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医学院校中生物化学与分子生物学实验课教学的改革实践 被引量：12
1
作者 高媛 韩梅 李芳芳 《生物学杂志》 CAS CSCD 2014年第1期103-105,共3页
为进一步提高生物化学与分子生物学实验课的教学质量,培养学生的综合素质和创新能力,在生物化学与分子生物学实验教学中开展了一系列改革,取得了很好的效果。对改革教学法、丰富教学内容、编订新教材、开放实验室及建立完善综合考核制... 为进一步提高生物化学与分子生物学实验课的教学质量,培养学生的综合素质和创新能力,在生物化学与分子生物学实验教学中开展了一系列改革,取得了很好的效果。对改革教学法、丰富教学内容、编订新教材、开放实验室及建立完善综合考核制度等方面改革的必要性及近年来在这些方面实施改革的特色性进行总结,为医学院校实验课教学提供参考。 展开更多
关键词 生物化学与分子生物学 实验教学 教学改革
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生物化学与分子生物学微信教学公众号:现状与建议 被引量：8
2
作者 谢彩凤 涂硕 +1 位作者 杨晓红 黄春洪 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期830-836,共7页
在教育信息化2.0时代背景下,微信公众号因其免费、开放、个性、交互、实时等特色和优势,被很多机构和教师采纳,用于教学服务。生物化学与分子生物学的知识复杂、抽象,理论和技术发展快,是公认的难教难学课程。而微信公众号可通过图文、... 在教育信息化2.0时代背景下,微信公众号因其免费、开放、个性、交互、实时等特色和优势,被很多机构和教师采纳,用于教学服务。生物化学与分子生物学的知识复杂、抽象,理论和技术发展快,是公认的难教难学课程。而微信公众号可通过图文、动画、视频、聊天及对接第3方软件等方式,将生物化学的知识难点简单化、生动化,并以微课学习、图文学习、微测试、微实验等开展移动教学。2015年至今,我国共创建生物化学与分子生物学的教学公众号约50个,微信公众号已经成为生物化学教学圈的新潮流。本文主要介绍了“我爱生化”、“医学生化与分子”、“漫画生物化学”等10个公众号的特色资源和目录架构,展示了基于公众号的多元化教学和服务方式。另外,本文还梳理归纳了公众号管理的经验,提出要“以学生为中心”、围绕学习全过程开展教学服务,坚持原创和目录管理等,为优化公众号的资源与服务提供建议。本文旨在通过对我国生物化学与分子生物学教学公众号的介绍和建议,促进生化教学圈的资源共享、互学、交流和建设,推动教学理念更新、教学方法改进和教学质量提升。 展开更多
关键词 微信公众号 生物化学与分子生物学 交流与资源共享 优化建议
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生物化学与分子生物学课程思政教育的探索与实践——以成都医学院为例 被引量：25
3
作者 马丽萍 王建东 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期537-545,共9页
在全面推进高校课程思政建设的背景下,为落实立德树人的根本任务,各高校纷纷开展专业课程思政建设。以成都医学院的《生物化学与分子生物学》课程为例,文章深度挖掘该门课程所蕴含的思政元素,最终确定了7个典型的思政元素,并进行了相应... 在全面推进高校课程思政建设的背景下,为落实立德树人的根本任务,各高校纷纷开展专业课程思政建设。以成都医学院的《生物化学与分子生物学》课程为例,文章深度挖掘该门课程所蕴含的思政元素,最终确定了7个典型的思政元素,并进行了相应的课程设计,采用案例式教学方法将其在实践中教学。课后,对成都医学院2019级临床医学、麻醉学、儿科学、医学影像学、药学和中药学等6个专业的888名学生发放调查问卷,检测其实施效果。结果表明,所开展的案例式思政教学能够较好地增强学生对该门课程的认可度,帮助学生树立良好的价值观念,初步达到了专业课思政教学的目的。最后,结合实施效果,本文从教学内容和方法的改进、课程思政教学团队的打造和思政教学评价机制的完善等方面展开了积极的探索,以期为专业课程全面实施课程思政提供借鉴。 展开更多
关键词 课程思政 生物化学与分子生物学 立德树人
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分子生物学教学实验中质粒提取原理与电泳图谱的探讨 被引量：3
4
