490、MAPK信号通路阻断剂PD98059和PI3K信号通路阻断剂LY294002用腹腔注射方式作用于各组感染小鼠模型,分为H37Rv感染组、AG490处理组、PD98059处理组、LY294002处理组和对照组。通过细胞抗酸染色观察结核分枝杆菌H37Rv感染小鼠腹腔巨噬细胞的动物模型是否建立成功;通过免疫细胞化学检测结核分枝杆菌H37Rv感染巨噬细胞的Mcl-1表达情况,使用流式细胞技术检测各组巨噬细胞的凋亡率,采用结核分枝杆菌菌落计数来判断巨噬细胞凋亡对结核分枝杆菌的清除效果。结果:细胞抗酸染色结果可见感染的巨噬细胞内散在排列的红色短小抗酸结核分枝杆菌。免疫细胞化学结果显示H37Rv感染组、AG490处理组和LY294002处理组中的Mcl-1蛋白为强阳性表达,PD98059处理组中Mcl-1蛋白为弱阳性表达,对照组Mcl-1蛋白为阴性表达。流式细胞术检测发现H37Rv感染组巨噬细胞凋亡率较对照组高,PD98059处理组的凋亡率显著高于各组,差异显著(P<0.05)。结核分枝杆菌菌落计数结果显示PD98059处理组对H37Rv菌株抑菌作用最明显。结论:Mcl-1信号通路阻断剂通过抑制JAK/STAT、MAPK和PI3K信号通路增加结核分枝杆菌H37Rv感染巨噬细胞的凋亡率,抑制结核分枝杆菌生长;其中,MAPK信号通路干扰Mcl-1的作用最明显,感染的巨噬细胞凋亡率最高,抑菌作用最强。 展开更多

关键词 MCL-1 细胞凋亡 结核分枝杆菌 H37RV 巨噬细胞

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Mcl-1短发夹RNA在Raw264.7细胞内特异性的筛选 被引量：4

10

作者 王婵 王新敏 +6 位作者 王飞雨 张雨晴 曹旭东 吴江东 吴芳 张万江 章乐 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期151-155,共5页

目的:将Mcl-1shRNA转染到Raw264.7细胞内,针对shRNA对小鼠Raw264.7巨噬细胞系中Mcl-1表达的影响,筛选出沉默Mcl-1基因效果最明显的特异性shRNA真核表达质粒。方法:将特异性shRNA经脂质体介导转染小鼠巨噬细胞系Raw264.7;半定量RT-PCR和W... 目的:将Mcl-1shRNA转染到Raw264.7细胞内,针对shRNA对小鼠Raw264.7巨噬细胞系中Mcl-1表达的影响,筛选出沉默Mcl-1基因效果最明显的特异性shRNA真核表达质粒。方法:将特异性shRNA经脂质体介导转染小鼠巨噬细胞系Raw264.7;半定量RT-PCR和Western blot分别检测转染24、48 h后Mcl-1 mRNA水平变化和Mcl-1蛋白表达情况,分析对应不同位点的三对特异性shRNA片段对Mcl-1的沉默效果。结果:特异性shRNA片段在24、48 h均能有效降低Mcl-1 mRNA和蛋白水平,沉默效率高于正常组、脂质体组和阴性对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);对应不同位点的三对shRNA真核表达质粒,其中Mcl-1 shRNA3对Mcl-1 mRNA和蛋白的抑制作用均最强。结论:RNA干扰技术可有效下调小鼠Raw264.7巨噬细胞系中Mcl-1 mRNA水平,明显下调Mcl-1蛋白表达。成功筛选出了沉默Mcl-1基因效果最明显的特异性shRNA真核表达质粒。 展开更多

关键词 MCL-1 RNA干扰 RAW264.7

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肺结核病的快速实验室诊断 被引量：1

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作者 袁俐 邢建新 +4 位作者 杨军 吴万贵 巫志坚 潘景峰 王宏 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期F0003-F0003,共1页

关键词 实验室诊断 肺结核病 TUBERCULOSIS 结核分枝杆菌 PCR技术检测 肺结核患者 临床诊断 直接检测 痰培养 DNA检测

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靶向沉默巨噬细胞中 Mcl-1基因 shRNA表达质粒的构建与鉴定 被引量：2

12

作者 王婵 王新敏 +6 位作者 王飞雨 张雨晴 曹旭东 吴江东 吴芳 张万江 章乐 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期558-564,共7页

