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TLR4与TLR9在原发性肝癌组织中的表达及意义 被引量：4
1
作者 刘晓聪 朱慧芬 +7 位作者 杨道锋 曹旭东 邓科兰 黄春梅 胡晓萌 陈琰琰 姜素华 沈关心 《山东医药》 CAS 2012年第23期70-72,共3页
目的探讨Toll样受体4(TLR4)、TLR9在肝癌发生、发展中的作用。方法搜集临床经病理证实的肝癌及相应癌旁组织标本、肝血管瘤组织标本,分别用免疫组化法及流式细胞术检测TLR4、TLR9表达。结果肝癌组织中TLR4表达明显低于癌旁及肝血管瘤组... 目的探讨Toll样受体4(TLR4)、TLR9在肝癌发生、发展中的作用。方法搜集临床经病理证实的肝癌及相应癌旁组织标本、肝血管瘤组织标本,分别用免疫组化法及流式细胞术检测TLR4、TLR9表达。结果肝癌组织中TLR4表达明显低于癌旁及肝血管瘤组织,而TLR9表达明显高于癌旁及肝血管瘤组织,P均<0.05。结论TLR4、TLR9与肝癌的发生、发展有关;乙肝病毒可能通过拮抗TLR4表达、激活TLR9通路促进肝癌的进展。 展开更多
关键词 肝肿瘤 原发性肝癌 TOLL样受体4 TOLL样受体9 免疫组织化学法 流式细胞术
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靶向沉默巨噬细胞中 Mcl-1基因 shRNA表达质粒的构建与鉴定 被引量：2
2
作者 王婵 王新敏 +6 位作者 王飞雨 张雨晴 曹旭东 吴江东 吴芳 张万江 章乐 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期558-564,共7页
目的研究髓样细胞白血病-1(myeloid cell leukemia-1,Mcl-1)基因在小鼠巨噬细胞Raw264.7和人巨噬细胞THP-1中的表达情况,筛选出表达含量高的细胞株作为实验用细胞,根据筛选的结果构建靶向小鼠Mcl-1基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达质粒... 目的研究髓样细胞白血病-1(myeloid cell leukemia-1,Mcl-1)基因在小鼠巨噬细胞Raw264.7和人巨噬细胞THP-1中的表达情况,筛选出表达含量高的细胞株作为实验用细胞,根据筛选的结果构建靶向小鼠Mcl-1基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达质粒进行转染,最后筛选出沉默Mcl-1基因效果最明显的shRNA表达质粒。方法利用半定量RT-PCR和蛋白质免疫印迹(Western blotting)分别检测两种巨噬细胞中Mcl-1mRNA和蛋白表达情况。采用小分子干扰RNA(siRNA)软件设计3个针对Mcl-1基因不同位点的shRNA片段,由公司构建携带此shRNA片段的真核表达质粒(Mcl-1shRNA1-3),然后通过脂质体将真核表达质粒载体转染到小鼠巨噬细胞株Raw264.7中,24、48h后通过倒置荧光显微镜观察转染效果,并分别采用实时定量PCR和Western blot检测Mcl-1mRNA和蛋白表达情况。结果小鼠巨噬细胞Raw264.7中Mcl-1的mRNA及蛋白质的表达显著高于人巨噬细胞,差异有统计学意义(P<0.05);构建的shRNA表达载体在24、48h均能降低Raw264.7细胞内mcl-1mRNA和蛋白水平,尤其在48h沉默效果最为明显;转染48h后与正常组、脂质体组和阴性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);与Mcl-1shRNA1和Mcl-1shRNA2相比,Mcl-1shRNA3对Mcl-1mRNA和蛋白的沉默作用最强。结论成功筛选出了实验所用细胞Raw264.7及对小鼠巨噬细胞Raw264.7内Mcl-1具有明显沉默效果的靶向Mcl-1shRNA3真核表达质粒。 展开更多
关键词 髓细胞白血病-1基因 RAW264.7细胞 THP-1细胞 结核分枝杆菌 短发夹RNA
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结核病实验室诊断技术 被引量：2
3
作者 王仙 袁俐 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2004年第F08期45-48,共4页
关键词 结核病 实验室诊断技术 病原学检测 免疫学检测 分子生物学技术
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