作者 张海涛 刘慧明 +1 位作者 丁航 陈伟珠 《生物学杂志》 CAS CSCD 2008年第6期74-75,共2页
碱裂解法制备质粒是分子生物学常用技术,该实验的一些原理和结果的解释在一些教材中叙述不同。根据多年的实践,我们对实验原理和结果作了些总结,使实验教材中的原理和结果的解释更加科学。
关键词 质粒 碱裂解法 电泳 原理
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微课程应用于高校分子生物学教学的思考 被引量：4
5
作者 张春冬 《安徽农业科学》 CAS 2016年第9期313-314,共2页
微课是随着信息技术的发展兴起的一种新的教育模式,它具有短小精悍的特征。分子生物学作为生物学的前沿学科之一,在生命科学等领域具有举足轻重的地位。因其内容广泛,概念抽象复杂,为高校师生的教与学带来了一定压力。笔者结合分子生物... 微课是随着信息技术的发展兴起的一种新的教育模式,它具有短小精悍的特征。分子生物学作为生物学的前沿学科之一,在生命科学等领域具有举足轻重的地位。因其内容广泛,概念抽象复杂,为高校师生的教与学带来了一定压力。笔者结合分子生物学课程自身特点以及对微课的认识,探究将微课引入分子生物学课堂教学的可行性和必要性。在提升教师的教学质量的同时,提高学生学习该课程的兴趣以及对知识的理解力和掌握度。 展开更多
关键词 微课 分子生物学 传统教学 教学改革
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生物化学课程思政建设亟需创新科学评价体系 被引量：1
6
作者 药立波 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第1期52-52,共1页
当今高等教育改革创新的重要领域是课程思政建设。生物化学是生命科学和医学教育的主干课程,作为生命科学的共同语言和前沿,其历史和当代的快速发展都为课程提供了丰富的思政素材。近年来,全国高校广泛展开的课程思政案例库编写、混合... 当今高等教育改革创新的重要领域是课程思政建设。生物化学是生命科学和医学教育的主干课程,作为生命科学的共同语言和前沿,其历史和当代的快速发展都为课程提供了丰富的思政素材。近年来,全国高校广泛展开的课程思政案例库编写、混合式教学优化思政效果等一系列教改探索,推动着生物化学课程思政建设不断前行。 展开更多
关键词 课程思政 生命科学 生物化学课程 医学教育 混合式教学 案例库 科学评价体系 教改探索
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PBL联合翻转课堂教学法在医学分子生物学实验教学中的探索和应用 被引量：45
7
作者 晏贤春 曹秀丽 +2 位作者 卜歆 韩骅 梁亮 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期115-117,122,共4页
从解决“Dll4胞外区重组蛋白是否能抑制内皮细胞血管形成”这一实际问题出发,探讨基于PBL结合翻转课堂教学法在医学分子生物学实验教学中的应用。与传统孤立地讲授和实施分子生物学实验技术不同,该教学法通过解决科学问题,将DNA提取、PC... 从解决“Dll4胞外区重组蛋白是否能抑制内皮细胞血管形成”这一实际问题出发,探讨基于PBL结合翻转课堂教学法在医学分子生物学实验教学中的应用。与传统孤立地讲授和实施分子生物学实验技术不同,该教学法通过解决科学问题,将DNA提取、PCR、核酸电泳、胶回收等多种常用分子生物学实验技术有机整合,一方面强化实验技术的实际应用,另一方面结合翻转课堂教学模式,进一步增强学生的积极性,提升学生对知识探索的主观能动性,最终达到切实提高学生发现问题、分析问题和解决问题的教学目标。 展开更多
关键词 PBL教学法 翻转课堂 分子生物学 实验教学 教学模式
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三结构域蛋白质37蛋白生物学特征和功能及与疾病发生的关系
8
作者 罗俊蕊 刘志强 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第7期967-978,共12页
