蛇毒抗高凝状态酶抑制小鼠肝癌H22生长作用的实验研究 被引量：9

1

作者 程明荣 芮景 +2 位作者 徐永强 文尚武 杨会杰 《皖南医学院学报》 CAS 2003年第4期256-258,共3页

目的　探讨蛇毒抗高凝状态酶 (AHCSE)对实验性BALB/C小鼠抗肿瘤 (H2 2肝癌 )的作用。方法　小鼠皮下接种小鼠肝癌H2 2后 ,待肿瘤长成 10mm3 左右分别经腹腔注射AHCSE、5 Fu和肝素 ,每天 1次 ,连续 10天 ,观察瘤重、瘤重抑制率、瘤体积... 目的　探讨蛇毒抗高凝状态酶 (AHCSE)对实验性BALB/C小鼠抗肿瘤 (H2 2肝癌 )的作用。方法　小鼠皮下接种小鼠肝癌H2 2后 ,待肿瘤长成 10mm3 左右分别经腹腔注射AHCSE、5 Fu和肝素 ,每天 1次 ,连续 10天 ,观察瘤重、瘤重抑制率、瘤体积、瘤体积抑瘤率和脾指数。结果　AHCSE有显著的抗肿瘤作用 (P <0 .0 1) ,抗肿瘤效果与 5 Fu接近 ,但副作用较小 ,而肝素效果不佳 ;AHCSE组的脾系数有显著增高。结论　AHCSE有显著抗肿瘤作用 。 展开更多

关键词 蛇毒抗高凝状态酶 小鼠 肝癌 H22 肿瘤生长 实验 抗肿瘤

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蝮蛇毒PCA抗血栓形成的实验研究 被引量：4

2

作者 李曙 张根葆 李伟 《皖南医学院学报》 CAS 2011年第6期440-443,共4页

目的:探讨皖南产蝮蛇毒(AHV)蛋白质C激活物(Protein C Activator,PCA)组分抗血栓效应。方法:家兔40只,随机分为4组,每组10只,颈总动脉取l ml注入血栓形成仪4个(硅化)聚乙烯管中,各管中分别含50、30、10μl(0.6216 mg/ml)蝮蛇毒PCA组分... 目的:探讨皖南产蝮蛇毒(AHV)蛋白质C激活物(Protein C Activator,PCA)组分抗血栓效应。方法:家兔40只,随机分为4组,每组10只,颈总动脉取l ml注入血栓形成仪4个(硅化)聚乙烯管中,各管中分别含50、30、10μl(0.6216 mg/ml)蝮蛇毒PCA组分及50μl生理盐水,37℃条件下以16 r/min在恒流泵上旋转制备血栓;SD大鼠60只,随机分为假手术(SH)组、心肌梗死模型(MI)组(月桂酸钠左心室注入造模)、PCA干预组(MI+PCA组分为0.5 mg/kg、2 mg/kg、8 mg/kg 3个剂量组)、阳性对照组(阿司匹林5mg/kg),每组10只,各实验组动物均于术后3 h颈总动脉取血,按同样方法制备血栓;血液离心,分离血浆检测凝血功能。结果:蝮蛇毒PCA组分大、中、小3剂量组与对照组相比较,血栓的干、湿重量及长度均比对照组减轻(P<0.05);MI+PCA组(2 mg/kg、8 mg/kg)与MI组比较,血栓的干、湿重量长度均有明显差异(P<0.05),与阳性对照组无差异(P>0.05);MI+PCA组(2 mg/kg、8 mg/kg)与MI组比较,PT、APTT均明显增高(P<0.05),FIB显著降低(P<0.05),TT差异无统计学意义(P>0.05)。结论:AHV粗毒中分离纯化的PCA组分可明显干预血栓的形成,其可能通过PCA激活蛋白质C(Protein C)改变凝血功能。 展开更多

