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题名CryⅢA基因植物表达载体构建及马铃薯遗传转化
被引量：6
- 1
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作者
尤佳
张宁
文义凯
吴家和
司怀军
王蒂
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机构
甘肃省干旱生境作物学省部共建国家重点实验室培育基地甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室
甘肃农业大学生命科学技术学院
中国科学院微生物研究所植物基因组学国家重点实验室
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出处
《草业学报》
CSCD
北大核心
2014年第1期248-256,共9页
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基金
甘肃省农业科技创新项目(GNCX-2011-49)
国家公益性行业(农业)科研专项(201103026-2)资助
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文摘
利用In-Fusion技术将酶切位点不匹配、目的基因内部含载体酶切位点的CryⅢA基因和植物表达载体pBI121相连接,分别成功构建了组成型启动子CaMV 35S和马铃薯茎叶特异表达启动子ST-LS1驱动的CryⅢA基因植物表达载体。利用冻融法将2个重组质粒转入根癌农杆菌LBA4404,转化马铃薯栽培品种陇薯3号和甘农薯2号获得了转化植株,经卡那霉素筛选和PCR检测,共有10株阳性植株CryⅢA基因成功整合到马铃薯基因组中。经实时荧光定量PCR检测表明,CryⅢA基因在CaMV 35S驱动的CryⅢA转基因植株的根、茎、叶中均有表达,且在叶中表达量较高,茎和根次之;在马铃薯茎叶特异表达启动子ST-LS1驱动的CryⅢA转基因植株中,在根中未见表达,仅在茎、叶中表达,且在叶中表达量较高。
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关键词
In-Fusion
CryⅢA基因
表达载体
马铃薯
遗传转化
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Keywords
In-Fusion
CryⅢ A gene
expression vector
potato
genetic transformation
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分类号
Q943.2
[生物学—植物学]
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题名马铃薯乙烯响应因子基因的克隆表达及生物信息学分析
被引量：5
- 2
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作者
冯丹
刘柏林
王永林
张宁
文义凯
司怀军
王蒂
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机构
甘肃省干旱生境作物学省部共建国家重点实验室培育基地甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室
甘肃农业大学生命科学技术学院
兰州市农业科技研究推广中心
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出处
《甘肃农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期80-86,共7页
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基金
国家自然科学基金项目(30871573
31160298)
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文摘
根据番茄ERF5基因(NM_001247583.1)序列设计引物,采用RT-PCR方法得到马铃薯ERF基因的cDNA,并对其进行生物信息学及表达分析.结果表明:该cDNA全长789bp,阅读框为732bp,编码243个氨基酸.序列同源性分析表明该基因序列与番茄ERF5基因的序列同源性达82%,氨基酸序列同源性达70%.对该马铃薯ERF基因的氨基酸序列经BLAST进行多序列比对,发现该氨基酸序列的98～160bp为AP2结构域,属于AP2/EREBP转录因子的EREBP亚族ERF类.蛋白质三级结构预测表明该基因的AP2结构域非常保守.对ERF基因进行荧光定量PCR分析,表明该基因可能参与了马铃薯块茎解除休眠与发芽过程的调控.
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关键词
马铃薯
乙烯响应因子
基因克隆
生物信息学
QRT-PCR
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Keywords
potato
ethylene response factor
gene cloning
bioinformatics analysis
qRT-PCR
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分类号
S532
[农业科学—作物学]
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题名干旱胁迫下马铃薯差异表达基因的验证分析
被引量：3
- 3
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作者
王洁
贺文辉
刘英
张宁
司怀军
王蒂
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机构
甘肃省干旱生境作物学省部共建国家重点实验室培育基地
甘肃农业大学生命科学技术学院
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出处
《甘肃农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第1期42-47,52,共7页
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基金
高等学校博士学科点专项科研基金(20126202110007)
甘肃省干旱生境作物学省部共建国家重点实验室培育基地开放基金(GSCS-2012-02)
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文摘
为了深入了解马铃薯的抗旱机制,本研究选择Solexa高通量测序中log2(fold change)≥11倍的22个差异基因,包括6个转录因子、4个脯氨酸代谢、4个抗氧化防御系统、4个类黄酮生物合成和4个植物激素信号转导相关基因,采用qRT-PCR检测20%PEG6000处理0、1、6、12h后马铃薯叶片中22个基因表达的变化.结果表明:被检测的22个基因的结果与Solexa高通量测序的结果一致,并且在不同干旱处理时间下各基因表达各不相同,表现出5种表达模式:上调-上调-上调、下调-下调-下调、上调-下调-上调、上调-下调-下调、上调-上调-下调.马铃薯对不同时间点的干旱可能采取不同的应对策略,对1h和6h干旱可能是减少不必要的能量和物质消耗,12h干旱胁迫下才调动大量抗逆相关物质,抵抗干旱的伤害.
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关键词
马铃薯
干旱胁迫
脯氨酸
抗氧化防御系统
类黄酮
信号转导
QRT-PCR
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Keywords
qRT-PCR
potato
drought stress
proline
antioxidant defense system
flavonoids
signal transduction
qRT-PCR
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分类号
S532
[农业科学—作物学]
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