三结构域蛋白质37(tripartite motif-containing protein,TRIM37)是一种具有E3泛素连接酶活性的蛋白质,定位于过氧化物酶体膜与中心体,是调节中心体组装的关键蛋白质。TRIM37参与多种生物学过程:TRIM37利用E3泛素连接酶活性泛素化多种... 三结构域蛋白质37(tripartite motif-containing protein,TRIM37)是一种具有E3泛素连接酶活性的蛋白质,定位于过氧化物酶体膜与中心体,是调节中心体组装的关键蛋白质。TRIM37参与多种生物学过程:TRIM37利用E3泛素连接酶活性泛素化多种底物蛋白质,调节泛素化途径影响多条关键信号通路;通过调控中心体的组装,影响纺锤体的形成和染色体分离的准确性,干扰细胞分裂;不仅可以激活雷帕霉素靶蛋白复合物1(mechanistic target of rapamycin complex 1,mTORC1)信号通路,还能通过激活的mTORC1信号通路磷酸化转录因子EB(transcription factor EB,TFEB)调控自噬;通过激活核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)信号通路,在炎症反应、免疫反应、细胞增殖及细胞凋亡中发挥重要作用;TRIM37还参与调节Wnt/β-catenin、磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(hosphatidylinositol-3-kinase/protein kinase B,PI3K/AKT)等癌症进程关键信号通路,促进胆囊癌、肾细胞癌、脑胶质瘤等肿瘤细胞的增殖、转移与侵袭的能力,并且还与某些抗癌化学药物耐药性有关。总之,TRIM37作为一种多功能蛋白质,在机体中的功能复杂多样,各有不同。本文从TRIM37蛋白质的结构和功能、细胞自噬以及主要参与的信号通路出发,针对TRIM37发挥的生物学作用及与疾病发生的关系等方面进行综述,期望深入对涉及TRIM37相关疾病发病机制的理解,能够为后续相关疾病的治疗与研究提供新的靶点。 展开更多
关键词 三结构域蛋白质37 泛素化 中心体 自噬 癌症
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"赋能增效"的分子生物学实验教学改革探索 被引量：7
9
作者 张晓 晏贤春 +2 位作者 张瑞 贾林涛 赵晶 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期569-574,共6页
作为生命科学的前沿学科,分子生物学理论、技术发展迅速,而分子生物学实验课程作为理论与实践的关键衔接,在学生思考和创新能力的培养中发挥着重要作用.通过对教学过程的反馈和思考,分析出当前实验教学中存在的痛点问题.我们围绕"... 作为生命科学的前沿学科,分子生物学理论、技术发展迅速,而分子生物学实验课程作为理论与实践的关键衔接,在学生思考和创新能力的培养中发挥着重要作用.通过对教学过程的反馈和思考,分析出当前实验教学中存在的痛点问题.我们围绕"赋能增效"的改革方向,瞄准提高学生动手、思考能力,提升育人实效的优化目标,进行了教学内容的设置优化、课堂时序的组织重构等一系列改革尝试.教学方案的改革显著增加了学生对知识的理解与掌握,赋予学生更强的思考、学习能力的同时,增强了实验课程的教学效果,提升了学生的科学素养. 展开更多
关键词 分子生物学 实验教学 教学改革 科学素养
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miR-27a靶向调控SFRP1对结直肠癌生物学行为的影响
10
作者 司马学琴 苏延停 曾智 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第3期418-423,共6页
目的探讨miR-27a在结直肠癌中的表达,并分析其靶向调控分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)对人结直肠癌细胞HCT116生物学行为的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测结直肠癌组织及癌旁正常组织中miR-27a和SFRP1 mRNA的表达情况;Western blo... 