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AdMax系统构建腺病毒载体介导SCL基因转染Cajal样间质细胞及其表达
被引量：
4
1
作者
周建民
王勤章
+3 位作者
丁国富
屠松
牛世杰
杨发英
《临床与实验病理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期33-37,共5页
目的构建含有人干细胞白血病(stem cell leukemia,SCL)基因的重组腺病毒载体,并观察其对豚鼠膀胱Cajal样间质细胞的转染及其介导SCL基因的表达。方法采用PCR方法从含人SCL基因质粒中扩增SCL基因,连接到腺病毒穿梭质粒的多克隆位点上,构...
目的构建含有人干细胞白血病(stem cell leukemia,SCL)基因的重组腺病毒载体,并观察其对豚鼠膀胱Cajal样间质细胞的转染及其介导SCL基因的表达。方法采用PCR方法从含人SCL基因质粒中扩增SCL基因,连接到腺病毒穿梭质粒的多克隆位点上,构建重组穿梭质粒pDC315-EGFP/SCL,在脂质体介导下与腺病毒辅助大质粒pBHGlox(delta)E1,3Cre共转染293细胞,包装产生复制缺陷型重组腺病毒pDC315-SCL经HEK293细胞扩增,纯化后测定病毒滴度。通过观察绿色荧光蛋白的表达评估重组腺病毒对Cajal样间质细胞的转染率,RT-PCR法分析转染Cajal样间质细胞后SCL mRNA的表达。结果 PCR结果和Western blot法检测证实pDC315-SCL重组腺病毒载体构建成功,滴度达到1×1010 PFU/ml,对膀胱Cajal样间质细胞的转染率高达98%,RT-PCR法检测转染Cajal样间质细胞后SCL mRNA有表达。结论成功构建pDC315-SCL重组腺病毒载体对Cajal样间质细胞有很强的转染能力,可介导SCL基因在Cajal样间质细胞的表达。
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关键词
干细胞白血病基因
腺病毒载体
转染
CAJAL样间质细胞
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职称材料
题名
AdMax系统构建腺病毒载体介导SCL基因转染Cajal样间质细胞及其表达
被引量：
4
1
作者
周建民
王勤章
丁国富
屠松
牛世杰
杨发英
机构
甘肃省张掖市人民医院泌尿外科
石河子大学医学院附属第一
医院
泌
尿
外科
出处
《临床与实验病理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期33-37,共5页
基金
国家自然科学基金资助(30860281)
文摘
目的构建含有人干细胞白血病(stem cell leukemia,SCL)基因的重组腺病毒载体,并观察其对豚鼠膀胱Cajal样间质细胞的转染及其介导SCL基因的表达。方法采用PCR方法从含人SCL基因质粒中扩增SCL基因,连接到腺病毒穿梭质粒的多克隆位点上,构建重组穿梭质粒pDC315-EGFP/SCL,在脂质体介导下与腺病毒辅助大质粒pBHGlox(delta)E1,3Cre共转染293细胞,包装产生复制缺陷型重组腺病毒pDC315-SCL经HEK293细胞扩增,纯化后测定病毒滴度。通过观察绿色荧光蛋白的表达评估重组腺病毒对Cajal样间质细胞的转染率,RT-PCR法分析转染Cajal样间质细胞后SCL mRNA的表达。结果 PCR结果和Western blot法检测证实pDC315-SCL重组腺病毒载体构建成功,滴度达到1×1010 PFU/ml,对膀胱Cajal样间质细胞的转染率高达98%,RT-PCR法检测转染Cajal样间质细胞后SCL mRNA有表达。结论成功构建pDC315-SCL重组腺病毒载体对Cajal样间质细胞有很强的转染能力,可介导SCL基因在Cajal样间质细胞的表达。
关键词
干细胞白血病基因
腺病毒载体
转染
CAJAL样间质细胞
Keywords
stem cell leukemia gene
adenovirus vector
transfection
Cajal-like interstitial cells
分类号
R33 [医药卫生—人体生理学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
AdMax系统构建腺病毒载体介导SCL基因转染Cajal样间质细胞及其表达
周建民
王勤章
丁国富
屠松
牛世杰
杨发英
《临床与实验病理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012
4
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