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高表达RNF7增强非小细胞肺癌细胞的PD-1耐药:基于活化NF-kB通路促进CXCL1表达和髓源性抑制细胞的募集 被引量：1
1
作者 钟娜 王会杰 +2 位作者 赵文英 孙珍贵 耿彪 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1704-1711,共8页
目的探讨RNF7在非小细胞肺癌(NSCLC)中调控髓源性抑制细胞(MDSCs)的作用机制。方法采用TIMER2.0数据库和免疫组织化学染色分析(IHC)分析RNF7在NSCLC中表达水平。Kaplan-Meier曲线分析RNF7对肺癌患者预后的影响。通过TIMER2.0数据库和多... 目的探讨RNF7在非小细胞肺癌(NSCLC)中调控髓源性抑制细胞(MDSCs)的作用机制。方法采用TIMER2.0数据库和免疫组织化学染色分析(IHC)分析RNF7在NSCLC中表达水平。Kaplan-Meier曲线分析RNF7对肺癌患者预后的影响。通过TIMER2.0数据库和多重免疫荧光分析评估RNF7的表达与肿瘤免疫细胞浸润水平之间的相关性。通过C57BL/6小鼠建立皮下移植瘤模型,将RNF7过表达对照组(lenti-GFP,n=10)和RNF7过表达组(lenti-RNF7,n=10),RNF7敲低对照组(Ctrl,n=12)和RNF7敲低组(shRNF7,n=12)的CMT-167细胞分别种植到小鼠皮下,对于RNF7敲低对照组和RNF7敲低组的小鼠7 d后给予anti-PD-1治疗或同型IgG治疗,30 d后获取肿瘤组织,观察皮下瘤体积。通过IHC检测肿瘤组织中S100A8+A9、Gr-1的表达水平,流式细胞术检测肿瘤组织中MDSCs的浸润程度。基因集富集分析(GSEA)RNF7在非小细胞肺癌中可能的调控通路。Western blotting和荧光素酶检测RNF7对NF-κB信号通路的影响。ELISA和RT-qPCR观察趋化因子(C-X-C基序)配体1的表达情况。结果TCGA数据库分析显示RNF7在NSCLC中的表达水平显著上调,生存分析显示,肺癌患者中RNF7的表达水平越高,患者的预后越差(P<0.001),TIMER2.0数据库显示RNF7的表达与MDSCs的浸润程度呈正相关(P<0.001)。GESA分析提示,在NSCLC中,RNF7高表达富集于NF-κB信号通路。Western blotting实验显示,RNF7低表达能够抑制NF-κB信号通路激活。通过ELISA和RT-qPCR结果显示,敲除RNF7可显著降低CXCL1的转录和翻译(P<0.01)。小鼠皮下移植瘤实验显示,与对照组相比,过表达RNF7可增加MDSCs的浸润程度,敲除RNF7减少MDSCs的浸润程度(P<0.001)。并减轻MDSCs对效应细胞的免疫抑制功能,从而增强了抗PD-1的功效。结论RNF7通过激活NF-κB信号通路,促进CXCL1的表达,从而使MDSCs趋化募集,使肿瘤产生抗PD-1耐药。 展开更多
关键词 RNF7 非小细胞肺癌 NF-ΚB通路 MDSCS 抗PD-1治疗
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S100A10可促进肺腺癌细胞的增殖和侵袭:基于激活AktmTOR信号通路 被引量：4
2
作者 王会杰 孙珍贵 +1 位作者 赵文英 耿彪 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期733-740,共8页
