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抗幽门螺杆菌UreB重组全人源化单域抗体的基因工程表达及分子改造
1
作者 王雪芳 赵阳 +3 位作者 刘竹青 郭乐 仲飞亮 罗学刚 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期666-672,共7页
为了构建针对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)脲酶的单域抗体的基因工程表达系统。首先利用Pymol、ITASSER和ClussPro2等AI辅助工具分析比较了不同抗体与Hp脲酶亚单位B(UreB)之间的分子间作用力,确定了VL全人源化单域抗体UreBAb作... 为了构建针对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)脲酶的单域抗体的基因工程表达系统。首先利用Pymol、ITASSER和ClussPro2等AI辅助工具分析比较了不同抗体与Hp脲酶亚单位B(UreB)之间的分子间作用力,确定了VL全人源化单域抗体UreBAb作为重点研究对象。根据大肠埃希菌密码子偏好性优化了UreBAb基因序列,并将其分别插入pET28a、pE-SUMO等表达载体,转化大肠埃希菌Rosetta(DE3)获得了重组表达菌株,通过IPTG诱导制备重组抗体蛋白,并利用提取的Hp脲酶作为抗原,分析验证了重组表达抗体的活性。SDS-PAGE检测结果显示UreBAb和SUMO-UreBAb均获得了正确的表达,纯化后的蛋白产率分别为0.34和0.41 mg/mL。单向免疫扩散实验结果证实这两种重组表达抗体均与Hp UreB抗原具有良好的亲和力,对脲酶的抑制率分别为51.27%和74.07%。进而,结合AlphaFold2、cluspro2、mCSM-AB、OSPREY和FoldX等人工智能工具,评估分析了影响抗原-抗体复合物稳定性的关键位点及其突变策略,随后进一步构建了9个UreBAb进化突变体表达菌株,活性分析结果显示,这些突变体与抗原的结合活性均得到了提高,其中以I107W突变体的活性提升最为显著,相较于野生型UreBAb,提高了24.95%。本研究为Hp全人源化单域抗体的开发奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 脲酶 全人源化单域抗体 基因工程 AI辅助分子改造
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甘麦大枣露酒制备工艺优化
2
作者 胥强 王佳丽 +5 位作者 王雪芳 杨珍 李寒露 王怡宁 霍超 罗学刚 《中国酿造》 CAS 北大核心 2024年第5期150-155,共6页
为了迎合当前多样性的露酒市场,以甘草、红枣和小麦为原料制备甘麦大枣露酒,对露酒浸提工艺、配方以及澄清条件进行优化,并对产品进行感官评价和理化分析。结果表明,甘麦大枣露酒的最佳浸提工艺为乙醇体积分数60%、料液比24∶100(g∶mL... 为了迎合当前多样性的露酒市场,以甘草、红枣和小麦为原料制备甘麦大枣露酒,对露酒浸提工艺、配方以及澄清条件进行优化,并对产品进行感官评价和理化分析。结果表明,甘麦大枣露酒的最佳浸提工艺为乙醇体积分数60%、料液比24∶100(g∶mL)、超声提取时间60 min、超声提取温度80℃、超声提取功率225 W、浸泡时间2 h。在此条件下,总黄酮含量最高达到了0.39 mg/mL;最佳甘麦大枣露酒配方为每100 mL的甘麦大枣露酒含8 mL甘麦大枣浸提浓缩液、63 mL 60%vol白酒基酒、29 mL纯净水和2 g的白砂糖,之后以0.4 g/L的皂土进行澄清,所制得的甘麦大枣露酒酒体澄清透明,口味鲜明,口感醇厚。 展开更多
关键词 露酒 甘麦大枣汤 制备工艺 澄清
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枸杞多糖及其免疫调节机制研究进展 被引量：6
3
作者 万和林 叶毅丰 +4 位作者 韩抒恒 李长江 宋显炳 詹永成 罗学刚 《中国食物与营养》 2023年第2期52-56,共5页