目的研究髓样细胞白血病-1(myeloid cell leukemia-1,Mcl-1)基因在小鼠巨噬细胞Raw264.7和人巨噬细胞THP-1中的表达情况,筛选出表达含量高的细胞株作为实验用细胞,根据筛选的结果构建靶向小鼠Mcl-1基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达质粒... 目的研究髓样细胞白血病-1(myeloid cell leukemia-1,Mcl-1)基因在小鼠巨噬细胞Raw264.7和人巨噬细胞THP-1中的表达情况,筛选出表达含量高的细胞株作为实验用细胞,根据筛选的结果构建靶向小鼠Mcl-1基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达质粒进行转染,最后筛选出沉默Mcl-1基因效果最明显的shRNA表达质粒。方法利用半定量RT-PCR和蛋白质免疫印迹(Western blotting)分别检测两种巨噬细胞中Mcl-1mRNA和蛋白表达情况。采用小分子干扰RNA(siRNA)软件设计3个针对Mcl-1基因不同位点的shRNA片段,由公司构建携带此shRNA片段的真核表达质粒(Mcl-1shRNA1-3),然后通过脂质体将真核表达质粒载体转染到小鼠巨噬细胞株Raw264.7中,24、48h后通过倒置荧光显微镜观察转染效果,并分别采用实时定量PCR和Western blot检测Mcl-1mRNA和蛋白表达情况。结果小鼠巨噬细胞Raw264.7中Mcl-1的mRNA及蛋白质的表达显著高于人巨噬细胞,差异有统计学意义(P<0.05);构建的shRNA表达载体在24、48h均能降低Raw264.7细胞内mcl-1mRNA和蛋白水平,尤其在48h沉默效果最为明显;转染48h后与正常组、脂质体组和阴性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);与Mcl-1shRNA1和Mcl-1shRNA2相比,Mcl-1shRNA3对Mcl-1mRNA和蛋白的沉默作用最强。结论成功筛选出了实验所用细胞Raw264.7及对小鼠巨噬细胞Raw264.7内Mcl-1具有明显沉默效果的靶向Mcl-1shRNA3真核表达质粒。 展开更多

关键词 髓细胞白血病-1基因 RAW264.7细胞 THP-1细胞 结核分枝杆菌 短发夹RNA

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Mcl-1基因与巨噬细胞凋亡相关疾病的研究进展 被引量：4

13

作者 王婵 章乐 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1105-1108,共4页

Mcl-1(myeloid cell Leukemia-1)基因作为Bcl-2家族成员之一,是一种半衰期短且具有高度可调节的分化早期活化基因,是Bcl-2家族成员中唯一含有增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)结构的蛋白分子。Mcl-1在多种组织... Mcl-1(myeloid cell Leukemia-1)基因作为Bcl-2家族成员之一,是一种半衰期短且具有高度可调节的分化早期活化基因,是Bcl-2家族成员中唯一含有增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)结构的蛋白分子。Mcl-1在多种组织及细胞系中表达,是调控凋亡的上游关键因子,在感染的巨噬细胞中高表达,对细胞的生存凋亡、周期及分化调控起着重要的作用。抑制Mcl-1基因的表达或者阻断调节Mcl-1基因表达的信号途径能够有效的诱导细胞凋亡。本文就Mcl-1基因与巨噬细胞凋亡相关疾病的研究进展做一综述,主要以综述该基因在病原感染中的作用为主。 展开更多

关键词 MCL-1基因 细胞凋亡 巨噬细胞 结核分枝杆菌

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SLC11A1基因多态性与新疆喀什地区维吾尔族人群肺结核易感性的相关性研究 被引量：2

14

作者 于潞 杨敏 +6 位作者 吴江东 张萍 孟祥慧 张少杰 吴长新 陈创夫 曹旭东 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2016年第1期52-57,共6页

