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GFP-Rv2626c融合蛋白表达载体的构建及表达纯化
被引量：
2
1
作者
曹旭东
陈创夫
+1 位作者
张辉
王远志
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第4期361-364,共4页
目的构建含Rv2626c基因的原核表达载体,获得GFP-Rv2626c融合蛋白,为今后开发鉴别结核感染的血清学诊断试剂打下基础。方法以结核杆菌H37Rv基因组DNA为模板,经PCR法扩增得到Rv2626c基因DNA片段。将扩增片段克隆到pGM-T载体中测序,并进一...
目的构建含Rv2626c基因的原核表达载体,获得GFP-Rv2626c融合蛋白,为今后开发鉴别结核感染的血清学诊断试剂打下基础。方法以结核杆菌H37Rv基因组DNA为模板,经PCR法扩增得到Rv2626c基因DNA片段。将扩增片段克隆到pGM-T载体中测序,并进一步将Rv2626c亚克隆到pET28a-GFP中,构建原核重组表达载体pET28a-GFP-Rv2626c。将pET28a-GFP-Rv2626c转化E.coli BL21(DE3),用IPTG诱导目的基因表达,经SDS-PAGE和Western-blot分析和纯化该表达产物。结果经核苷酸序列测定和酶切鉴定,成功构建了重组质粒pET28a-GFP-Rv2626c。用IPTG诱导该质粒转化的E.coliBL21后,获得分子量约46kD的GFP-Rv2626c融合蛋白。经Ni-NTA Agarose试剂盒进行蛋白纯化,获得纯化的GFP-Rv2626c融合蛋白。结论成功制备出重组GFP-Rv2626c融合蛋白,为开发鉴别结核感染的血清学诊断试剂打下了基础。
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关键词
结核分枝杆菌
Rv2626c
GFP
原核表达载体
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职称材料
题名
GFP-Rv2626c融合蛋白表达载体的构建及表达纯化
被引量：
2
1
作者
曹旭东
陈创夫
张辉
王远志
机构
石河子大学医学院医学遗传学教研室/动物科技学院人畜共患病研究室
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第4期361-364,共4页
基金
国际科技合作项目基金(2006DFA33740)
石河子大学科研基金(ZRKX200726)
文摘
目的构建含Rv2626c基因的原核表达载体,获得GFP-Rv2626c融合蛋白,为今后开发鉴别结核感染的血清学诊断试剂打下基础。方法以结核杆菌H37Rv基因组DNA为模板,经PCR法扩增得到Rv2626c基因DNA片段。将扩增片段克隆到pGM-T载体中测序,并进一步将Rv2626c亚克隆到pET28a-GFP中,构建原核重组表达载体pET28a-GFP-Rv2626c。将pET28a-GFP-Rv2626c转化E.coli BL21(DE3),用IPTG诱导目的基因表达,经SDS-PAGE和Western-blot分析和纯化该表达产物。结果经核苷酸序列测定和酶切鉴定,成功构建了重组质粒pET28a-GFP-Rv2626c。用IPTG诱导该质粒转化的E.coliBL21后,获得分子量约46kD的GFP-Rv2626c融合蛋白。经Ni-NTA Agarose试剂盒进行蛋白纯化,获得纯化的GFP-Rv2626c融合蛋白。结论成功制备出重组GFP-Rv2626c融合蛋白,为开发鉴别结核感染的血清学诊断试剂打下了基础。
关键词
结核分枝杆菌
Rv2626c
GFP
原核表达载体
Keywords
Mycobacterium tuberculosis
Rv2626c
GFP
prokaryotic expression
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
GFP-Rv2626c融合蛋白表达载体的构建及表达纯化
曹旭东
陈创夫
张辉
王远志
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
2
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