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牦牛与荷斯坦奶牛乳源外泌体对脂多糖致牛乳腺上皮细胞损伤的治疗效果评价
1
作者
汪燕霞
王靖雷
+7 位作者
何玉龙
任昱春
王萌
于天军
许瑞华
张瑞
潘阳阳
徐庚全
《动物营养学报》
北大核心
2025年第7期4763-4775,共13页
本试验旨在探究同浓度的荷斯坦奶牛乳源外泌体(Cow-Exo)和牦牛乳源外泌体(YakExo)对脂多糖(LPS)诱导的牛乳腺上皮细胞损伤的治疗效果。从同体积的牦牛和荷斯坦奶牛乳样中分离出外泌体,以同浓度的Cow-Exo和Yak-Exo作用于LPS诱导的乳腺上...
本试验旨在探究同浓度的荷斯坦奶牛乳源外泌体(Cow-Exo)和牦牛乳源外泌体(YakExo)对脂多糖(LPS)诱导的牛乳腺上皮细胞损伤的治疗效果。从同体积的牦牛和荷斯坦奶牛乳样中分离出外泌体,以同浓度的Cow-Exo和Yak-Exo作用于LPS诱导的乳腺上皮细胞(MAC-T细胞)体外炎症反应模型,通过CCK-8法检测乳源外泌体对细胞活力的影响,通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、蛋白质免疫印迹(WB)、免疫荧光(IF)法检测乳源外泌体与LPS联合作用对细胞炎性因子、核因子-κB(NF-κB)信号通路相关因子和凋亡因子表达的影响。结果显示:1)对于从同体积牦牛和荷斯坦奶牛乳样中分离的外泌体,Yak-Exo中蛋白浓度显著高于Cow-Exo(P<0.05);2)MAC-T细胞对2种乳源外泌体的摄入量在24 h时显著大于6和12 h时(P<0.05);3)10μg/mL LPS显著提高了MAC-T细胞中促炎因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)的mRNA相对表达量(P<0.05),可用于建立炎症反应模型;4)Cow-Exo和Yak-Exo均可显著降低LPS诱导的MAC-T细胞中NF-κB信号通路相关因子P-p65/p65的蛋白相对表达量和p65的mRNA相对表达量(P<0.05),同时显著降低MAC-T细胞中促炎因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-1β以及凋亡因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和B细胞淋巴瘤-2关联X蛋白(Bax)/B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)的蛋白和mRNA相对表达量(P<0.05),并显著升高抗炎因子白细胞介素-10(IL-10)的蛋白相对表达量(P<0.05),且Yak-Exo的作用效果比Cow-Exo更显著(P<0.05)。综上所述,Yak-Exo和CowExo均可通过降低促炎因子的分泌、抑制NF-κB信号通路相关因子和凋亡因子的表达缓解LPS诱导的奶牛乳腺上皮细胞炎症反应,且Yak-Exo抵抗炎症反应的效果显著优于Cow-Exo。
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关键词
乳源外泌体
脂多糖
NF-ΚB信号通路
炎症
细胞凋亡
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职称材料
PHD3、HIF-1α和E-cadherin在不同年龄段牦牛肺脏组织中的表达差异性分析
2
作者
陈春燕
王军乾
+5 位作者
崔燕
余四九
牛悦悦
鲜康乐
王登慧
邓演江
《核农学报》
2025年第10期2138-2145,共8页
为明确脯氨酸羟化酶3(PHD3)、低氧诱导因子1α(HIF-1α)和上皮钙黏附蛋白(E-cadherin)在不同年龄段牦牛肺脏中的表达情况,本研究采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白印迹技术(Western blot)分别检测初生(3日龄以内)、幼年(<3岁)、成...
为明确脯氨酸羟化酶3(PHD3)、低氧诱导因子1α(HIF-1α)和上皮钙黏附蛋白(E-cadherin)在不同年龄段牦牛肺脏中的表达情况,本研究采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白印迹技术(Western blot)分别检测初生(3日龄以内)、幼年(<3岁)、成年(4~8岁)、老年(>8岁)牦牛肺脏组织中PHD3、HIF-1α和E-cadherin基因和蛋白的表达,并采用免疫组织化学技术(IHC)检测PHD3、HIF-1α和E-cadherin蛋白在不同年龄段牦牛肺脏组织中的分布。结果表明,牦牛肺脏组织中PHD3、HIF-1α基因和蛋白的表达随着年龄的增长而不断升高,以老年牦牛肺脏组织中表达量最高(P<0.05);E-cadherin基因和蛋白在幼年牦牛肺脏中表达最高(P<0.05),且其表达量在幼年、成年、老年阶段不断降低。PHD3主要在肺脏支气管平滑肌细胞和肺动脉平滑肌细胞中表达,HIF-1α和E-cadherin主要分布于各级支气管上皮细胞、肺动脉内皮细胞及肺泡上皮细胞。随着牦牛年龄的增长,PHD3在肺脏平滑肌细胞的表达量不断升高,同时HIF-1α在肺脏上皮细胞的表达量逐渐上升,推测PHD3通过调节HIF-1α的活性抑制E-cadherin在肺脏上皮细胞中的表达。本研究为探明牦牛因年龄增长导致肺脏损伤及功能减退的机制奠定了基础。
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关键词
牦牛
肺脏
脯氨酸羟化酶3
低氧诱导因子1α
上皮钙黏附蛋白
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职称材料
题名
牦牛与荷斯坦奶牛乳源外泌体对脂多糖致牛乳腺上皮细胞损伤的治疗效果评价
1
作者
汪燕霞
王靖雷
何玉龙
任昱春
王萌
于天军
许瑞华
张瑞
潘阳阳
徐庚全
机构
甘肃
农业大学动物医学院
甘肃省家畜胚胎工程技术创新中心
酒泉市畜牧兽医总站
中央农业广播电视学校天祝县分校
肃北蒙古族自治县畜牧兽医
技术
服务
中心
出处
《动物营养学报》