综述了枸杞多糖免疫调节机制的结构组成、免疫调节机制、增强枸杞多糖免疫调节能力的衍生改造等方面的研究进展,为枸杞多糖的进一步研究提供科学依据。
关键词 枸杞多糖 免疫调节 结构 作用机制 衍生改造
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虾酱中益生菌的筛选及虾肉蛋白发酵饮品的制备与优化 被引量：1
4
作者 杨小涵 秦济昆 +2 位作者 操俊 李月婵 罗学刚 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期112-117,共6页
虾肉是营养均衡的高蛋白质食物来源之一,但其嘌呤含量较高,筛选1株嘌呤代谢强的益生菌制成发酵饮品,将减少高嘌呤带来的隐患,同时兼有虾肉的丰富营养及益生菌肠道微生态健康调节功效的优点。该文从虾酱中筛选获得了1株凝结芽孢杆菌,并... 虾肉是营养均衡的高蛋白质食物来源之一,但其嘌呤含量较高,筛选1株嘌呤代谢强的益生菌制成发酵饮品,将减少高嘌呤带来的隐患,同时兼有虾肉的丰富营养及益生菌肠道微生态健康调节功效的优点。该文从虾酱中筛选获得了1株凝结芽孢杆菌,并命名为Bacillus coagulans GH1-1(菌种保藏编号:CGMCC No.24236)。分析显示,该菌株具有较强的抗逆性及肠道存活能力,生长性能良好,培养16 h左右进入稳定期,且嘌呤代谢能力达86.75%。经单因素及正交试验,确定该菌株虾肉发酵饮品最优工艺为:粉碎、无水乙醇脱脂2次、木瓜蛋白酶酶解、活性炭脱腥脱臭后,与柠檬汁进行复配,以3%的接种量,在37℃发酵12 h,再加入1 g/L的甜菊糖苷进行调配,最终得到一款口味酸甜的虾蛋白发酵饮品。该饮品中蛋白质含量达到2.44 g/100 mL,DPPH清除率为80.03%,对黄嘌呤氧化酶的抑制率为66.67%,提示其具有较好的抗氧化及预防高尿酸血症的作用。该研究为虾肉深加工开发提供了一种新的选择,有利于促进虾产业的多元化创新发展。 展开更多
关键词 虾酱 虾肉蛋白 凝结芽孢杆菌 工艺优化
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植物乳杆菌发酵陈皮柑饮料的工艺优化与分析 被引量：8
5
作者 陈亚楠 汪云阳 +3 位作者 王德行 丁钦然 谭顺冬 罗学刚 《饮料工业》 2019年第5期28-34,共7页
采用陈皮柑果肉为主要原料,应用植物乳杆菌CGMCC8198发酵制作乳酸菌发酵饮料,通过实验得到适宜的配方为陈皮柑净果∶水=5∶3(g/mL)、木糖醇添加量10%、β-环糊精量0.8%。适宜的发酵条件是植物乳杆菌CGMCC8198接种量2%、发酵温度26℃、... 采用陈皮柑果肉为主要原料,应用植物乳杆菌CGMCC8198发酵制作乳酸菌发酵饮料,通过实验得到适宜的配方为陈皮柑净果∶水=5∶3(g/mL)、木糖醇添加量10%、β-环糊精量0.8%。适宜的发酵条件是植物乳杆菌CGMCC8198接种量2%、发酵温度26℃、发酵时间7h。发酵后,饮料中的还原糖较原果汁有所提升,黄酮、多酚含量较原果汁均有所下降。分别在室温(25℃)与冷藏温度(4℃)下储存28d后,4℃饮料活菌数始终维持在108CFU/mL左右,而25℃饮料活菌数则呈现出较大的波动,浮动范围在106~1011CFU/mL之间。此款饮料具有很强抗氧化能力,对ABTS自由基和DPPH自由基的清除率分别高达99.14%和93.58%。发酵后的饮料外观均一、稳定,口感酸甜适中,风味独特,有陈皮柑独特的清香。 展开更多
关键词 陈皮柑 植物乳杆菌 发酵果汁 工艺 理化测定
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一株产黄色素细菌的筛选鉴定及其产黄色素培养条件优化
6
作者 尤田 严佳佳 +3 位作者 彭亚彬 何湾湾 王德培 高强 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2023年第5期184-193,共10页