关键词 蝮蛇毒 PCA 抗血栓 实验研究

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五步蛇毒PCA在心肌缺血再灌注损伤诊断中的实验研究

3

作者 张娅 张根葆 +2 位作者 季娜 王斐 吴娟 《皖南医学院学报》 CAS 2014年第5期382-385,共4页

目的:探讨五步蛇毒蛋白C激活剂(Protein C activator,PCA)在心肌缺血再灌注损伤诊断中的应用。方法:SD大鼠随机分成对照组(control,C组)和缺血再灌注损伤组(Ischemia reperfusion injury,IR组),每组15只。IR大鼠开胸结扎左冠状动脉前降... 目的:探讨五步蛇毒蛋白C激活剂(Protein C activator,PCA)在心肌缺血再灌注损伤诊断中的应用。方法:SD大鼠随机分成对照组(control,C组)和缺血再灌注损伤组(Ischemia reperfusion injury,IR组),每组15只。IR大鼠开胸结扎左冠状动脉前降支30 min后再灌注120 min,C组大鼠只穿线而不结扎左冠状动脉前降支;记录大鼠在体心电图及心肌组织学改变。留取血液以制备血浆,检测其活化部分凝血酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT);以发色底物法检测血浆蛋白质C(Protein C,PC)活性;酶联免疫吸附法检测血浆游离蛋白质S(plasma free protein S,FPS)的含量。结果:同C组相比,IR组大鼠心肌横纹模糊不清或消失,肌纤维及肌丝明显紊乱且心电图改变明显;IR组大鼠心脏再灌注60 min后血浆APTT明显缩短(P<0.05),血浆PC活性缺血期间明显下降,再灌注60 min明显回升,而再灌注120 min又再次下降(P<0.01);血浆FPS含量缺血期间明显减少,再灌注60 min升高,再灌注120 min又减少(P<0.05,P<0.01)。结论:以五步蛇毒PCA制备的血浆蛋白C活性检测试剂可较灵敏地反映心肌缺血再灌注损伤大鼠血浆蛋白C活性的变化。 展开更多

关键词 蛋白C激活剂 蛋白C 蛋白S 缺血再灌注损伤 心肌

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皖南蝮蛇毒PCA在DIC诊断中的应用

4

作者 段婷 张根葆 周兵 《皖南医学院学报》 CAS 2013年第1期4-7,共4页

目的:探讨皖南蝮蛇毒PCA在DIC诊断中的应用研究。方法:用脂多糖(LPS)100μg/(kg.h)(10 ml/h)的速度持续滴注6 h,建立稳定的兔DIC模型。分别于1 h、2 h、3 h、4 h、6 h时从股动脉取血1 ml,半自动凝血分析仪检测凝血酶原时间(PT)、活化部... 目的:探讨皖南蝮蛇毒PCA在DIC诊断中的应用研究。方法:用脂多糖(LPS)100μg/(kg.h)(10 ml/h)的速度持续滴注6 h,建立稳定的兔DIC模型。分别于1 h、2 h、3 h、4 h、6 h时从股动脉取血1 ml,半自动凝血分析仪检测凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)和纤维蛋白原含量(FIB),发色底物法测定蛋白C(PC)的活性。观察DIC时PC活性水平变化。24 h内死亡的兔,立即取其肝、肾、肺标本;24 h观察期结束后,处死并取兔肝、肾、肺标本,均用10%甲醛固定,经包埋、切片后,行HE染色。结果:兔经持续耳缘静脉滴注LPS后,PC活性显著降低(LPS静脉滴注1 h时即已开始),PT与APTT明显延长、FIB明显降低(LPS静脉滴注2 h时开始)。LPS实验组兔肝、肾、肺病理切片显示细胞水肿、尚伴有灶性出血,肺微血管与肾小球亦见纤维蛋白微血栓形成。结论:本院蛇毒研究所研发的PC活性检测试剂有望成为评价DIC发展及诊断的检测试剂。 展开更多

