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反转录-重组酶介导等温扩增(RT-RAA)快速检测基因2型猪繁殖与呼吸综合征病毒
被引量:
1
1
作者
陈耀
仲欣雨
+8 位作者
吴陈雨
丁雪
黄璟
王欢莉
范忠军
孙静
陈星逸
余树培
夏文龙
《中国动物检疫》
CAS
2023年第1期121-127,共7页
为建立一种基因2型猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的快速检测方法,根据其ORF6基因保守序列设计了3对特异性引物,通过引物筛选及条件优化,建立了基因2型PRRSV的反转录-重组酶介导...
为建立一种基因2型猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的快速检测方法,根据其ORF6基因保守序列设计了3对特异性引物,通过引物筛选及条件优化,建立了基因2型PRRSV的反转录-重组酶介导等温扩增(reverse transcription recombinase-aided isothermal amplification,RT-RAA)快速检测方法。结果显示:该方法在40℃恒温孵育25 min即可完成靶序列扩增;特异性强,和猪伪狂犬病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒均无交叉反应;灵敏度高,最低检出限为2×10^(0)TCID_(50)/μL,是常规RT-PCR方法的10倍;应用该方法对39份疑似PRRSV感染的临床样品进行检测,检出阳性样品25份,和实验室前期建立的荧光定量RT-PCR方法检测结果一致。以上结果说明,本研究建立的RT-RAA检测方法简便快速、特异性强、灵敏度高、临床适用性好,为PRRSV感染的快速诊断提供了新的技术手段。
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关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒
基因2型
反转录-重组酶介导等温扩增
快速检测
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职称材料
题名
反转录-重组酶介导等温扩增(RT-RAA)快速检测基因2型猪繁殖与呼吸综合征病毒
被引量:
1
1
作者
陈耀
仲欣雨
吴陈雨
丁雪
黄璟
王欢莉
范忠军
孙静
陈星逸
余树培
夏文龙
机构
盐城
师范学院海洋与
生物
工程
学院
盐城市动物生物制剂工程技术研究中心
盐城市
畜牧兽医站
出处
《中国动物检疫》
CAS
2023年第1期121-127,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(31902303)
江苏省高等学校大学生创新创业训练计划项目(202110324112H)。
文摘
为建立一种基因2型猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的快速检测方法,根据其ORF6基因保守序列设计了3对特异性引物,通过引物筛选及条件优化,建立了基因2型PRRSV的反转录-重组酶介导等温扩增(reverse transcription recombinase-aided isothermal amplification,RT-RAA)快速检测方法。结果显示:该方法在40℃恒温孵育25 min即可完成靶序列扩增;特异性强,和猪伪狂犬病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒均无交叉反应;灵敏度高,最低检出限为2×10^(0)TCID_(50)/μL,是常规RT-PCR方法的10倍;应用该方法对39份疑似PRRSV感染的临床样品进行检测,检出阳性样品25份,和实验室前期建立的荧光定量RT-PCR方法检测结果一致。以上结果说明,本研究建立的RT-RAA检测方法简便快速、特异性强、灵敏度高、临床适用性好,为PRRSV感染的快速诊断提供了新的技术手段。
关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒
基因2型
反转录-重组酶介导等温扩增
快速检测
Keywords
PRRSV
genotype-2
RT-RAA
rapid detection
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
反转录-重组酶介导等温扩增(RT-RAA)快速检测基因2型猪繁殖与呼吸综合征病毒
陈耀
仲欣雨
吴陈雨
丁雪
黄璟
王欢莉
范忠军
孙静
陈星逸
余树培
夏文龙
《中国动物检疫》
CAS
2023
1
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