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检测猪分子伴侣Jiv基因的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR方法的建立 被引量:2
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作者 谭学超 郭抗抗 +5 位作者 宁蓬勃 刘伟 曹伟伟 徐磊 武宁 林青 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期894-898,共5页
Jiv蛋白是一种与猪瘟病毒(CSFV)复制密切相关的细胞分子伴侣,为检测CSFV感染细胞内分子伴侣Jiv基因表达变化,本研究以猪Jiv基因(DNAJCl4)为参考序列,建立了检测猪分子伴侣JiV基因的SYBRGreenI荧光定量RT.PCR方法。结果显示,所... Jiv蛋白是一种与猪瘟病毒(CSFV)复制密切相关的细胞分子伴侣,为检测CSFV感染细胞内分子伴侣Jiv基因表达变化,本研究以猪Jiv基因(DNAJCl4)为参考序列,建立了检测猪分子伴侣JiV基因的SYBRGreenI荧光定量RT.PCR方法。结果显示,所建方法的标准曲线相关系数为0.999,扩增效率为103.4%,在10‘~10’拷贝数范围内具有较好的线性关系;对Jiv基N最低可检测到10拷贝,该方法的批内变异系数和批间变异系数均在O.5%以下,具有较高的敏感性和重复性。应用建立的方法对猪多种组织及猪源传代细胞中Jiv基N的表达进行检测,结果显示Jiv基因在所检测的组织和细胞中均有表达,表明所建方法可以用于Jiv基因的检测;同时对CSFV感染猪和阴性猪脾脏中的Jiv基因表达水平进行检测,统计发现CSFV感染猪脾脏中的Jiv基因表达水平显著上调,提示Jiv基因的表达在CSFV复制中发挥着一定的作用。本研究建立的检测猪Jiv基因的荧光定量RT.PCR方法为进一步明确Jiv蛋白在CSFV致病中的作用提供方法支持。 展开更多
关键词 Jiv蛋白 猪瘟病毒 荧光定量RT-PCR SYBR GreenⅠ
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榆林市榆阳区羊体内寄生蠕虫感染情况的初步调查 被引量:4
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作者 魏彩艳 孙利军 林青 《畜牧兽医杂志》 2013年第1期1-2,5,共3页
利用寄生虫学完全剖检的方法,对榆林市榆阳区不同品种(陕北绒山羊、小尾寒羊、当地土山羊、当地土绵羊)的羊各40只进行体内寄生虫感染情况的初步调查。结果表明,不同品种的羊肠道寄生虫感染率不同,其中陕北绒山羊感染率为62.5%、小尾寒... 利用寄生虫学完全剖检的方法,对榆林市榆阳区不同品种(陕北绒山羊、小尾寒羊、当地土山羊、当地土绵羊)的羊各40只进行体内寄生虫感染情况的初步调查。结果表明,不同品种的羊肠道寄生虫感染率不同,其中陕北绒山羊感染率为62.5%、小尾寒羊感染率为52.5%、当地土山羊感染率为57.5%、当地土绵羊感染率为40.0%,共检出寄生蠕虫8种,分别为捻转血矛线虫(Hae-monchus contortus)、球鞘毛尾线虫(Trichuris globulosa)、蛇形毛圆线虫(Trichostrongylus colub-riformis)、粗纹食道口线虫(Oesophagostomum asperum)、美丽筒线虫(Gongylonema pulchrum)、扩展莫尼茨绦虫(Moniezia expansaa)、贝氏莫尼茨绦虫(Moniezia benedeni)和细颈囊尾蚴(Cysti-cercus temuicouis)。其中,捻转血矛线虫、球鞘毛尾线虫和粗纹食道口线虫为优势虫种。 展开更多
关键词 寄生虫 消化道 感染 绵羊 山羊
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奶山羊弓形虫ITS1和529bp基因序列分析
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作者 阚松鹤 刘侠 +3 位作者 李日飞 朱振邦 梁雪伟 林青 《畜牧兽医杂志》 2015年第1期9-12,共4页
采集关中某羊场奶山羊的血液样品,以提取的血液基因组DNA为模板对弓形虫ITS1及529bp基因进行PCR扩增、测序,并对测序结果进行比对,基于529bp重复序列构建系统进化树。序列分析结果表明,待测样品与GenBank中弓形虫RH虫株的ITS1序列(AY259... 采集关中某羊场奶山羊的血液样品,以提取的血液基因组DNA为模板对弓形虫ITS1及529bp基因进行PCR扩增、测序,并对测序结果进行比对,基于529bp重复序列构建系统进化树。序列分析结果表明,待测样品与GenBank中弓形虫RH虫株的ITS1序列(AY259044)完全一致,与529bp重复序列(FJ656209.1)存在差异;基于529bp重复序列构建的系统进化树分析结果显示,待测样品弓形虫与RH虫株遗传距离最近。该结果为奶山羊弓形虫病的分子流行病学、诊断方法的建立等方面的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 第一内转录间隔区 529 bp重复序列 奶山羊 弓形虫 序列分析
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