目的探讨miR-27a在结直肠癌中的表达,并分析其靶向调控分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)对人结直肠癌细胞HCT116生物学行为的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测结直肠癌组织及癌旁正常组织中miR-27a和SFRP1 mRNA的表达情况;Western blot检测结直肠癌组织及癌旁正常组织中SFRP1蛋白表达水平;运用TargetScan预测软件及双荧光素酶报告基因实验检测miR-27a对SFRP1的靶向调控作用;将miR27a模拟物(miR-27a mimic)、miR-27a抑制物(miR-27a inhibitor)及阴性对照(NC)转染至HCT116细胞中;采用qRT-PCR测定各组细胞中miR-27a和SFRP1 mRNA的表达水平;运用四唑盐(MTT)比色法检测各组细胞增殖情况;Transwell实验评估各组细胞侵袭和迁移能力;Western blot检测各组细胞中SFRP1、Wnt/β-catenin信号通路中的关键因子Wnt4和β-catenin的蛋白表达水平。结果与癌旁正常组织相比,miR-27a在结直肠癌组织中高表达,而SFRP1在结直肠癌组织中低表达(P<0.05);TargetScan预测软件和双荧光素酶报告基因实验表明miR-27a靶向调控SFRP1;与NC组相比,miR-27a mimic组miR-27a表达水平升高,细胞增殖、侵袭和迁移能力增强,SFRP1蛋白表达降低,Wnt4和β-catenin蛋白表达增加(P<0.05);与miR-27a mimic组相比,miR-27a inhibitor组细胞内miR-27a表达下降,细胞增殖、侵袭和迁移能力降低,SFRP1蛋白表达增加,Wnt4和β-catenin蛋白表达降低(P<0.05)。结论miR-27a能够靶向调控SFRP1,通过上调SFRP1,阻断下游的Wnt/β-catenin信号通路,抑制结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移等生物学过程,从而发挥抑癌作用。为临床治疗提供了新方向。 展开更多
关键词 miR-27a SFRP1 结直肠癌 Wnt4 Β-CATENIN
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雷帕霉素对肾小管上皮细胞生物学行为的影响及其治疗糖尿病肾病分子机制的初步研究 被引量：4
11
作者 成芳 涂珍珍 +3 位作者 周利利 苏超 王德光 周海胜 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第1期1-6,共6页
目的研究雷帕霉素(RAPA)对肾小管上皮细胞生物学行为的影响及其治疗糖尿病肾病分子机制。方法体外培养肾小管上皮细胞(HK-2),使用转化生长因子β1(TGF-β1)处理HK-2细胞,以建立肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转化(EMT)的细胞模型,并联合R... 目的研究雷帕霉素(RAPA)对肾小管上皮细胞生物学行为的影响及其治疗糖尿病肾病分子机制。方法体外培养肾小管上皮细胞(HK-2),使用转化生长因子β1(TGF-β1)处理HK-2细胞,以建立肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转化(EMT)的细胞模型,并联合RAPA处理HK-2细胞,通过Transwell迁移实验和侵袭实验观察HK-2细胞的迁移和侵袭等细胞生物学行为变化;通过RT-PCR、Western blot法观察EMT分子标志物表达的变化;结合前期建立的糖尿病肾病小鼠模型的肾组织及通过腹腔注射RAPA[1mg/(kg·d)]处理后的模型小鼠肾组织,利用HE染色分析肾组织的病理变化;利用免疫组化检测EMT分子标志物的表达变化。结果 Transwell实验结果表明,TGF-β1诱导HK-2细胞发生迁移和侵袭能力明显增加;联合应用RAPA后,迁移和侵袭能力明显抑制。RT-PCR、Western blot和免疫组化结果显示TGF-β1可以促进间质细胞标志分子Vimentin的表达,而上皮标志分子E-cadherin的表达明显降低;联合应用RAPA后可以抑制TGF-β1诱发的EMT作用。HE染色显示,RAPA治疗后,能显著改善糖尿病肾病小鼠肾小管形态病变。结论 RAPA具有抑制肾小管上皮细胞发生EMT作用。 展开更多
关键词 雷帕霉素 转化生长因子β1 糖尿病肾病 上皮-肌成纤维细胞转分化
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基于补体替代途径对小鼠结直肠癌肝转移模型调控作用的生物信息学分析及实验验证
12
作者 石长玉 李勇 +2 位作者 邓静 朴春梅 金明 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第3期703-715,共13页
