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检测猪分子伴侣Jiv基因的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR方法的建立
被引量:
2
1
作者
谭学超
郭抗抗
+5 位作者
宁蓬勃
刘伟
曹伟伟
徐磊
武宁
林青
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第11期894-898,共5页
Jiv蛋白是一种与猪瘟病毒(CSFV)复制密切相关的细胞分子伴侣,为检测CSFV感染细胞内分子伴侣Jiv基因表达变化,本研究以猪Jiv基因(DNAJCl4)为参考序列,建立了检测猪分子伴侣JiV基因的SYBRGreenI荧光定量RT.PCR方法。结果显示,所...
Jiv蛋白是一种与猪瘟病毒(CSFV)复制密切相关的细胞分子伴侣,为检测CSFV感染细胞内分子伴侣Jiv基因表达变化,本研究以猪Jiv基因(DNAJCl4)为参考序列,建立了检测猪分子伴侣JiV基因的SYBRGreenI荧光定量RT.PCR方法。结果显示,所建方法的标准曲线相关系数为0.999,扩增效率为103.4%,在10‘~10’拷贝数范围内具有较好的线性关系;对Jiv基N最低可检测到10拷贝,该方法的批内变异系数和批间变异系数均在O.5%以下,具有较高的敏感性和重复性。应用建立的方法对猪多种组织及猪源传代细胞中Jiv基N的表达进行检测,结果显示Jiv基因在所检测的组织和细胞中均有表达,表明所建方法可以用于Jiv基因的检测;同时对CSFV感染猪和阴性猪脾脏中的Jiv基因表达水平进行检测,统计发现CSFV感染猪脾脏中的Jiv基因表达水平显著上调,提示Jiv基因的表达在CSFV复制中发挥着一定的作用。本研究建立的检测猪Jiv基因的荧光定量RT.PCR方法为进一步明确Jiv蛋白在CSFV致病中的作用提供方法支持。
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关键词
Jiv蛋白
猪瘟病毒
荧光定量RT-PCR
SYBR
GreenⅠ
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职称材料
榆林市榆阳区羊体内寄生蠕虫感染情况的初步调查
被引量:
4
2
作者
魏彩艳
孙利军
林青
《畜牧兽医杂志》
2013年第1期1-2,5,共3页
利用寄生虫学完全剖检的方法,对榆林市榆阳区不同品种(陕北绒山羊、小尾寒羊、当地土山羊、当地土绵羊)的羊各40只进行体内寄生虫感染情况的初步调查。结果表明,不同品种的羊肠道寄生虫感染率不同,其中陕北绒山羊感染率为62.5%、小尾寒...
利用寄生虫学完全剖检的方法,对榆林市榆阳区不同品种(陕北绒山羊、小尾寒羊、当地土山羊、当地土绵羊)的羊各40只进行体内寄生虫感染情况的初步调查。结果表明,不同品种的羊肠道寄生虫感染率不同,其中陕北绒山羊感染率为62.5%、小尾寒羊感染率为52.5%、当地土山羊感染率为57.5%、当地土绵羊感染率为40.0%,共检出寄生蠕虫8种,分别为捻转血矛线虫(Hae-monchus contortus)、球鞘毛尾线虫(Trichuris globulosa)、蛇形毛圆线虫(Trichostrongylus colub-riformis)、粗纹食道口线虫(Oesophagostomum asperum)、美丽筒线虫(Gongylonema pulchrum)、扩展莫尼茨绦虫(Moniezia expansaa)、贝氏莫尼茨绦虫(Moniezia benedeni)和细颈囊尾蚴(Cysti-cercus temuicouis)。其中,捻转血矛线虫、球鞘毛尾线虫和粗纹食道口线虫为优势虫种。
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关键词
寄生虫
消化道
感染
绵羊
山羊
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职称材料
奶山羊弓形虫ITS1和529bp基因序列分析
3
作者
阚松鹤
刘侠
+3 位作者
李日飞
朱振邦
梁雪伟
林青
《畜牧兽医杂志》
2015年第1期9-12,共4页
采集关中某羊场奶山羊的血液样品,以提取的血液基因组DNA为模板对弓形虫ITS1及529bp基因进行PCR扩增、测序,并对测序结果进行比对,基于529bp重复序列构建系统进化树。序列分析结果表明,待测样品与GenBank中弓形虫RH虫株的ITS1序列(AY259...