北大核心
2025年第7期4763-4775,共13页
基金
甘肃省重点研发计划-农业领域(24YFNA015)
甘肃省科技计划项目科技特派员(基地)专项(23CXNF0008)。
文摘
本试验旨在探究同浓度的荷斯坦奶牛乳源外泌体(Cow-Exo)和牦牛乳源外泌体(YakExo)对脂多糖(LPS)诱导的牛乳腺上皮细胞损伤的治疗效果。从同体积的牦牛和荷斯坦奶牛乳样中分离出外泌体,以同浓度的Cow-Exo和Yak-Exo作用于LPS诱导的乳腺上皮细胞(MAC-T细胞)体外炎症反应模型,通过CCK-8法检测乳源外泌体对细胞活力的影响,通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、蛋白质免疫印迹(WB)、免疫荧光(IF)法检测乳源外泌体与LPS联合作用对细胞炎性因子、核因子-κB(NF-κB)信号通路相关因子和凋亡因子表达的影响。结果显示:1)对于从同体积牦牛和荷斯坦奶牛乳样中分离的外泌体,Yak-Exo中蛋白浓度显著高于Cow-Exo(P<0.05);2)MAC-T细胞对2种乳源外泌体的摄入量在24 h时显著大于6和12 h时(P<0.05);3)10μg/mL LPS显著提高了MAC-T细胞中促炎因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)的mRNA相对表达量(P<0.05),可用于建立炎症反应模型;4)Cow-Exo和Yak-Exo均可显著降低LPS诱导的MAC-T细胞中NF-κB信号通路相关因子P-p65/p65的蛋白相对表达量和p65的mRNA相对表达量(P<0.05),同时显著降低MAC-T细胞中促炎因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-1β以及凋亡因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和B细胞淋巴瘤-2关联X蛋白(Bax)/B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)的蛋白和mRNA相对表达量(P<0.05),并显著升高抗炎因子白细胞介素-10(IL-10)的蛋白相对表达量(P<0.05),且Yak-Exo的作用效果比Cow-Exo更显著(P<0.05)。综上所述,Yak-Exo和CowExo均可通过降低促炎因子的分泌、抑制NF-κB信号通路相关因子和凋亡因子的表达缓解LPS诱导的奶牛乳腺上皮细胞炎症反应,且Yak-Exo抵抗炎症反应的效果显著优于Cow-Exo。
关键词
乳源外泌体
脂多糖
NF-ΚB信号通路
炎症
细胞凋亡
Keywords
milk-derived exosomes
lipopolysaccharide
NF-κB signaling pathway
inflammation
apoptosis
分类号
S823 [农业科学—畜牧学]
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题名
PHD3、HIF-1α和E-cadherin在不同年龄段牦牛肺脏组织中的表达差异性分析
2
作者
陈春燕
王军乾
崔燕
余四九
牛悦悦
鲜康乐
王登慧
邓演江
机构
甘肃
农业大学动物医学院
出处
《核农学报》
2025年第10期2138-2145,共8页
基金
国家自然科学基金项目(32372974)。
文摘
为明确脯氨酸羟化酶3(PHD3)、低氧诱导因子1α(HIF-1α)和上皮钙黏附蛋白(E-cadherin)在不同年龄段牦牛肺脏中的表达情况,本研究采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白印迹技术(Western blot)分别检测初生(3日龄以内)、幼年(<3岁)、成年(4~8岁)、老年(>8岁)牦牛肺脏组织中PHD3、HIF-1α和E-cadherin基因和蛋白的表达,并采用免疫组织化学技术(IHC)检测PHD3、HIF-1α和E-cadherin蛋白在不同年龄段牦牛肺脏组织中的分布。结果表明,牦牛肺脏组织中PHD3、HIF-1α基因和蛋白的表达随着年龄的增长而不断升高,以老年牦牛肺脏组织中表达量最高(P<0.05);E-cadherin基因和蛋白在幼年牦牛肺脏中表达最高(P<0.05),且其表达量在幼年、成年、老年阶段不断降低。PHD3主要在肺脏支气管平滑肌细胞和肺动脉平滑肌细胞中表达,HIF-1α和E-cadherin主要分布于各级支气管上皮细胞、肺动脉内皮细胞及肺泡上皮细胞。随着牦牛年龄的增长,PHD3在肺脏平滑肌细胞的表达量不断升高,同时HIF-1α在肺脏上皮细胞的表达量逐渐上升,推测PHD3通过调节HIF-1α的活性抑制E-cadherin在肺脏上皮细胞中的表达。本研究为探明牦牛因年龄增长导致肺脏损伤及功能减退的机制奠定了基础。
关键词
牦牛
肺脏
脯氨酸羟化酶3
低氧诱导因子1α
上皮钙黏附蛋白
Keywords
yak
lung
prolyl hydroxylase 3
hypoxia-inducible factor 1α
epithelial cadherin
分类号
S823 [农业科学]
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题名
作者
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被引量
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1
牦牛与荷斯坦奶牛乳源外泌体对脂多糖致牛乳腺上皮细胞损伤的治疗效果评价
汪燕霞
王靖雷
何玉龙
任昱春
王萌
于天军
许瑞华
张瑞
潘阳阳
徐庚全
《动物营养学报》
北大核心
2025
0
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职称材料
2
PHD3、HIF-1α和E-cadherin在不同年龄段牦牛肺脏组织中的表达差异性分析
陈春燕
王军乾
崔燕
余四九
牛悦悦
鲜康乐
王登慧
邓演江
《核农学报》
2025
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