关键词 内毒素 蛋白C活性 DIC动物模型 PC活性检测试剂

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蛇毒血小板抑制因子急性毒性作用的研究 被引量：1

5

作者 贾金礼 桑金凤 +1 位作者 李曙 张根葆 《皖南医学院学报》 CAS 2017年第2期107-110,共4页

目的:探讨蛇毒血小板抑制因子(AHV-PI)对小鼠的急性毒理反应,研究AHV-PI作为一种新的抗凝药物使用可能存在的毒性反应。方法:采用小鼠半数致死量法,对空白对照组和AHV-PI组未死亡的小鼠连续观察1周,全部处死眼球取血检测血液流变学变化... 目的:探讨蛇毒血小板抑制因子(AHV-PI)对小鼠的急性毒理反应,研究AHV-PI作为一种新的抗凝药物使用可能存在的毒性反应。方法:采用小鼠半数致死量法,对空白对照组和AHV-PI组未死亡的小鼠连续观察1周,全部处死眼球取血检测血液流变学变化。结果:小鼠中毒反应表现随剂量加大而加重,可见肌肉僵硬、运动失衡等。小鼠腹腔注射AHV-PI的LD50及其95%可信限为13.44(12.72~14.16)mg/kg;两肺肉眼可见血液渗出。存活的实验动物在1周观察期后处死,检测不同剂量组均能使全血高、中、低切黏度及血浆黏度降低。结论:血小板抑制因子可以降低血液黏稠度,引起凝血功能障碍,全身各脏器出血倾向加剧,尤其以肺组织出血最为严重,是小鼠死亡最可能的因素。 展开更多

关键词 血小板抑制因子 急性毒性 半数致死量 血浆黏度

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尖吻蝮蛇毒PCA在急性心肌梗死诊断中的应用 被引量：5

6

作者 王斐 张根葆 +3 位作者 黄璐 徐平 皇甫政彤 吴娟 《皖南医学院学报》 CAS 2013年第5期352-355,共4页

目的:探讨尖吻蝮蛇毒血浆蛋白C激活物(protein C activator,PCA)在急性心肌梗死诊断中的应用。方法:30只雄性SD大鼠随机分为3组(n=10),即对照组(C group)、假手术组(S group)和急性心肌梗死组(AMI group);通过大鼠左冠状动脉前降支结扎... 目的:探讨尖吻蝮蛇毒血浆蛋白C激活物(protein C activator,PCA)在急性心肌梗死诊断中的应用。方法:30只雄性SD大鼠随机分为3组(n=10),即对照组(C group)、假手术组(S group)和急性心肌梗死组(AMI group);通过大鼠左冠状动脉前降支结扎术制作急性心肌梗死模型,用Medlab生物信号采集系统检测心电变化。发色底物法测定血浆蛋白C的活性,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血管内皮细胞蛋白C受体(EPCR)的含量,凝血仪检测活化部分凝血活酶时间(APTT)。结果:AMI组心电显示ST段弓背向上抬高,QRS波群形态改变,T波增高;与S组相比较,AMI组大鼠血浆蛋白C活性1 h即显著降低(P<0.05);2 h后EPCR含量明显减少(P<0.05);APTT明显缩短(P<0.05)。结论:以尖吻蝮蛇毒PCA制备的血浆蛋白C活性检测试剂可较灵敏地反映心肌梗死大鼠血浆蛋白C活性的变化。 展开更多

关键词 血浆蛋白C 心肌梗死 PC激活物

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毛细管区带电泳分析五步蛇毒蛋白C激活剂和蛋白C的相互作用 被引量：3

7

作者 孙瑶 包鹏举 张根葆 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期59-63,共5页

建立了毛细管区带电泳分析五步蛇毒蛋白C激活剂(protein C activator,PCA)与血浆蛋白C(protein C,PC)的相互作用。以未涂层毛细管(60.2 cm(有效长度50 cm)×75μm)为分离柱,50 mmol/L Tris-HCl(pH 7.4)为运行缓冲液,于198 nm波长下... 建立了毛细管区带电泳分析五步蛇毒蛋白C激活剂(protein C activator,PCA)与血浆蛋白C(protein C,PC)的相互作用。以未涂层毛细管(60.2 cm(有效长度50 cm)×75μm)为分离柱,50 mmol/L Tris-HCl(pH 7.4)为运行缓冲液,于198 nm波长下检测。对影响五步蛇毒PCA分离的因素(如缓冲液、离子浓度)及在37.5℃下孵育不同时间的五步蛇毒PCA与PC的相互作用进行考察。方法的检出限(以信噪比为3计)为3 mg/L,线性范围为10～300 mg/L。五步蛇毒PCA迁移时间和峰面积的相对标准偏差分别为0.56%和3.8%(n=6)。等体积的五步蛇毒PCA(200 mg/L)与PC(60 mg/L)孵育5 min,其结合率达到最大,且谱图中未见有PC水解的肽链。该五步蛇毒PCA可改变PC空间构象直接激活PC。该方法简单,灵敏度和分辨率高,分析结果为今后快速检测五步蛇毒PCA及其活性提供了重要的理论依据。 展开更多

