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重组人血管内皮生长因子165在大肠杆菌中的可溶性表达、纯化与体外活性评价
被引量：
2
1
作者
周晓雷
朱重悦
+4 位作者
张世光
李海潮
张竞
王岩勃
邹卫
《科学技术与工程》
北大核心
2016年第1期42-46,共5页
人血管内皮生长因子165(VEGF165)可有效促进血管新生和增加血管通透性,在伤口愈合方面有重要医疗价值。建立获取高纯度、高活性的优质重组VEGF165蛋白的方法具有重要意义。研究利用带有6组氨酸标签的二硫键形成蛋白A(Dsb A)的E.coli表...
人血管内皮生长因子165(VEGF165)可有效促进血管新生和增加血管通透性,在伤口愈合方面有重要医疗价值。建立获取高纯度、高活性的优质重组VEGF165蛋白的方法具有重要意义。研究利用带有6组氨酸标签的二硫键形成蛋白A(Dsb A)的E.coli表达系统实现了Dsb A-VEGF165融合蛋白的可溶性表达;诱导过程中添加5%(v/v)的乙醇可显著提高工程菌中可溶性融合蛋白表达水平。融合蛋白通过Ni亲和层析粗纯,并经牛肠激酶酶切去除标签蛋白。随后利用肝素亲和层析精纯获得重组人VEGF165蛋白。非还原及还原SDS-PAGE电泳检测到分子量为约40 k Da的同源二聚体蛋白,促HUVEC细胞增殖实验显示重组蛋白具有较优的活性,EC50为13 ng/m L。研究实现了Dsb A-VEGF165的在E.coli中可溶性表达,建立了经济、高效的纯化方法,获得了高质量、高活性的重组人VEGF165蛋白。
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关键词
人血管内皮生长因子165
融合蛋白
原核表达
蛋白纯化
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职称材料
题名
重组人血管内皮生长因子165在大肠杆菌中的可溶性表达、纯化与体外活性评价
被引量：
2
1
作者
周晓雷
朱重悦
张世光
李海潮
张竞
王岩勃
邹卫
机构
河北
科技
大学
石家庄沃泰生物科技有限公司
出处
《科学技术与工程》
北大核心
2016年第1期42-46,共5页
基金
河北省科技计划项目(15272401D)
河北科技大学五大平台开放基金课题(SW05)资助
文摘
人血管内皮生长因子165(VEGF165)可有效促进血管新生和增加血管通透性,在伤口愈合方面有重要医疗价值。建立获取高纯度、高活性的优质重组VEGF165蛋白的方法具有重要意义。研究利用带有6组氨酸标签的二硫键形成蛋白A(Dsb A)的E.coli表达系统实现了Dsb A-VEGF165融合蛋白的可溶性表达;诱导过程中添加5%(v/v)的乙醇可显著提高工程菌中可溶性融合蛋白表达水平。融合蛋白通过Ni亲和层析粗纯,并经牛肠激酶酶切去除标签蛋白。随后利用肝素亲和层析精纯获得重组人VEGF165蛋白。非还原及还原SDS-PAGE电泳检测到分子量为约40 k Da的同源二聚体蛋白,促HUVEC细胞增殖实验显示重组蛋白具有较优的活性,EC50为13 ng/m L。研究实现了Dsb A-VEGF165的在E.coli中可溶性表达,建立了经济、高效的纯化方法,获得了高质量、高活性的重组人VEGF165蛋白。
关键词
人血管内皮生长因子165
融合蛋白
原核表达
蛋白纯化
Keywords
human vascular endothelial growth factor 165
prokaryotic expression
fusion protein
protein purification
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
Q812 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组人血管内皮生长因子165在大肠杆菌中的可溶性表达、纯化与体外活性评价
周晓雷
朱重悦
张世光
李海潮
张竞
王岩勃
邹卫
《科学技术与工程》
北大核心
2016
2
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