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基于RTCPA-CRISPR/Cas12a的牛病毒性腹泻病毒检测方法的建立及应用
1
作者
蒙琦
常亮
+2 位作者
杨明
曹映辉
贺泂杰
《中国动物传染病学报》
北大核心
2025年第2期80-88,共9页
本研究旨在建立一种检测牛病毒性腹泻病毒的RT-CPA-CRISPR/Cas12a方法。选取BVDV的E0蛋白基因序列为基础,设计CPA特异性引物。同时,依据CRISPR/Cas12a的设计原则,设计了crRNA靶向RT-RAA扩增产物,并优化了RT-CPA-CRISPR/Cas12a反应体系,...
本研究旨在建立一种检测牛病毒性腹泻病毒的RT-CPA-CRISPR/Cas12a方法。选取BVDV的E0蛋白基因序列为基础,设计CPA特异性引物。同时,依据CRISPR/Cas12a的设计原则,设计了crRNA靶向RT-RAA扩增产物,并优化了RT-CPA-CRISPR/Cas12a反应体系,此外,借助建立的该方法,开展了临床样品的检测。结果显示:所建立的检测方法对BVDV的最低检出限为8.0 copies/μL,并具有高度特异性,对42份临床样品检测显示,该方法与传统PCR方法的一致性好,符合率能达到92.86%。该研究建立了牛病毒性腹泻病毒的RT-CPA-CRISPR/Cas12a检测方法,为该病的诊断提供了技术手段。
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关键词
牛病毒性腹泻病毒
交叉引物恒温扩增技术
CRISPR/Cas12a
灵敏度
特异性
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职称材料
题名
基于RTCPA-CRISPR/Cas12a的牛病毒性腹泻病毒检测方法的建立及应用
1
作者
蒙琦
常亮
杨明
曹映辉
贺泂杰
机构
甘肃省畜牧兽医研究所陇东南畜禽病原微生物防控技术研发创新实验室
庄浪县
畜牧
兽医
中心
中国农业科学院兰州
畜牧
与兽药
研究所
出处
《中国动物传染病学报》
北大核心
2025年第2期80-88,共9页
基金
平凉市重点研发计划项目(PL-STK-2023A-037)
平凉市重点研发计划项目(PL-STK-2024A-028)
+1 种基金
甘肃省农业农村厅科技计划项目(GNKJ-2022-39)
甘肃省科技计划项目-重点研发计划(21YF5NA143)。
文摘
本研究旨在建立一种检测牛病毒性腹泻病毒的RT-CPA-CRISPR/Cas12a方法。选取BVDV的E0蛋白基因序列为基础,设计CPA特异性引物。同时,依据CRISPR/Cas12a的设计原则,设计了crRNA靶向RT-RAA扩增产物,并优化了RT-CPA-CRISPR/Cas12a反应体系,此外,借助建立的该方法,开展了临床样品的检测。结果显示:所建立的检测方法对BVDV的最低检出限为8.0 copies/μL,并具有高度特异性,对42份临床样品检测显示,该方法与传统PCR方法的一致性好,符合率能达到92.86%。该研究建立了牛病毒性腹泻病毒的RT-CPA-CRISPR/Cas12a检测方法,为该病的诊断提供了技术手段。
关键词
牛病毒性腹泻病毒
交叉引物恒温扩增技术
CRISPR/Cas12a
灵敏度
特异性
Keywords
Bovine viral diarrhea virus
cross-priming amplification
CRISPR/Cas12a
sensitivity
specificity
分类号
S852.23 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于RTCPA-CRISPR/Cas12a的牛病毒性腹泻病毒检测方法的建立及应用
蒙琦
常亮
杨明
曹映辉
贺泂杰
《中国动物传染病学报》
北大核心
2025
0
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