目的:基于生物信息学方法分析补体替代途径对小鼠结直肠癌(CRC)肝转移模型的调控作用,并进行实验验证。方法:以“CRC肝转移”为关键词在基因表达综合(GEO)数据库中进行检索,获取GSE81558 GEO数据集,包括正常结肠组织样本、CRC组织样本和... 目的:基于生物信息学方法分析补体替代途径对小鼠结直肠癌(CRC)肝转移模型的调控作用,并进行实验验证。方法:以“CRC肝转移”为关键词在基因表达综合(GEO)数据库中进行检索,获取GSE81558 GEO数据集,包括正常结肠组织样本、CRC组织样本和CRC肝转移组织样本,采用生物信息学方法分析,筛选差异表达基因(DEGs)。使用R和Cytoscape软件进行基因本体论(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析并进行可视化,利用检索相互作用基因/蛋白质(STRING)数据库对DEGs相关蛋白-蛋白相互作用(PPI)进行评估,绘制PPI网络图。12只C57BL/6小鼠脾脏注射SL4肿瘤细胞,并于0、7和14 d后采集小鼠肝组织,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测小鼠肝转移灶中补体途径相关基因表达水平。采用小鼠CRC肝转移模型验证补体信号通路,将小鼠分为对照组、B因子(FB)敲除组(FB^(-/-))和C4因子敲除组(C4^(-/-)),每组6只,检测各组小鼠肝脏质量,HE染色观察对照组和FB^(-/-)组小鼠CRC肝转移灶形态表现并计算肝转移灶面积百分率,免疫组织化学染色法观察对照组和FB^(-/-)组小鼠肝组织中巨噬细胞浸润情况,计算巨噬细胞浸润百分率。结果:正常结肠组织样本与CRC组织样本以及CRC组织样本与CRC肝转移组织样本之间距离较远,提示样本间差异性较大,可以对DEGs进行后续分析。在正常结肠组织样本与CRC组织样本数据集中共筛选出1908个DEGs,其中771个DEGs上调,1137个DEGs下调。在CRC与CRC肝转移数据集中共发现23个上调的DEGs及100个下调的DEGs。GO功能富集分析,与正常结肠组织样本比较,CRC组织样本的DEGs主要集中于有丝分裂细胞周期过程、细胞分裂、对激素的反应、有丝分裂核分裂和对脂质的反应等生物学过程(BP);与CRC组织样本比较,CRC肝转移组织样本的DEGs主要富集于凝血反应过程中,如血小板脱颗粒、凝血调节、急性期反应、止血调节和凝血调节等BP。KEGG信号通路富集分析,与正常结肠组织样本比较,CRC组织样本的DEGs主要富集的信号通路为细胞周期和P53信号通路;与CRC组织样本比较,CRC肝转移组织样本的DEGs主要富集于与补体、凝血级联和代谢相关的信号通路。DEGs的PPIs网络鉴定出的枢纽基因和血液蛋白有关。RT-qPCR法检测,与0 d组比较,7 d组小鼠CRC肝转移组织样本中补体相关基因补体1q(C1q)mRNA表达水平明显降低(P<0.05),补体3(C3)、补体5(C5)、FB和D因子(FD)mRNA表达水平均明显升高(P<0.05或P<0.01),14 d组小鼠CRC肝转移组织样本中补体通路相关基因C1q、补体2(C2)、C3、补体片段3a受体(C3aR)、C5、补体片段5a受体(C5aR)、衰变加速因子(DAF)、FB和FD mRNA表达水平均明显升高(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,FB^(-/-)组小鼠肝脏质量明显降低(P<0.01),C4^(-/-)组小鼠肝脏质量差异无统计学意义(P>0.05)。HE染色观察,与对照组比较,FB^(-/-)组小鼠CRC肝转移灶明显减少,CRC肝转移面积百分率明显降低(P<0.01)。免疫组织化学染色法观察,与对照组比较,FB^(-/-)组小鼠CRC肝转移灶中巨噬细胞浸润减少,巨噬细胞浸润百分率明显降低(P<0.01)。结论:补体级联反应与CRC肝转移有关,替代补体通路调控CRC肝转移,提示该通路是CRC肝转移的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 结直肠癌 肝转移 基因表达综合数据库 生物信息学 差异表达基因
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微粒体释义及生物化学教材中相关表述修改建议
13
作者 毕潇文 黄春洪 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期393-398,共6页