为研究探讨新疆喀什地区的维吾尔族肺结核患者及健康对照人群SLC11A1基因多态性与肺结核易感性的相关性。选取维吾尔族总样本人数644人,其中肺结核患者251人,健康对照者393人,提取个体DNA样本,并采用测序的分型方法(SBT),对SLC11A1基因... 为研究探讨新疆喀什地区的维吾尔族肺结核患者及健康对照人群SLC11A1基因多态性与肺结核易感性的相关性。选取维吾尔族总样本人数644人,其中肺结核患者251人,健康对照者393人,提取个体DNA样本,并采用测序的分型方法(SBT),对SLC11A1基因的3个单核苷酸多态位点(rs17235409 G>A;rs17235416 TGTG/TGTG>--/--;rs3731865 C>G)进行检测,统计分析检测的结果,研究SLC11A1基因的多态性与维吾尔族人群肺结核易感性的相关性;比较SNPs在维吾尔族样本人群与已报道的汉族样本人群及哈萨克族样本人群之间基因频率的差异。结果显示:(1)维吾尔族样本病例组中SLC11A1基因rs17235409 GG、GA、AA基因型频率分别为84.9%、13.9%、AA 1.2%;健康对照组中分别为87.3%,12.2%,0.5%,logistic回归检测,各基因型P>0.05,无明显统计学差异。病例组中SLC11A1基因rs17235416 TGTG/TGTG、TGTG/-、--/--基因型频率分别为85.5%,13.1%,1.6%;健康对照组中分别为87.0%,12.5%,0.5%,logistic回归检测,各基因型P>0.05无明显统计学差异。病例组中SLC11A1基因rs3731865 CC、CG、GG基因型频率分别是2%、21.9%、76.1%;健康对照组中分别是2.3%、24.9%、72.8%,logistic回归检测,各基因型P>0.05无明显统计学差异。(2)SLC11A1基因rs17235409在本实验维族样本人群与已报道的汉族样本人群中GG、GA、AA基因型频率分别是86.6%、12.9%、0.8%和77.7%、20.4%、1.9%,X2=9.363,P<0.05差异有统计学意义。SLC11A1基因rs17235416在本实验维族样本人群已报道的哈萨克族样本人群中TGTG/TGTG、TGTG/-、--/--基因型频率分别为86.3%、12.7%、0.9%和71.9%、24.5%、3.5%,X2=35.833,P<0.05差异有统计学意义。由此可知:(1)本实验维吾尔族人群SLC11A1基因多态性与肺结核易感性不存在相关性。(2)SLC11A1基因多态位点rs17235409rs17235416基因型频率分布在维吾尔族与汉族之间及维吾尔族与哈萨克族之间存在明显差异。 展开更多

关键词 肺结核 SLC11A1等位基因 多态性 易感性

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结核病实验室诊断技术 被引量：2

15

作者 王仙 袁俐 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2004年第F08期45-48,共4页

关键词 结核病 实验室诊断技术 病原学检测 免疫学检测 分子生物学技术

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新疆地区结核分枝杆菌北京/W系和非北京/W系间五种重要蛋白表达差异的初步研究 被引量：1

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作者 李枫 李华 +7 位作者 梁海燕 黄艺 米利古 王仙 李永祥 申爱平 曹帅丽 袁俐 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期244-249,共6页

目的检测北京/W系和非北京/W系结核分枝杆菌HspX、Hsp65、38kDa、Ag85B和MPT64在基因、mRNA和蛋白水平有无差异,探讨5个重要蛋白对于北京/W系菌株广泛流行的可能作用。方法收集结核分枝杆菌临床分离株,其中北京/W系与非北京/W系菌株各30... 目的检测北京/W系和非北京/W系结核分枝杆菌HspX、Hsp65、38kDa、Ag85B和MPT64在基因、mRNA和蛋白水平有无差异,探讨5个重要蛋白对于北京/W系菌株广泛流行的可能作用。方法收集结核分枝杆菌临床分离株,其中北京/W系与非北京/W系菌株各30株,运用DNA直接测序法检测北京/W系和非北京/W系菌株HspX、Hsp65、38kDa、Ag85B和MPT64对应编码基因的PCR扩增产物,采用实时定量PCR技术检测细菌在对数生长期5个重要蛋白的编码基因mRNA的表达水平,使用Western blot技术检测细菌感染巨噬细胞24h后5个蛋白在不同菌株中的表达水平。结果统计分析采用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果 HspX、Hsp65、38kDa、Ag85B和MPT64对应编码基因的PCR扩增产物测序均未发现突变。HspX、Hsp65在北京/W系菌株中的mRNA在对数生长期的表达差异均无统计学意义(P>0.05),而在感染巨噬细胞24h后,细菌中两个热休克蛋白的表达高于非北京/W系菌株,差异有统计学意义(P<0.05)。在细菌感染细胞前后,北京/W系菌株中38kDa、Ag85B的mRNA和蛋白水平的表达均低于非北京/W系菌株,差异有统计学意义(P<0.05)。MPT64在mRNA和蛋白水平的表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论与非北京/W系菌株比较,北京/W系菌株中HspX、Hsp65高表达,38kDa、Ag85B表达较低,推测这几个蛋白表达的改变可能与北京/W系菌株的流行有一定的关系。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 北京 W系菌株 结核分枝杆菌抗原

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HBx及其突变体X17-3对Hippo信号途径表达的影响 被引量：1

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作者 陈琰琰 朱慧芬 +6 位作者 杨道锋 刘晓聪 邓科兰 黄春梅 胡晓萌 姜素华 沈关心 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第16期1704-1707,共4页

