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猪带绦虫六钩蚴TSOL18重组蛋白快速诊断试纸条研制
被引量:
8
1
作者
张少华
骆学农
+5 位作者
郑亚东
李克生
景志忠
蒋韬
赵松波
才学鹏
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第10期968-972,共5页
目的以猪带绦虫六钩蚴重组蛋白(TSOL18)为抗原,建立一种简便快速的猪囊虫抗体检测方法,评价其血清学诊断的价值。方法用胶体金颗粒标记纯化的TSOL18重组蛋白,将兔抗TSOL18-GST-IgG和TSOL18重组抗原分别喷涂于硝酸纤维素膜的质控线和检...
目的以猪带绦虫六钩蚴重组蛋白(TSOL18)为抗原,建立一种简便快速的猪囊虫抗体检测方法,评价其血清学诊断的价值。方法用胶体金颗粒标记纯化的TSOL18重组蛋白,将兔抗TSOL18-GST-IgG和TSOL18重组抗原分别喷涂于硝酸纤维素膜的质控线和检测线上,与PVC垫板等部件按顺序装配成猪囊虫抗体快速检测试纸条;用该试纸条检测猪血清样品测定敏感性和特异性。结果该试纸条与全囊虫抗原ELISA的相对敏感性和特异性分别为75.0%(12/16)和95.2%(40/42),与剖检计数法的相对敏感性达80.0%(12/15)。试纸条在4℃存放12个月,检测结果稳定,重复性好。结论基于TSOL18建立的胶体金免疫层析试纸条操作简单、快速敏感、稳定性好,可用于猪囊虫病感染的诊断和筛查。
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关键词
猪囊虫病
TSOL18重组蛋白
胶体金
试纸条
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职称材料
猪带绦虫六钩蚴重组蛋白TSOL18与BSA偶连蛋白的制备
被引量:
2
2
作者
张少华
李克生
+3 位作者
景志忠
杜惠芬
骆学农
才学鹏
《甘肃农业大学学报》
CAS
CSCD
2007年第3期7-11,共5页
应用异型双功能连接剂MBS(间-马来酰亚胺苯甲酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯)将猪带绦虫六钩蚴18ku重组蛋白(TSOL18)和载体蛋白-牛血清白蛋白(BSA)进行连接,制备连接蛋白BSA-TSOL18,用以增强TSOL18的免疫原性.连接蛋白利用快速脱盐柱分离技术进...
应用异型双功能连接剂MBS(间-马来酰亚胺苯甲酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯)将猪带绦虫六钩蚴18ku重组蛋白(TSOL18)和载体蛋白-牛血清白蛋白(BSA)进行连接,制备连接蛋白BSA-TSOL18,用以增强TSOL18的免疫原性.连接蛋白利用快速脱盐柱分离技术进行纯化;纯化后应用醋酸纤维薄膜电泳证明二者的结合情况;并用间接ELISA法检测不同摩尔比连接产物中抗原部分的活性.结果表明:TSOL18与BSA偶连摩尔比为1∶3时连接有效,且对抗原活性影响小,可满足进一步免疫的要求.
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关键词
猪带绦虫
MBS
TSOL18
BSA
蛋白连接
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职称材料
用阴离子交换色谱法制备寡聚核苷酸
被引量:
1
3
作者
廖世奇
周向军
+2 位作者
李安敏
王黎
顾春华
《兰州大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第5期69-73,共5页
建立了用Source 15Q强阴离子交换柱分离纯化寡聚核苷酸的方法.在pH 9.0,以20 mmol/L Tris-HCl缓冲液+2.0 mol/L NaCl为流动相,线性浓度梯度洗脱,紫外检测波长为260 nm,流速为1 mL/min的分离条件下,能很好地分离18-78 mer的合成寡聚脱氧...
建立了用Source 15Q强阴离子交换柱分离纯化寡聚核苷酸的方法.在pH 9.0,以20 mmol/L Tris-HCl缓冲液+2.0 mol/L NaCl为流动相,线性浓度梯度洗脱,紫外检测波长为260 nm,流速为1 mL/min的分离条件下,能很好地分离18-78 mer的合成寡聚脱氧核苷酸和PCR的单双链产物,探讨了流速和盐浓度对分离的影响,并测得24mer OligoDNA的回收率为90%左右.该方法简便、快捷、分辨率高,可用于寡聚核苷酸、反义核酸药物的分离、纯化、鉴定和制备.