在部分生物化学教材及科研论文中,常出现“微粒体”这个词,且认为微粒体中含有独特的酶类,发挥生物转化功能。但是,在细胞生物学教材中并未把微粒体作为正常的细胞器。为了教材的统一性和科学性,本论文查阅了国内外主要的“细胞生物学... 在部分生物化学教材及科研论文中,常出现“微粒体”这个词,且认为微粒体中含有独特的酶类,发挥生物转化功能。但是,在细胞生物学教材中并未把微粒体作为正常的细胞器。为了教材的统一性和科学性,本论文查阅了国内外主要的“细胞生物学”与“生物化学”教材,“术语在线”和维基百科、Genecard网站等,对于微粒体的定义进行了明确,对生物化学教材相关章节中有关微粒体的表述提出了修改建议。 展开更多
关键词 微粒体 术语在线 生物化学教材 微粒体乙醇氧化系统
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构树新化学成分及生物学活性研究进展 被引量：7
14
作者 丁宇 仇晶 刘小宇 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1327-1331,1337,共6页
构树[Broussonetia papyrifera(L.)Vent.]为桑科(Moraceae)构树属(Broussonetia)植物,分布于中国黄河、长江和珠江流域,也见于越南、日本等国家。构树属于传统中药,植物的各部位均可入药,用于治疗疼痛,水肿,痢疾。对构树化学成分的研究... 构树[Broussonetia papyrifera(L.)Vent.]为桑科(Moraceae)构树属(Broussonetia)植物,分布于中国黄河、长江和珠江流域,也见于越南、日本等国家。构树属于传统中药,植物的各部位均可入药,用于治疗疼痛,水肿,痢疾。对构树化学成分的研究从构树的叶、根和果实中发现了黄酮类、木脂素类及萜类等多种化学成分,其中部分成分具有抗菌、抗氧化、细胞毒及抗炎等活性。现对2000年以来从构树中获得的新化合物及其生物学活性研究成果进行总结,为其进一步研究提供参考。 展开更多
关键词 构树 新化合物 生物学活性
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嗜热脱铁去硫弧菌Pif1解旋酶生物学活性的分子特征分析 被引量：2
15
作者 段晓雷 刘娜女 +2 位作者 付怡欣 闵迅 奚绪光 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期77-88,共12页
已知Pif1解旋酶在维持基因组稳定性方面发挥重要作用,且不同生物Pif1解旋酶具有不同的生物学活性;然而迄今为止,嗜热细菌Pif1解旋酶的生物学活性分子特征的研究尚未见报道。本文运用生物化学与生物物理学前沿技术,系统地研究了嗜热脱铁... 已知Pif1解旋酶在维持基因组稳定性方面发挥重要作用,且不同生物Pif1解旋酶具有不同的生物学活性;然而迄今为止,嗜热细菌Pif1解旋酶的生物学活性分子特征的研究尚未见报道。本文运用生物化学与生物物理学前沿技术,系统地研究了嗜热脱铁去硫弧菌Pif1解旋酶(Defe.Pif1)结合活性与解旋活性的分子特征。通过原核表达纯化系统,本研究获得纯度95%以上、无标签的Defe.Pif1蛋白。利用荧光偏振技术研究Defe.Pif1结合反应的底物特异性,揭示出Defe.Pif1优先结合ss DNA与G4 DNA,并对含3'-尾链的部分双链底物有较强亲和力,其结合反应底物特异性为:ss DNA>G4 DNA>3'-ss DNA-ds DNA≈Y-structure>Other substrates。通过快速停留检测技术研究Defe.Pif1的解旋活性,明确其最适解旋温度为50℃,最佳反应溶液为10 mmol/L Na Cl、3mmol/L DTT、3 mmol/L Mg Cl2及1 mmol/L ATP;进一步的解旋动力学特征分析结果显示,Defe.Pif1可以高效解旋含G4结构的DNA底物,其解旋5'-G4-ds DNA底物时的解旋幅度超过90%,解旋速率也与其解旋5'-ss-ds DNA底物的速率相近,提示Defe.Pif1解旋G4 DNA更接近Bs.Pif1的单体反应模式。此外,本研究还发现Defe.Pif1解旋不同类型复制叉/复制泡底物时拥有独特的解旋倾向性:与解旋其它复制中间体DNA的低效性不同,Defe.Pif1解旋12nt-bubble底物的速率与幅度均较高,暗示12nt-bubble结构很可能是该解旋酶复制中间体的天然底物。上述结果证明,Defe.Pif1不仅具有Pif1解旋酶家族成员共同的结合与解旋G4 DNA等活性特征;而且作为嗜热细菌的解旋酶,它还具有独特的反应条件与解旋底物特异性。本研究为研究Pif1解旋酶家族其它成员的分子特征与生物功能提供了潜在的研究策略,为阐明此类Pif1解旋酶的分子作用机制奠定实验基础。 展开更多