目的探讨S100钙结合蛋白A10(S100A10)在肺腺癌(LUAD)的表达水平及对患者预后的影响,以及S100A10对肺癌细胞增殖和转移的调控作用和作用机制。方法采用免疫组化技术(IHC)检测S100A10在LUAD及癌旁组织中的表达水平。Western blot、CCK-8和... 目的探讨S100钙结合蛋白A10(S100A10)在肺腺癌(LUAD)的表达水平及对患者预后的影响,以及S100A10对肺癌细胞增殖和转移的调控作用和作用机制。方法采用免疫组化技术(IHC)检测S100A10在LUAD及癌旁组织中的表达水平。Western blot、CCK-8和EdU、Transwell实验分别测定S100A10蛋白的表达水平、细胞增殖和侵袭能力。通过基因集富集分析(GSEA)S100A10在肺腺癌中可能的调控通路。分别将A549-shS100A10和A549-shCtrl细胞,H1299-S100A10和H1299-GFP的细胞注射到裸鼠皮下,观察S100A10的表达水平对肿瘤增殖的影响。结果与癌旁组织相比,肿瘤组织中S100A10的表达水平显著上调,并且S100A10表达水平升高与淋巴结转移、肿瘤分期、远处器官转移有关(P<0.05),而与分化程度、年龄、性别无关(P>0.05)。生存分析显示,肿瘤组织中S100A10表达水平越高,患者的预后越差(P<0.001)。体外实验显示,上调S100A10的表达,促进了肿瘤细胞的增殖和侵袭能力(P<0.001)。GSEA分析显示S100A10高表达显著富集至糖代谢、糖酵解、mTOR信号通路等基因集。葡萄糖消耗及乳酸生成实验表明,上调S100A10促进葡萄糖消耗和乳酸的生成,相反,下调S100A10抑制葡萄糖消耗和乳酸的生成。Western blot实验显示,S100A10能够促进Akt-mTOR信号通路激活。裸鼠移植瘤实验结果表明,上调S100A10的表达促进肿瘤增殖,而下调S100A10的表达则抑制肿瘤增殖(P<0.001)。结论S100A10通过激活Akt-mTOR-糖酵解信号通路,进而促进肿瘤细胞的增殖和侵袭能力。 展开更多
关键词 S100A10 肺腺癌 临床病理参数 Akt-mTOR 糖酵解 肿瘤细胞增殖和侵袭
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CDA-G208A基因多态性对吉西他滨一线治疗肺鳞癌的疗效影响 被引量：2
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作者 何杨 杨魁 栾家杰 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2023年第3期299-306,共8页
目的:探讨CDA-G208A基因多态性对吉西他滨一线治疗肺鳞癌疗效和安全性的影响。方法:回顾性筛选皖南医学院第一附属医院收治的局部晚期或转移性肺鳞癌患者65例,其中G208A基因GG型组(A组)纳入进行CDA-G208A基因检测结果为GG(野生纯合型)患... 目的:探讨CDA-G208A基因多态性对吉西他滨一线治疗肺鳞癌疗效和安全性的影响。方法:回顾性筛选皖南医学院第一附属医院收治的局部晚期或转移性肺鳞癌患者65例,其中G208A基因GG型组(A组)纳入进行CDA-G208A基因检测结果为GG(野生纯合型)患者31例,G208A基因状态未知组(B组)纳入未行检测患者34例,两组患者均接受“吉西他滨+铂类”方案化疗至少2个周期。参照RECIST 1.1标准和NCI-CTC 5.0标准评估疗效和安全性。主要研究终点为无进展生存期(PFS)、总生存时间(OS)。次要研究终点包括客观有效率(ORR)、疾病控制率(DCR)、不良反应和PFS的影响因素。结果:A组和B组DCR为74.5%和50%(P=0.045);A组和B组m PFS分别为6.1个月和5.0个月(P=0.034);A组和B组m OS分别为13.3个月和12.0个月(P=0.388);A组和B组出现Ⅲ-Ⅳ级中性粒细胞减少病例数分别为2例和10例(P=0.017);多因素分析发现Ⅲ-Ⅳ级中性粒细胞减少是影响患者PFS的独立预后因素(P=0.045);G208A基因状态未知组发生Ⅲ-Ⅳ级中性粒细胞的可能更大(P=0.029)。绘制ROC表明CDA-G208A基因的多态性对化疗导致的中性粒细胞减少预测的AUC=0.756。结论:CDAG208A基因非GG型可以通过减慢吉西他滨在体内的代谢率,造成化疗后中性粒细胞减少,严重情况可间接降低吉西他滨的临床疗效。治疗前检测CDA-G208A基因状态对吉西他滨化疗导致的中性粒细胞减少具有一定的预测作用。 展开更多
关键词 CDA-G208A基因 吉西他滨 肺鳞癌
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