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新疆绵羊种布鲁氏菌OMP25基因的分子克隆及核苷酸序列的测定
被引量：
3
1
作者
柳建新
陈创夫
田晶华
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2005年第11期6-8,共3页
根据GeneBank库上国际标准菌株绵羊种布鲁氏菌(63/290)的OMP25的基因序列设计引物,用聚合酶链式反应(PCR)技术从新疆绵羊种布鲁氏菌(80/019)基因组DNA中扩增出OMP25基因片段,T4DNA连接酶将其连接于PBS-T克隆载体质粒上,将重组质粒转化...
根据GeneBank库上国际标准菌株绵羊种布鲁氏菌(63/290)的OMP25的基因序列设计引物,用聚合酶链式反应(PCR)技术从新疆绵羊种布鲁氏菌(80/019)基因组DNA中扩增出OMP25基因片段,T4DNA连接酶将其连接于PBS-T克隆载体质粒上,将重组质粒转化到受体菌DH10B中,蓝白斑筛选阳性菌落,结果成功克隆OMP25基因片段,进行核苷酸序列测定,测序结果分析表明:新疆绵羊菌株与国际标准菌株有明显差异。
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关键词
新疆绵羊种布鲁氏菌
OMP25
克隆
核苷酸序列分析
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职称材料
新疆绵羊种布鲁氏菌HtrA基因与GroEL基因的克隆及其原核表达
2
作者
刘辉
陈创夫
+2 位作者
韩亚杰
董玲
许程剑
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期290-294,共5页
根据已发表的牛流产型布鲁氏菌HtrA(High temperature requirment A)基因、GroEL(热休克蛋白)基因设计特异性引物,从新疆绵羊种布鲁氏菌基因组中扩增出HtrA、GroEL基因片段,将HtrA、GroEL基因片段纯化后分别克隆到T载体上测序,结果表明...
根据已发表的牛流产型布鲁氏菌HtrA(High temperature requirment A)基因、GroEL(热休克蛋白)基因设计特异性引物,从新疆绵羊种布鲁氏菌基因组中扩增出HtrA、GroEL基因片段,将HtrA、GroEL基因片段纯化后分别克隆到T载体上测序,结果表明新疆绵羊种布鲁氏菌HtrA基因片段长1542 bp,编码513个氨基酸,与发表的牛种(B.abortus)、羊种(B.melitensis)、猪种(B.suis)的HtrA基因序列的同源性分别为99.68%、99.81%、99.55%。GroEL基因片段长1641 bp,编码546个氨基酸,与B.melitensis、B.suis以及B.abortus GroEL基因的核苷酸序列同源性分别为99.88%、99.82%、99.88%。HtrA基因和GroEL基因与发表的B.abortus、B.melitensis、B.suis的HtrA基因和GroEL基因序列的具有很高的同源性。按正确的阅读框架分别将两基因片段定向克隆到表达载体pET-28a上,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21菌株,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳和western blot分析表明,HtrA、GroEL基因能在大肠杆菌中成功表达,表达的蛋白分子量都约为60 Ku,并能和布鲁氏菌免疫兔子产生的抗体发生特异性的结合。
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关键词
布鲁氏菌
GROEL
克隆
表达
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职称材料
题名
新疆绵羊种布鲁氏菌OMP25基因的分子克隆及核苷酸序列的测定
被引量：
3
1
作者
柳建新
陈创夫
田晶华
机构
石河子大学
动物
科技
学院
新疆
地方与
民族
高
发病
重点
实验室
出处
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2005年第11期6-8,共3页
文摘
根据GeneBank库上国际标准菌株绵羊种布鲁氏菌(63/290)的OMP25的基因序列设计引物,用聚合酶链式反应(PCR)技术从新疆绵羊种布鲁氏菌(80/019)基因组DNA中扩增出OMP25基因片段,T4DNA连接酶将其连接于PBS-T克隆载体质粒上,将重组质粒转化到受体菌DH10B中,蓝白斑筛选阳性菌落,结果成功克隆OMP25基因片段,进行核苷酸序列测定,测序结果分析表明:新疆绵羊菌株与国际标准菌株有明显差异。
关键词
新疆绵羊种布鲁氏菌
OMP25
克隆
核苷酸序列分析
Keywords
Xinjiang Brucella ovis
OMP25
gene cloning
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
新疆绵羊种布鲁氏菌HtrA基因与GroEL基因的克隆及其原核表达
2
作者
刘辉
陈创夫
韩亚杰
董玲
许程剑
机构
石河子大学 动物科技学院新疆地方与民族高发病实验室
石河子大学
生命科学
学院
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期290-294,共5页
基金
国家自然科学基金C02030606
文摘
根据已发表的牛流产型布鲁氏菌HtrA(High temperature requirment A)基因、GroEL(热休克蛋白)基因设计特异性引物,从新疆绵羊种布鲁氏菌基因组中扩增出HtrA、GroEL基因片段,将HtrA、GroEL基因片段纯化后分别克隆到T载体上测序,结果表明新疆绵羊种布鲁氏菌HtrA基因片段长1542 bp,编码513个氨基酸,与发表的牛种(B.abortus)、羊种(B.melitensis)、猪种(B.suis)的HtrA基因序列的同源性分别为99.68%、99.81%、99.55%。GroEL基因片段长1641 bp,编码546个氨基酸,与B.melitensis、B.suis以及B.abortus GroEL基因的核苷酸序列同源性分别为99.88%、99.82%、99.88%。HtrA基因和GroEL基因与发表的B.abortus、B.melitensis、B.suis的HtrA基因和GroEL基因序列的具有很高的同源性。按正确的阅读框架分别将两基因片段定向克隆到表达载体pET-28a上,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21菌株,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳和western blot分析表明,HtrA、GroEL基因能在大肠杆菌中成功表达,表达的蛋白分子量都约为60 Ku,并能和布鲁氏菌免疫兔子产生的抗体发生特异性的结合。
关键词
布鲁氏菌
GROEL
克隆
表达
Keywords
brucella
GroEL
clone
prokaryotic expression
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
新疆绵羊种布鲁氏菌OMP25基因的分子克隆及核苷酸序列的测定
柳建新
陈创夫
田晶华
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2005
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
新疆绵羊种布鲁氏菌HtrA基因与GroEL基因的克隆及其原核表达
刘辉
陈创夫
韩亚杰
董玲
许程剑
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
0
在线阅读
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职称材料
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
统计分析
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