目的初步探寻HBx及其不同突变体表达与Hippo信号途径的关系,以及对细胞凋亡的影响。方法 HBx及其突变体载体转染人正常肝细胞系L02,转染48 h后,提取总蛋白,Western blot检测细胞中Hippo信号途径MST1、YAP(yes-associated protein)的表达... 目的初步探寻HBx及其不同突变体表达与Hippo信号途径的关系,以及对细胞凋亡的影响。方法 HBx及其突变体载体转染人正常肝细胞系L02,转染48 h后,提取总蛋白,Western blot检测细胞中Hippo信号途径MST1、YAP(yes-associated protein)的表达,磷酸化和去磷酸化的情况。采用Annexin V/PI标记流式细胞术检测细胞凋亡。结果HBx及其突变体载体转染L02细胞48 h后,Western blot结果显示细胞MST1表达下调,p-MST1/2表达上升(P<0.05);YAP表达上升,p-YAP表达下调(P<0.05)。Annexin V/PI标记法流式细胞术结果显示HBx及其突变体能促进L02细胞发生凋亡(P<0.05),其介导的细胞早期凋亡尤为明显。结论 HBx通过Hippo信号通路途径调控下游致癌基因YAP的表达。结合HBx介导的L02细胞凋亡这一结果说明HBx可能通过多种途径调节细胞周期。 展开更多

关键词 HippoYAP 乙型肝炎病毒X蛋白 乙型肝炎病毒 肝癌 细胞凋亡

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结核分枝杆菌标准株mazEF6缺失株的构建 被引量：1

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作者 申爱平 曹帅丽 +2 位作者 王宏 邢建新 袁俐 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2014年第6期715-719,共5页

为构建结核分枝杆菌标准株H37Rv毒素-抗毒素系统maz EF6基因缺失突变株。采用聚合酶链反应(PCR)技术,分别从H37Rv和PUC-19K质粒上扩增出maz EF6基因的同源臂及卡那霉素抗性基因kan基因;应用融合PCR技术将maz EF6基因的同源臂和kan基因... 为构建结核分枝杆菌标准株H37Rv毒素-抗毒素系统maz EF6基因缺失突变株。采用聚合酶链反应(PCR)技术,分别从H37Rv和PUC-19K质粒上扩增出maz EF6基因的同源臂及卡那霉素抗性基因kan基因;应用融合PCR技术将maz EF6基因的同源臂和kan基因进行杂交拼接,获得目的融合片段,并将该融合片段克隆于p MD-19T(simple)载体形成自杀质粒p MD-19T-Δmaz EF6-kan,将构建的自杀质粒转化至大肠杆菌DH5a中;利用电穿孔技术将自杀质粒电转至H37Rv标准株中;并将该菌株涂于卡那霉素抗性改良罗氏培养基,培养3-4周后,刮取能在卡那霉素抗性培养基中生长的结核分枝杆菌单个菌落,以提取的阳性菌株全基因组DNA为模板,PCR扩增克隆片段,并测序。对所获得H37RvΔmaz EF6缺失突变株进行遗传稳定性检测。结果显示,该缺失株在15代内未发生回复性突变,成功获得H37RvΔmaz EF6缺失突变株。由此可知,本研究为今后研究毒素-抗毒素系统maz EF6基因的生物学功能奠定基础。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 毒素-抗毒素系统 缺失突变株

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蠕形螨标本的制作与染色 被引量：1

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作者 李永祥 刘振忠 郑志红 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第2期12-12,共1页

关键词 蠕形螨 虫体标本制作 脂肪类染色法

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结核分枝杆菌肝素结合血凝素(HBHA)的研究进展 被引量：1

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作者 梁海燕 袁俐 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1040-1043,共4页

肝素结合血凝素(HBHA)是结核分枝杆菌的一种表面蛋白,拥有3个功能结构域,其中碳末端在翻译后进行甲基化修饰,这与其免疫学特性有关。它不仅与细菌的黏附作用相关,可通过补体C3介导与巨噬细胞的结合,还通过与上皮细胞结合,在肺外播散型... 肝素结合血凝素(HBHA)是结核分枝杆菌的一种表面蛋白,拥有3个功能结构域,其中碳末端在翻译后进行甲基化修饰,这与其免疫学特性有关。它不仅与细菌的黏附作用相关,可通过补体C3介导与巨噬细胞的结合,还通过与上皮细胞结合,在肺外播散型结核的发生中发挥重要功能,另外在抗肿瘤免疫中也有一定的作用;也可以作为新一代的血清学诊断标识,鉴别诊断活动性与非活动性结核病,并在开发结核新疫苗及抗结核病新药中显示出潜在应用价值。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 肝素结合血凝素 疫苗

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