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重组大肠杆菌催化合成谷胱甘肽的研究 被引量:9
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作者 沈立新 魏东芝 尧辉 《西北大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期554-557,共4页
利用PCR技术扩增编码γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(GSH )及谷胱甘肽合成酶(GSH )的基因,并进行了部分序列分析,分别构建了表达质粒pTrc-gsh 和pTrc-gsh ,它们在E.coliBL21中的稳定性很好。在E.coliBL21(pTrc-gsh )∶E.coliBL21(pTrc-gsh )=3... 利用PCR技术扩增编码γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(GSH )及谷胱甘肽合成酶(GSH )的基因,并进行了部分序列分析,分别构建了表达质粒pTrc-gsh 和pTrc-gsh ,它们在E.coliBL21中的稳定性很好。在E.coliBL21(pTrc-gsh )∶E.coliBL21(pTrc-gsh )=3∶1的情况下,谷胱甘肽的合成达3.31g/L,高于工程菌E.coliBL21(pTrc-gsh)催化合成的谷胱甘肽的量(2.51g/L)。利用E.coliBL21(pTrc-gsh )与E.coliBL21(pTrc-gsh )将γ-谷氨酰半胱氨酸的合成与谷胱甘肽的合成分步进行,谷胱甘肽的合成达3.78g/L,比利用E.coliBL21(pTrc-gsh)采用两步法合成的谷胱甘肽高42.1%,解决了GSH对GHI的反馈抑制,并降低了ADP对第二步反应的抑制程度。 展开更多
关键词 Γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶 谷胱甘肽合成酶 克隆 谷胱甘肽合成
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