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PRDM1调控NF-κB信号通路对巨噬细胞极化和功能的影响
被引量:
6
1
作者
张梦莹
李志
+2 位作者
李雪琴
钟民
吕坤
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第11期1286-1291,共6页
目的:本文旨在探讨正性调节区锌指蛋白1(PRDM1)对小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDMs)极化和功能的影响及其分子机制。方法:体外提取BMDMs作为研究对象,并进行极化诱导,采用荧光定量PCR和Western blot法检测不同极化状态的巨噬细胞PRDM1的表达...
目的:本文旨在探讨正性调节区锌指蛋白1(PRDM1)对小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDMs)极化和功能的影响及其分子机制。方法:体外提取BMDMs作为研究对象,并进行极化诱导,采用荧光定量PCR和Western blot法检测不同极化状态的巨噬细胞PRDM1的表达水平;设计构建PRDM1过表达腺病毒载体,瞬时感染BMDMs,48 h后分别加入IFN-γ/LPS或IL-4刺激诱导为M1/M2型巨噬细胞,采用荧光定量PCR分别检测M1/M2的标志基因iNOS、IL-12、TNF-α、Arg1、YM-1、FIZZ1的表达;ELISA法检测各组细胞上清液炎症因子TNF-α、IL-12和IL-13的表达量;细菌杀伤试验和吞噬试验检测PRDM1过表达对巨噬细胞功能的影响;构建巨噬细胞M2极化模型,将PRDM1过表达腺病毒感染细胞,Western blot法检测核转录因子-κB(NF-κB)信号通路中的下游信号分子p65及IKK蛋白的总体水平及磷酸化水平。结果:荧光定量PCR和Western blot结果显示,M1型巨噬细胞的PRDM1表达水平显著高于M2型巨噬细胞;与阴性对照组相比,过表达PRDM1明显促进巨噬细胞M1型标志分子iNOS、IL-12及TNF-α的表达,能抑制M2型标志分子Arg1、YM-1及FIZZ1的表达;并且显著增强BMDMs的杀菌活性,而降低了BMDMs的吞噬功能。在M2型巨噬细胞中过表达PRDM1后,NF-κB信号通路中p65及IKK磷酸化水平较阴性对照组显著升高。结论:NF-κB信号通路可能参与PRDM1调控巨噬细胞的M1极化。
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关键词
巨噬细胞极化
PRDM1基因
核转录因子ΚB
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题名
PRDM1调控NF-κB信号通路对巨噬细胞极化和功能的影响
被引量:
6
1
作者
张梦莹
李志
李雪琴
钟民
吕坤
机构
皖南医学院
第一
附属
医院
弋
矶
山
医院
中心实验室
皖南医学院第一附属医院弋矶山医院风湿免疫科
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第11期1286-1291,共6页
基金
国家自然科学基金(81772180,81701557)
皖南医学院重点科研项目培育基金(WK2017ZF02)资助。
文摘
目的:本文旨在探讨正性调节区锌指蛋白1(PRDM1)对小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDMs)极化和功能的影响及其分子机制。方法:体外提取BMDMs作为研究对象,并进行极化诱导,采用荧光定量PCR和Western blot法检测不同极化状态的巨噬细胞PRDM1的表达水平;设计构建PRDM1过表达腺病毒载体,瞬时感染BMDMs,48 h后分别加入IFN-γ/LPS或IL-4刺激诱导为M1/M2型巨噬细胞,采用荧光定量PCR分别检测M1/M2的标志基因iNOS、IL-12、TNF-α、Arg1、YM-1、FIZZ1的表达;ELISA法检测各组细胞上清液炎症因子TNF-α、IL-12和IL-13的表达量;细菌杀伤试验和吞噬试验检测PRDM1过表达对巨噬细胞功能的影响;构建巨噬细胞M2极化模型,将PRDM1过表达腺病毒感染细胞,Western blot法检测核转录因子-κB(NF-κB)信号通路中的下游信号分子p65及IKK蛋白的总体水平及磷酸化水平。结果:荧光定量PCR和Western blot结果显示,M1型巨噬细胞的PRDM1表达水平显著高于M2型巨噬细胞;与阴性对照组相比,过表达PRDM1明显促进巨噬细胞M1型标志分子iNOS、IL-12及TNF-α的表达,能抑制M2型标志分子Arg1、YM-1及FIZZ1的表达;并且显著增强BMDMs的杀菌活性,而降低了BMDMs的吞噬功能。在M2型巨噬细胞中过表达PRDM1后,NF-κB信号通路中p65及IKK磷酸化水平较阴性对照组显著升高。结论:NF-κB信号通路可能参与PRDM1调控巨噬细胞的M1极化。
关键词
巨噬细胞极化
PRDM1基因
核转录因子ΚB
Keywords
Macrophage polarization
PRDM1 gene
Nuclear transcription factorκB
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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作者
出处
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被引量
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1
PRDM1调控NF-κB信号通路对巨噬细胞极化和功能的影响
张梦莹
李志
李雪琴
钟民
吕坤
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021
6
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