关键词 毛细管区带电泳 蛋白C激活剂 蛋白C 相互作用 五步蛇毒

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五步蛇咬伤致肢体肿胀与淋巴循环关系的初步研究 被引量：6

8

作者 孙瑶 包鹏举 张根葆 《皖南医学院学报》 CAS 2014年第3期196-198,201,共4页

目的:初步探讨五步蛇咬伤后肢体肿胀与淋巴循环的关系。方法:复制蛇伤肿胀大鼠模型,记录肠系膜集合淋巴管的运动频率。行大鼠乳糜池插管获取淋巴液,经离心、超滤后,应用毛细管电泳对淋巴浆进行分析。结果:大鼠左后肢注射五步蛇毒30 min... 目的:初步探讨五步蛇咬伤后肢体肿胀与淋巴循环的关系。方法:复制蛇伤肿胀大鼠模型,记录肠系膜集合淋巴管的运动频率。行大鼠乳糜池插管获取淋巴液,经离心、超滤后,应用毛细管电泳对淋巴浆进行分析。结果:大鼠左后肢注射五步蛇毒30 min时明显肿胀,30 min后变化不明显,且大鼠在480 min内未死亡。与正常大鼠相比,模型组大鼠肠系膜集合淋巴管的运动频率显著降低(P<0.05),模型组淋巴浆中出现了多种活性组分。结论:五步蛇咬伤后,淋巴循环功能障碍且推动了蛇伤肿胀的发生发展。 展开更多

关键词 五步蛇 淋巴管 淋巴液 毛细管电泳

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尖吻蝮蛇毒抑瘤组分Ⅰ对小鼠肺癌LLC细胞增殖的抑制作用 被引量：3

9

作者 周兵 张根葆 +2 位作者 段婷 周珏 吴娟 《皖南医学院学报》 CAS 2012年第2期87-88,91,共3页

目的:研究尖吻蝮蛇毒抑瘤组分Ⅰ(AAVC-Ⅰ)对小鼠肺癌LLC细胞增殖抑制的影响。方法:以小鼠肺癌LLC细胞为研究对象,采用显微镜观察细胞形态学的变化、MTT法检测药物敏感性、DNA ladder法检测细胞凋亡。结果:AAVC-Ⅰ对LLC细胞有较强的增殖... 目的:研究尖吻蝮蛇毒抑瘤组分Ⅰ(AAVC-Ⅰ)对小鼠肺癌LLC细胞增殖抑制的影响。方法:以小鼠肺癌LLC细胞为研究对象,采用显微镜观察细胞形态学的变化、MTT法检测药物敏感性、DNA ladder法检测细胞凋亡。结果:AAVC-Ⅰ对LLC细胞有较强的增殖抑制作用,抑制程度随药物浓度的增加而增强,其IC50为43.823μg/ml(P<0.05)。琼脂糖电泳观察到细胞DNA的片段化。结论:AAVC-Ⅰ可抑制LLC细胞增殖,诱导其凋亡。 展开更多

关键词 尖吻蝮蛇毒 LLC细胞 细胞凋亡 抗肿瘤

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影响五步蛇毒蛋白C激活剂酰胺酶活性的实验因素 被引量：2