关键词 嗜热脱铁去硫弧菌 Pif1解旋酶 荧光偏振技术 快速停留检测 解旋活性
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牡蛎多糖的制备和生物学活性研究 被引量：41
16
作者 王俊 姚滢 +3 位作者 张建鹏 刘军华 冯伟华 焦炳华 《医学研究生学报》 CAS 2006年第3期217-220,共4页
目的:改进制备工艺,分离、纯化东海近江牡蛎(O strearivu laris Gou ld)得到牡蛎多糖(Oyster polysaccharides,OPs),并探索其生物学活性。方法:采用热碱法提取,以三个剂量组(2.5、5、10mg/m l)进行正常小鼠脾淋巴细胞转化实验、迟发型... 目的:改进制备工艺,分离、纯化东海近江牡蛎(O strearivu laris Gou ld)得到牡蛎多糖(Oyster polysaccharides,OPs),并探索其生物学活性。方法:采用热碱法提取,以三个剂量组(2.5、5、10mg/m l)进行正常小鼠脾淋巴细胞转化实验、迟发型超敏反应(DTH)、自然杀伤细胞(NK)活性测定,抗体形成细胞活性溶血空斑形成细胞实验(PFC)、碳廓清实验、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验、荷瘤小鼠脾淋巴细胞活性测定(MTT法)、红细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性测定。结果:制备得到牡蛎多糖粗品;免疫学实验表明OPs 2.5mg/m l组能有效增加正常小鼠的脾淋巴细胞转化率、对小鼠DHT、NK细胞活性、PFC、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力、荷瘤小鼠脾细胞活性起正向调节。三种浓度实验组均增强小鼠红细胞SOD活性。结论:牡蛎多糖能增强小鼠细胞免疫、体液免疫功能,并有一定的抗肿瘤和抗氧化作用。 展开更多
关键词 牡蛎 多糖 分离纯化 免疫功能 抗肿瘤 超氧化物歧化酶
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白眉蝮蛇去整合素Adinbitor的基因克隆、表达及其部分生物学活性 被引量：19
17
作者 王继红 任凤 +3 位作者 吴毓 田晓光 吴妍宁 赵宝昌 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期745-749,共5页
为了寻找去整合素家族的新成员 ,研究其在抗血栓与抗肿瘤等方面的作用 ,从中国白眉蝮蛇毒腺中提取总RNA进行RT PCR扩增 ,获得了 2 19bp的白眉蝮蛇去整合素基因 .测序结果显示 ,其与韩国的同为蝮蛇去整合素的saxatilin的DNA序列同源性为 ... 为了寻找去整合素家族的新成员 ,研究其在抗血栓与抗肿瘤等方面的作用 ,从中国白眉蝮蛇毒腺中提取总RNA进行RT PCR扩增 ,获得了 2 19bp的白眉蝮蛇去整合素基因 .测序结果显示 ,其与韩国的同为蝮蛇去整合素的saxatilin的DNA序列同源性为 95 8% ,蛋白质序列同源性为 91 8% ,且蛋白质中含有去整合素的特征模体 RGD .将去整合素基因进行克隆、转化与诱导后 ,得到了该蛋白的可溶性高效表达 .经组氨酸亲和层析纯化 ,获得了分子量为 9kD的均质蛋白 ,并将其命名为adinbitor .活性测定结果显示 ,adinbitor能明显抑制由碱性成纤维细胞生长因子诱导的人脐静脉血管内皮细胞ECV30 4的增殖 ,诱导ECV30 4细胞发生凋亡 。 展开更多
关键词 去整合素 基因克隆 细胞增殖 细胞凋亡 血小板聚集
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海洋芽孢杆菌次生代谢产物的分离、鉴定及生物学活性的初步研究 被引量：13
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作者 韩文菊 卢小玲 +2 位作者 许强芝 刘小宇 焦炳华 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1234-1238,共5页
