目的:观察半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)介导的焦亡在脓毒症小鼠神经元损伤中的作用。方法:盲肠结扎穿孔法(cecal ligation and puncture,CLP)建立小鼠脓毒症模型。成年雄性C57BL/6小鼠90只随机分为4组:假手术+生理盐水组(Sham组,15只)...目的:观察半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)介导的焦亡在脓毒症小鼠神经元损伤中的作用。方法:盲肠结扎穿孔法(cecal ligation and puncture,CLP)建立小鼠脓毒症模型。成年雄性C57BL/6小鼠90只随机分为4组:假手术+生理盐水组(Sham组,15只)、假手术+Caspase-1特异性抑制剂Ac-YVAD-CMK组(Sham+CMK组,15只)、脓毒症+生理盐水组(CLP组,30只)和脓毒症+Ac-YVAD-CMK组(CLP+CMK组,30只),术后第7天各组取6只小鼠分离脑组织,检测海马CA1区神经元损伤情况和Caspase-1阳性细胞数,以及海马组织Caspase-1、焦亡标记物Gasdermin-D蛋白(GSDMD)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β和IL-18水平;余下小鼠术后第14天行条件恐惧性实验检测认知功能。结果:与Sham组相比,CLP组小鼠海马CA1区神经元明显损伤,Caspase-1阳性细胞数增多,海马组织中Caspase-1、GSDMD、IL-1β及IL-18含量明显升高(P <0.05),表现为海马依赖的认知功能损伤。与CLP组相比,CLP+CMK组小鼠CA1区神经元无明显损伤,Caspase-1阳性细胞数减少,Caspase-1、GSDMD、IL-1β及IL-18含量降低,认知功能明显改善(P <0.05)。结论:脓毒症可引起小鼠海马神经元损伤及Caspase-1介导的焦亡的激活,抑制Caspase-1介导的焦亡具有神经元保护和认知保护作用。展开更多
目的:探索依托咪酯对丘脑腹侧连接核神经元活性的影响及机制。方法:在4~5周龄的C57BL/6J小鼠急性脑片上,利用全细胞膜片钳方法检测依托咪酯对丘脑腹侧连接核神经元活性的影响。在电流钳模式下记录丘脑腹侧连接核神经元的电生理特性,然...目的:探索依托咪酯对丘脑腹侧连接核神经元活性的影响及机制。方法:在4~5周龄的C57BL/6J小鼠急性脑片上,利用全细胞膜片钳方法检测依托咪酯对丘脑腹侧连接核神经元活性的影响。在电流钳模式下记录丘脑腹侧连接核神经元的电生理特性,然后观察0.5、2.0、8.0μmol/L依托咪酯(分别设为0.5、2.0、8.0μmol/L依托咪酯组)和脂肪乳(脂肪乳组)对丘脑腹侧连接核神经元放电频率和膜电位的影响,记录每个浓度组给药前、给药后和洗脱后的丘脑腹侧连接核神经元放电频率(FB、FD、Fw)及给药前、给药后膜电位(MPB、MPD)。利用木防己苦毒素(picrotoxin,PTX)阻断γ-氨基丁酸A型(gamma-aminobutyric acid Type A,GABAA)受体氯通道,记录给药前、给予亚麻醉浓度(0.5μmol/L)依托咪酯后、继续灌流依托咪酯同时又加入100μmol/L PTX后的丘脑腹侧连接核神经元放电频率(分别为FB.S、FETO和FETO+PTX)。结果:在脂肪乳组中,FB、FD和Fw三者相比,差异无统计学意义(P>0.05)。而在0.5、2.0和8.0μmol/L依托咪酯组中,FD均低于FB,差异均有显著统计学意义(均P<0.01),FW均高于FD,差异均有统计学意义(均P<0.05),并且0.5μmol/L依托咪酯组与8.0μmol/L依托咪酯组相比较,在抑制丘脑腹侧连接核神经元放电频率程度上的差异有统计学意义(P<0.05)。在0.5μmol/L依托咪酯的作用机制实验中,FETO与FB.S相比,差异有显著统计学意义(P<0.01);但FETO+PTX与FB.S.相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:依托咪酯呈浓度依赖性和可逆性地抑制丘脑腹侧连接核神经元的活性;亚麻醉浓度的依托咪酯主要通过作用于GABAA受体来抑制丘脑腹侧连接核神经元的活性。展开更多
文摘目的:探索依托咪酯对丘脑腹侧连接核神经元活性的影响及机制。方法:在4~5周龄的C57BL/6J小鼠急性脑片上,利用全细胞膜片钳方法检测依托咪酯对丘脑腹侧连接核神经元活性的影响。在电流钳模式下记录丘脑腹侧连接核神经元的电生理特性,然后观察0.5、2.0、8.0μmol/L依托咪酯(分别设为0.5、2.0、8.0μmol/L依托咪酯组)和脂肪乳(脂肪乳组)对丘脑腹侧连接核神经元放电频率和膜电位的影响,记录每个浓度组给药前、给药后和洗脱后的丘脑腹侧连接核神经元放电频率(FB、FD、Fw)及给药前、给药后膜电位(MPB、MPD)。利用木防己苦毒素(picrotoxin,PTX)阻断γ-氨基丁酸A型(gamma-aminobutyric acid Type A,GABAA)受体氯通道,记录给药前、给予亚麻醉浓度(0.5μmol/L)依托咪酯后、继续灌流依托咪酯同时又加入100μmol/L PTX后的丘脑腹侧连接核神经元放电频率(分别为FB.S、FETO和FETO+PTX)。结果:在脂肪乳组中,FB、FD和Fw三者相比,差异无统计学意义(P>0.05)。而在0.5、2.0和8.0μmol/L依托咪酯组中,FD均低于FB,差异均有显著统计学意义(均P<0.01),FW均高于FD,差异均有统计学意义(均P<0.05),并且0.5μmol/L依托咪酯组与8.0μmol/L依托咪酯组相比较,在抑制丘脑腹侧连接核神经元放电频率程度上的差异有统计学意义(P<0.05)。在0.5μmol/L依托咪酯的作用机制实验中,FETO与FB.S相比,差异有显著统计学意义(P<0.01);但FETO+PTX与FB.S.相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:依托咪酯呈浓度依赖性和可逆性地抑制丘脑腹侧连接核神经元的活性;亚麻醉浓度的依托咪酯主要通过作用于GABAA受体来抑制丘脑腹侧连接核神经元的活性。