采集关中某羊场奶山羊的血液样品,以提取的血液基因组DNA为模板对弓形虫ITS1及529bp基因进行PCR扩增、测序,并对测序结果进行比对,基于529bp重复序列构建系统进化树。序列分析结果表明,待测样品与GenBank中弓形虫RH虫株的ITS1序列(AY259044)完全一致,与529bp重复序列(FJ656209.1)存在差异;基于529bp重复序列构建的系统进化树分析结果显示,待测样品弓形虫与RH虫株遗传距离最近。该结果为奶山羊弓形虫病的分子流行病学、诊断方法的建立等方面的研究奠定了基础。
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关键词
第一内转录间隔区
529
bp重复序列
奶山羊
弓形虫
序列分析
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职称材料
题名
检测猪分子伴侣Jiv基因的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR方法的建立
被引量:
2
1
作者
谭学超
郭抗抗
宁蓬勃
刘伟
曹伟伟
徐磊
武宁
林青
机构
西北农林科技大学动物医学院
省部共建国家重点实验室培育基地青海省高原放牧家畜营养与生态重点实验室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第11期894-898,共5页
基金
西北农林科技大学基本科研业务费(QN2011109、QN2012018)
陕西省13115科技创新工程重大科技专项(2010ZDKG-71)
青海省高原放牧家畜营养与生态重点实验室开放课题
文摘
Jiv蛋白是一种与猪瘟病毒(CSFV)复制密切相关的细胞分子伴侣,为检测CSFV感染细胞内分子伴侣Jiv基因表达变化,本研究以猪Jiv基因(DNAJCl4)为参考序列,建立了检测猪分子伴侣JiV基因的SYBRGreenI荧光定量RT.PCR方法。结果显示,所建方法的标准曲线相关系数为0.999,扩增效率为103.4%,在10‘~10’拷贝数范围内具有较好的线性关系;对Jiv基N最低可检测到10拷贝,该方法的批内变异系数和批间变异系数均在O.5%以下,具有较高的敏感性和重复性。应用建立的方法对猪多种组织及猪源传代细胞中Jiv基N的表达进行检测,结果显示Jiv基因在所检测的组织和细胞中均有表达,表明所建方法可以用于Jiv基因的检测;同时对CSFV感染猪和阴性猪脾脏中的Jiv基因表达水平进行检测,统计发现CSFV感染猪脾脏中的Jiv基因表达水平显著上调,提示Jiv基因的表达在CSFV复制中发挥着一定的作用。本研究建立的检测猪Jiv基因的荧光定量RT.PCR方法为进一步明确Jiv蛋白在CSFV致病中的作用提供方法支持。
关键词
Jiv蛋白
猪瘟病毒
荧光定量RT-PCR
SYBR
GreenⅠ
Keywords
Jiv protein
CSFV
real-time RT-PCR
SYBR Green I
分类号
S852.4 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
榆林市榆阳区羊体内寄生蠕虫感染情况的初步调查
被引量:
4
2
作者
魏彩艳
孙利军
林青
机构
西北农林科技大学动物医学院
榆林市榆阳区牛家梁镇畜牧兽医工作站
省
部
共建
国家
重点
实验室
培育基地
"
青海省
高原
放牧
家畜
营养与
生态
重点
实验室
"
榆林市牛家梁农场
出处
《畜牧兽医杂志》
2013年第1期1-2,5,共3页
基金
省部共建国家重点实验室培育基地"青海省高原放牧家畜营养与生态重点实验室"开放课题项目基金资助~~
文摘
利用寄生虫学完全剖检的方法,对榆林市榆阳区不同品种(陕北绒山羊、小尾寒羊、当地土山羊、当地土绵羊)的羊各40只进行体内寄生虫感染情况的初步调查。结果表明,不同品种的羊肠道寄生虫感染率不同,其中陕北绒山羊感染率为62.5%、小尾寒羊感染率为52.5%、当地土山羊感染率为57.5%、当地土绵羊感染率为40.0%,共检出寄生蠕虫8种,分别为捻转血矛线虫(Hae-monchus contortus)、球鞘毛尾线虫(Trichuris globulosa)、蛇形毛圆线虫(Trichostrongylus colub-riformis)、粗纹食道口线虫(Oesophagostomum asperum)、美丽筒线虫(Gongylonema pulchrum)、扩展莫尼茨绦虫(Moniezia expansaa)、贝氏莫尼茨绦虫(Moniezia benedeni)和细颈囊尾蚴(Cysti-cercus temuicouis)。其中,捻转血矛线虫、球鞘毛尾线虫和粗纹食道口线虫为优势虫种。
关键词
寄生虫
消化道
感染
绵羊
山羊
Keywords
parasite
digestive tract
infectiom sheep
goat
分类号
S852.71 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
奶山羊弓形虫ITS1和529bp基因序列分析
3
作者
阚松鹤
刘侠
李日飞
朱振邦
梁雪伟
林青
机构
西北农林科技大学动物医学院
青海
大学畜牧兽医科学院
省
部
共建
国家
重点
实验室
培育基地
"
青海省
高原
放牧
家畜
营养与
生态
重点
实验室
"
出处
《畜牧兽医杂志》
2015年第1期9-12,共4页
基金
陕西省农业攻关项目(2013K01-60-02)
西北农青林科技大学"大学生创新性实验计划"项目(1201310712050)
省部共建国家重点实验室培育基地"海省高原放牧家畜营养与生态重点实验室"开放课题项目基金资助
文摘
采集关中某羊场奶山羊的血液样品,以提取的血液基因组DNA为模板对弓形虫ITS1及529bp基因进行PCR扩增、测序,并对测序结果进行比对,基于529bp重复序列构建系统进化树。序列分析结果表明,待测样品与GenBank中弓形虫RH虫株的ITS1序列(AY259044)完全一致,与529bp重复序列(FJ656209.1)存在差异;基于529bp重复序列构建的系统进化树分析结果显示,待测样品弓形虫与RH虫株遗传距离最近。该结果为奶山羊弓形虫病的分子流行病学、诊断方法的建立等方面的研究奠定了基础。
关键词
第一内转录间隔区
529
bp重复序列
奶山羊
弓形虫
序列分析
Keywords
ITS1 (first internal transcribed spacer)
529 bp fragment
dairy goat
Toxoplasma gondii
sequence analysis
分类号
S852.729 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
检测猪分子伴侣Jiv基因的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR方法的建立
谭学超
郭抗抗
宁蓬勃
刘伟
曹伟伟
徐磊
武宁
林青
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
榆林市榆阳区羊体内寄生蠕虫感染情况的初步调查
魏彩艳
孙利军
林青
《畜牧兽医杂志》
2013
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
奶山羊弓形虫ITS1和529bp基因序列分析
阚松鹤
刘侠
李日飞
朱振邦
梁雪伟
林青
《畜牧兽医杂志》
2015
0
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