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利用融合PCR技术和T载体克隆技术构建结核分枝杆菌PhoPR双组份系统缺失突变载体
被引量：
2
1
作者
王君
吴芳
+6 位作者
柳小玲
梁粟
张培培
章乐
吴江东
曹旭东
张万江
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第3期276-280,共5页
目的基于融合PCR技术(SOE-PCR)、T载体克隆技术,构建结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)双组份系统缺失突变载体的方法。方法利用SOE-PCR技术,将PhoP、PhoR和PhoPR基因上、下游的同源臂与卡那霉素抗性基因融合,构建PhoP、Pho...
目的基于融合PCR技术(SOE-PCR)、T载体克隆技术,构建结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)双组份系统缺失突变载体的方法。方法利用SOE-PCR技术,将PhoP、PhoR和PhoPR基因上、下游的同源臂与卡那霉素抗性基因融合,构建PhoP、PhoR和PhoPR突变片段,然后将突变片段直接与T载体连接,将其转入E.coli DH5α感受态细胞并筛选抗性克隆,进而获得MTB PhoP、PhoR和PhoPR缺失突变载体。结果成功构建MTB PhoPR双组份系统缺失突变载体,与传统方法相比,效率高、周期短。结论基于融合PCR技术和T载体克隆技术成功构建MTB PhoPR双组份系统缺失突变载体,为下一步构建MTB突变株以及相关研究奠定基础。
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关键词
结核分枝杆菌
PhoPR双组份系统
缺失突变株
构建
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职称材料
题名
利用融合PCR技术和T载体克隆技术构建结核分枝杆菌PhoPR双组份系统缺失突变载体
被引量：
2
1
作者
王君
吴芳
柳小玲
梁粟
张培培
章乐
吴江东
曹旭东
张万江
机构
石河子大学医学院病原微生物与免疫学教研室/石河子大学<新疆地方与民族高发病>教育部重点实验室/<西部地区高发人兽共患传染性疾病防治>协同创新中心
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第3期276-280,共5页
基金
国家自然科学基金项目(No.81260261
81160192)
石河子大学高层次人才启动专项(No.RCZX201446)~~
文摘
目的基于融合PCR技术(SOE-PCR)、T载体克隆技术,构建结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)双组份系统缺失突变载体的方法。方法利用SOE-PCR技术,将PhoP、PhoR和PhoPR基因上、下游的同源臂与卡那霉素抗性基因融合,构建PhoP、PhoR和PhoPR突变片段,然后将突变片段直接与T载体连接,将其转入E.coli DH5α感受态细胞并筛选抗性克隆,进而获得MTB PhoP、PhoR和PhoPR缺失突变载体。结果成功构建MTB PhoPR双组份系统缺失突变载体,与传统方法相比,效率高、周期短。结论基于融合PCR技术和T载体克隆技术成功构建MTB PhoPR双组份系统缺失突变载体,为下一步构建MTB突变株以及相关研究奠定基础。
关键词
结核分枝杆菌
PhoPR双组份系统
缺失突变株
构建
Keywords
Mycobacterium tuberculosis
T vector
deletion mutant vector
construction
分类号
R378.91 [医药卫生—病原生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
利用融合PCR技术和T载体克隆技术构建结核分枝杆菌PhoPR双组份系统缺失突变载体
王君
吴芳
柳小玲
梁粟
张培培
章乐
吴江东
曹旭东
张万江
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
2
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