目的:开发药用海洋微生物资源,从微生物代谢产物中获取活性物质。方法:利用硅胶柱、凝胶柱、高效液相等色谱技术对抗菌模型筛选到的活性菌株F81612发酵液的乙酸乙酯浸膏进行分离,通过1HNMR、13CNMR和MS对化合物进行结构鉴定,利用纸片法... 目的:开发药用海洋微生物资源,从微生物代谢产物中获取活性物质。方法:利用硅胶柱、凝胶柱、高效液相等色谱技术对抗菌模型筛选到的活性菌株F81612发酵液的乙酸乙酯浸膏进行分离,通过1HNMR、13CNMR和MS对化合物进行结构鉴定,利用纸片法和四甲基偶氮唑盐比色法对单体化合物进行生物学活性评价。结果和结论:分离鉴定了11个化合物,它们分别为:macrolactinA(1),3-羟基乙酰基吲哚(2),3-吲哚乙醇(3),环(色-脯)二肽(4),环(异亮-色)二肽(5),环(亮-脯)二肽(6),环(亮-缬)二肽(7),环(异亮-脯)二肽(8),环(苯丙-缬)二肽(9),N-苯乙基乙酰胺(10),对羟基苯甲醛(11)。化合物1为主要活性成分,对稻瘟霉、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的MIC值分别为3.6、0.45和6.3μg/ml,对肿瘤细胞株HeLa及HepG2的IC50值分别为2.0和1.8μg/ml。 展开更多
关键词 海洋芽孢杆菌 次生代谢产物 生物学活性
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NT3基因工程细胞经脑脊液途径的耳蜗内生物学效应的初步证明 被引量：14
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作者 高下 王锦玲 +3 位作者 杨安钢 金明 许彦鸣 王枫 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2002年第4期255-257,279,共4页
目的　通过脑脊液途径移植神经营养因子 - 3(NT3)基因工程细胞 ,初步观察其耳蜗内听觉生物学效应。方法　将体外构建的NT3基因工程细胞扩大培养 ,收集浓缩培养上清中的蛋白 ,用印迹杂交鉴定其分泌蛋白的生物学效应 ,再将适当的细胞直接... 目的　通过脑脊液途径移植神经营养因子 - 3(NT3)基因工程细胞 ,初步观察其耳蜗内听觉生物学效应。方法　将体外构建的NT3基因工程细胞扩大培养 ,收集浓缩培养上清中的蛋白 ,用印迹杂交鉴定其分泌蛋白的生物学效应 ,再将适当的细胞直接移植到 2 0天龄近交BALB/C小鼠的脑脊液中 ,4 0天后比较移植前后的畸变产物耳声发射 (DPOAE)幅值。结果　体外构建NT3基因工程细胞是可行的 ,其具备分泌NT3的功能 ,经脑脊液途径注射后观察到BALB/C小鼠耳蜗功能的老化在高频范围内得到了延缓 ,DPOAE高频范围幅值下降减缓。结论　NT3基因工程细胞具有较好的体外体内生物学效应 ,可以用于进一步实验治疗感音性聋的研究 ; 展开更多
关键词 脑脊液 生物学效应 神经营养因子-3 基因治疗 基因转染 基因工程细胞 耳蜗 听觉老化 感音性聋
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关于生物化学实验成绩评定的改革 被引量：8
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作者 刘主 刘安玲 +2 位作者 岳强 廖朝晖 朱必凤 《生物学杂志》 CAS CSCD 2002年第6期43-43,8,共2页
在生物化学实验成绩评定中 ,很多院校已经接受和采用考查和考试相结合的方式 ,但这一方式的具体内容有待探讨和完善。在实验成绩评定的具体方案上 ,我们采用考查 (即平时成绩 )与笔试、实验操作考试相结合的方式 ,在分值的分配上我们降... 在生物化学实验成绩评定中 ,很多院校已经接受和采用考查和考试相结合的方式 ,但这一方式的具体内容有待探讨和完善。在实验成绩评定的具体方案上 ,我们采用考查 (即平时成绩 )与笔试、实验操作考试相结合的方式 ,在分值的分配上我们降低了考查的分值 ,而增加了考试的分值 ,考查∶笔试∶实验操作考试 =1∶1∶2 ,而且我们在笔试中增加了实验设计的测试内容 ,在实验操作考试中增加了实验结果分析的测试内容 ,使实验成绩更全面反映学生的实验能力。同时我们简化实验成绩评定的程序 ,进一步提高实验成绩评定的可操性。 展开更多
关键词 生物化学实验 成绩评定 教学 改革
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