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题名尘螨变应原Der f1植物表达载体的构建及表达
被引量：1
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作者
彭江龙
崔玉宝
王华民
周鹰
牛莉娜
吴洁
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机构
海南医学院微生物学与免疫学教研室
盐城卫生职业技术学院卫生技术研究所
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出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期250-253,共4页
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基金
国家自然科学基金(30860261)
海南省自然科学基金(807070)
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文摘
目的:构建尘螨变应原Der f1植物表达载体并侵染烟草叶片表达。方法:从保存的含pET28a(+)-Der f1的甘油菌株中扩增Der f1基因,并克隆到质粒载体中,提取质粒,进行测序;以ClaⅠ、SalⅠ双酶切,将Der f1基因克隆到马铃薯X病毒(PVX)载体中,构建植物病毒表达载体;将PVX-Der f1转化脓杆菌,挑取Kan、Tet抗性阳性的菌株侵染烟草叶片进行蛋白表达,采用SDS-PAGE和Western blot对表达蛋白进行鉴定和分析。结果:经SDS-PAGE分析,有4株烟草叶片蛋白提取物在34Mr处有特异性蛋白条带;经Western blot进一步验证其变应原,结果显示,烟草叶片中获得的重组蛋白在34Mr处与阳性血清发生特异性结合,而与阴性血清并不发生结合。结论:成功构建了植物病毒表达载体PVX-Der f1并获得表达,为尘螨变应原Der f1的研究提供新思路。
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关键词
尘螨
Derf1
马铃薯X病毒(PVX)
植物表达
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Keywords
Dermatophagoides pteronyssinu
Der fl
Potato virus X （PVX）
Plant expression
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分类号
R384.4
[医药卫生—医学寄生虫学]
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