10

作者 孙瑶 张根葆 +2 位作者 包鹏举 吴娟 李曙 《皖南医学院学报》 CAS 2010年第6期409-411,共3页

目的:探讨可能影响皖南地区五步蛇毒蛋白C激活物(PCA)酰胺酶活性的实验因素。方法:分别采用发色底物法和APTT法检测皖南地区五步蛇毒PCA在不同实验条件下的酰胺酶活性。结果:当实验温度为37℃时该PCA活性最稳定,而温度升高或降低均会抑... 目的:探讨可能影响皖南地区五步蛇毒蛋白C激活物(PCA)酰胺酶活性的实验因素。方法:分别采用发色底物法和APTT法检测皖南地区五步蛇毒PCA在不同实验条件下的酰胺酶活性。结果:当实验温度为37℃时该PCA活性最稳定,而温度升高或降低均会抑制其酰胺酶活性(P<0.05);该PCA在pH值为7.0时活性最稳定,偏酸或偏碱则均会明显抑制其活性(P<0.05);但一定浓度范围内的Na+、K+、枸橼酸钠等对其活性无明显影响(P>0.05)。结论:五步蛇毒PCA是一种效价较高、影响因素较少的蛋白C活化试剂。 展开更多

关键词 五步蛇 蛋白C激活物 酰胺酶活性 实验因素

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AAVC-1诱导A549细胞凋亡的线粒体机制研究 被引量：1

11

作者 徐成 张根葆 +1 位作者 周淑艳 桑金凤 《皖南医学院学报》 CAS 2017年第1期5-7,15,共4页

目的:探讨皖南五步蛇蛇毒抑瘤组分Ⅰ(AAVC-1)诱导人非小细胞型肺癌A549细胞凋亡的作用,并分析其可能的线粒体机制。方法:以不同作用浓度的AAVC-1处理A549细胞,采用Annexin V/PI双染流式细胞仪分析法检测A549细胞凋亡百分率;JC-1检测细... 目的:探讨皖南五步蛇蛇毒抑瘤组分Ⅰ(AAVC-1)诱导人非小细胞型肺癌A549细胞凋亡的作用,并分析其可能的线粒体机制。方法:以不同作用浓度的AAVC-1处理A549细胞,采用Annexin V/PI双染流式细胞仪分析法检测A549细胞凋亡百分率;JC-1检测细胞线粒体的膜电位变化,免疫组化检测细胞色素C在线粒体内的分布。结果:不同浓度梯度AAVC-1 1.0、3.0、9.0、20.0μg/m L处理24 h后,与对照组相比,A549细胞早期凋亡率明显增加(P<0.05);线粒体膜电位绿色荧光百分比由(23.01±6.07)%上升至(87.26±9.54)%(P<0.01),荧光显微镜观察到绿色荧光增强;免疫组化显示,随着AAVC-1浓度增加,胞质内细胞色素C平均光密度值明显增加(P<0.05)。结论:AAVC-1可以通过降低线粒体膜电位和促进细胞色素C的释放,激活线粒体通路诱导人非小细胞型肺癌A549的凋亡。 展开更多

关键词 五步蛇毒抑瘤组分Ⅰ 非小细胞型肺癌 线粒体 细胞凋亡

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蝮蛇毒抑制心肌缺血再灌注损伤中血小板活化机制的探讨

12

作者 高恬媛 张根葆 +1 位作者 靳文 季娜 《皖南医学院学报》 CAS 2018年第1期4-6,18,共4页

目的:探讨蝮蛇毒血小板抑制因子(AHV-PI)减弱大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤作用及其可能作用机制。方法:雄性SD大鼠随机分为6组(n=6):正常对照组、I/R模型组、阳性对照组(银杏内酯BN52021,4 mg/kg)、AHV-PI低、中、高剂量组(0.05、0.1、... 目的:探讨蝮蛇毒血小板抑制因子(AHV-PI)减弱大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤作用及其可能作用机制。方法:雄性SD大鼠随机分为6组(n=6):正常对照组、I/R模型组、阳性对照组(银杏内酯BN52021,4 mg/kg)、AHV-PI低、中、高剂量组(0.05、0.1、0.2 mg/kg)。行大鼠心脏冠状动脉左前降支结扎30 min,再灌注120 min制备I/R模型,颈动脉取血并分离血小板,比浊法测定血小板聚集率;TTC染色检测心肌梗死程度;ELISA法测定血小板中血小板活化因子(PAF)含量。结果:与正常对照组相比,I/R组血小板聚集率上升(P<0.05),PAF含量增加(P<0.05),TTC染色梗死面积增加(P<0.01);AHV-PI中、高剂量组血小板聚集率降低,PAF释放减少,心肌缺血面积减少(P<0.05)。结论:AHV-PI可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,其机制可能是通过抑制PAF的释放,进而抑制血小板聚集等实现的。 展开更多