对一株从芦苇根部土壤中分离得到的产黄色素菌株BX-1进行分离鉴定并优化BX-1菌株产黄色素培养条件。采用形态学观察、分子生物学鉴定方法与单因素、正交试验的试验设计,可得BX-1菌株为革兰氏阳性细菌,盐生谷氨酸杆菌(Glutamicibacter ha... 对一株从芦苇根部土壤中分离得到的产黄色素菌株BX-1进行分离鉴定并优化BX-1菌株产黄色素培养条件。采用形态学观察、分子生物学鉴定方法与单因素、正交试验的试验设计,可得BX-1菌株为革兰氏阳性细菌,盐生谷氨酸杆菌(Glutamicibacter halophytocola);该菌株产胞内黄色素,易溶于甲醇,在411、438、467 nm处存在吸收峰;BX-1菌株最适固态培养条件:20℃光照培养240 h;固态培养基组成为3%谷氨酸钠、3%豆粕粉、0.5%酵母浸出粉、1%氯化钠、0.25%磷酸二氢钾、0.1%硫酸镁、初始pH7.0。 展开更多
关键词 盐生谷氨酸杆菌 黄色素 菌种鉴定 固态培养 条件优化
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肉葡萄球菌表面展示脂肪酶全细胞固定化
7
作者 王华敏 严佳佳 +3 位作者 尤田 薛鲜丽 王德培 高强 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2022年第23期175-182,共8页
为提高奇异变形杆菌脂肪酶在食品、医药等工业领域的利用率,该研究以纤维素结合域为锚定基础,将食品安全菌株肉葡萄球菌及其表面展示脂肪酶进行全细胞固定;利用纤维素结合域与纤维素基质的特异性结合以获得全细胞固定化脂肪酶;探究固定... 为提高奇异变形杆菌脂肪酶在食品、医药等工业领域的利用率,该研究以纤维素结合域为锚定基础,将食品安全菌株肉葡萄球菌及其表面展示脂肪酶进行全细胞固定;利用纤维素结合域与纤维素基质的特异性结合以获得全细胞固定化脂肪酶;探究固定化的最适条件以及固定化后酶学性质。结果表明:在最适的固定化条件(温度16℃、转速100 r/min、时间6 h、pH8.0),全细胞脂肪酶的固定化率可达76%,连续使用10次以后酶活力仍然能够剩余60%左右,且与游离菌相比固定化后其酶的最适温度提高5℃,更能耐受高温。 展开更多
关键词 肉葡萄球菌 表面展示 脂肪酶 异源表达 细胞固定化
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大枣的健康调节功效及其功能食品研发 被引量：8
8
作者 王蕾 周秦 +3 位作者 李子阳 王思雨 罗学刚 周浩 《中国食物与营养》 2018年第4期14-18,共5页
大枣具有很高的药用价值和经济价值,本文综述大枣药用价值及功能食品开发情况。
关键词 大枣 药理活性 功能食品
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重组大肠杆菌产Indigoidine 的发酵优化
9
作者 孙菁兰 王华敏 +4 位作者 才恒 王丽娟 唐巧巧 刘之毅 高强 《现代食品》 2020年第20期131-133,136,共4页
Indigoidine是一种无毒的微生物天然蓝色素。本研究利用重组大肠杆菌DH5α/pBT2-ET-idgS-sfp发酵生产Indigoidine,通过单因素实验优化发酵培养基中的复合氮源比例及含量和两阶段控制温度策略中的变温点。结果表明:优化后的发酵培养基(g&... Indigoidine是一种无毒的微生物天然蓝色素。本研究利用重组大肠杆菌DH5α/pBT2-ET-idgS-sfp发酵生产Indigoidine,通过单因素实验优化发酵培养基中的复合氮源比例及含量和两阶段控制温度策略中的变温点。结果表明:优化后的发酵培养基(g·L-1):胰蛋白胨5,酵母浸粉10,氯化钠10,3-(N-吗啉)丙磺酸5。优化后的变温点为37℃培养7 h时变温至28℃,Indigoidine产量增加了3倍,从初始的0.35 g·L-1提高至1.4 g·L-1。 展开更多
关键词 Indigoidine 培养基优化 变温发酵 大肠杆菌
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