关键词 蛇毒 血小板活化因子 心肌缺血/再灌注

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AHVAC-Ⅰ对人胃癌细胞株SGC-7901生长增殖的影响及作用机制 被引量：3

13

作者 周珏 卢林明 张根葆 《皖南医学院学报》 CAS 2012年第3期191-193,共3页

目的:探讨皖南蝮蛇毒抑瘤组分Ⅰ(AHVAC-Ⅰ)对人胃癌细胞株SGC-7901生长增殖的影响及作用机制。方法:AHVAC-Ⅰ处理SGC-7901细胞。CCK-8法检测其生长抑制作用,光镜观察细胞形态变化,TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果:AHVAC-Ⅰ抑制SGC-7901... 目的:探讨皖南蝮蛇毒抑瘤组分Ⅰ(AHVAC-Ⅰ)对人胃癌细胞株SGC-7901生长增殖的影响及作用机制。方法:AHVAC-Ⅰ处理SGC-7901细胞。CCK-8法检测其生长抑制作用,光镜观察细胞形态变化,TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果:AHVAC-Ⅰ抑制SGC-7901细胞的生长增殖,并呈浓度依赖性,半数抑制浓度(IC50)为58.197μg/ml;镜下可见SGC-7901细胞悬浮、胞核固缩等典型凋亡形态学变化;TUNEL法显示凋亡指数随浓度增加而增加。结论:AHVAC-Ⅰ对人胃癌细胞株SGC-7901具有生长抑制作用,诱导凋亡可能是其主要的作用机制之一。 展开更多

关键词 蝮蛇毒 胃癌细胞 抑制 凋亡

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血凝酶对大鼠离体胸主动脉环收缩作用的影响

14

作者 胡钱国 王海华 +5 位作者 张根葆 孔彦 包鹏举 王静 周萍萍 周华 《皖南医学院学报》 CAS 2009年第6期395-398,共4页

目的:研究血凝酶(Reptilase,RTA)对离体大鼠胸主动脉的收缩作用与机制。方法:制备离体大鼠胸主动脉环,经生物信号采集与分析系统测定血管环的张力变化。分有内皮组和去内皮组,采用累计加药法,观察血凝酶对去氧肾上腺素(PE)和氯化钾(KCl... 目的:研究血凝酶(Reptilase,RTA)对离体大鼠胸主动脉的收缩作用与机制。方法:制备离体大鼠胸主动脉环,经生物信号采集与分析系统测定血管环的张力变化。分有内皮组和去内皮组,采用累计加药法,观察血凝酶对去氧肾上腺素(PE)和氯化钾(KCl)预收缩的胸主动脉环收缩张力的影响。结果:血凝酶对PE预收缩的胸主动脉环产生浓度依赖性的收缩作用,对内皮完整PE预收缩血管环组显著高于去内皮组;而对KCl预收缩的胸主动脉环张力无显著影响;在内皮完整的血管,预孵内皮素转化酶抑制剂磷阿米酮(phosphoramidone,5×10-6mmol/L,PAMD)后,血凝酶对PE预收缩张力明显低于未孵育组(P<0.01);在去内皮的血管环上,应用EDTA(3mmol/L)螯合细胞外Ca2+或LaCl3(100μmol/L)后,可明显阻断血凝酶对PE预收缩作用(P<0.01)。结论:血凝酶对PE预收缩的胸主动脉环的收缩作用呈浓度依赖性,其机制可能为有内皮细胞途径参与,促进内皮素释放,对PE缩血管产生协同效应;还可能与血管平滑肌上有受体操纵性钙通道(receptor-operated calcium chan-nel,ROCC)[1]参与,增加血管平滑肌钙内流有关。 展开更多

关键词 血凝酶 胸主动脉环 钙通道 血管收缩 内皮素 内皮细胞

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