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关键词
高效阴离子交换色谱法
SOURCE
15Q强阴离子交换柱
寡聚核苷酸
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职称材料
抗大肠杆菌O157单克隆抗体制备过程中杂交瘤细胞的观测
4
作者
王燕琴
李克生
+1 位作者
杜蕙芬
胡永浩
《甘肃农业大学学报》
CAS
CSCD
2008年第3期64-66,共3页
采用细胞活力测定、形态学观察和遗传学检测的方法,研究了在用常规方法制备大肠杆菌O157单克隆抗体过程中,融合前后的细胞在细胞活力、细胞形态以及染色体数量的差异.结果表明,与凯骨髓瘤细胞相比,杂交瘤细胞的细胞活力和细胞形态无明...
采用细胞活力测定、形态学观察和遗传学检测的方法,研究了在用常规方法制备大肠杆菌O157单克隆抗体过程中,融合前后的细胞在细胞活力、细胞形态以及染色体数量的差异.结果表明,与凯骨髓瘤细胞相比,杂交瘤细胞的细胞活力和细胞形态无明显变化;当脾细胞与凯骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞后,其染色体数目接近两亲本细胞染色体数目之和.
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关键词
大肠杆菌
单克隆抗体
杂交瘤细胞
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职称材料
题名
猪带绦虫六钩蚴TSOL18重组蛋白快速诊断试纸条研制
被引量:
8
1
作者
张少华
骆学农
郑亚东
李克生
景志忠
蒋韬
赵松波
才学鹏
机构
中国农业
科学
院兰州兽医
研究
所家畜疫病病原
生物
学国家重点实验室
甘肃省医学科学研究院生物技术中心
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第10期968-972,共5页
基金
国家科技支撑计划项目(No.2007BAD40B03)
国家863计划项目(No.2006AA10A207)
文摘
目的以猪带绦虫六钩蚴重组蛋白(TSOL18)为抗原,建立一种简便快速的猪囊虫抗体检测方法,评价其血清学诊断的价值。方法用胶体金颗粒标记纯化的TSOL18重组蛋白,将兔抗TSOL18-GST-IgG和TSOL18重组抗原分别喷涂于硝酸纤维素膜的质控线和检测线上,与PVC垫板等部件按顺序装配成猪囊虫抗体快速检测试纸条;用该试纸条检测猪血清样品测定敏感性和特异性。结果该试纸条与全囊虫抗原ELISA的相对敏感性和特异性分别为75.0%(12/16)和95.2%(40/42),与剖检计数法的相对敏感性达80.0%(12/15)。试纸条在4℃存放12个月,检测结果稳定,重复性好。结论基于TSOL18建立的胶体金免疫层析试纸条操作简单、快速敏感、稳定性好,可用于猪囊虫病感染的诊断和筛查。
关键词
猪囊虫病
TSOL18重组蛋白
胶体金
试纸条
Keywords
swine cysticercosis
TSOL18 recombinant protein
colloidal gold
strip
分类号
R383.3 [医药卫生—医学寄生虫学]
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职称材料
题名
猪带绦虫六钩蚴重组蛋白TSOL18与BSA偶连蛋白的制备
被引量:
2
2
作者
张少华
李克生
景志忠
杜惠芬
骆学农
才学鹏
机构
甘肃
农业大学动物
医学
院
甘肃省
医学
科学研究院
医学
生物技术
中心
中国农业
科学
院兰州兽医
研究
所家畜疫病病原
生物
学国家重点实验室
甘肃省
动物寄生虫病重点实验室
出处
《甘肃农业大学学报》
CAS
CSCD
2007年第3期7-11,共5页
基金
甘肃省科技型中小型企业技术创新基金(2GS055-A43-057).
文摘
应用异型双功能连接剂MBS(间-马来酰亚胺苯甲酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯)将猪带绦虫六钩蚴18ku重组蛋白(TSOL18)和载体蛋白-牛血清白蛋白(BSA)进行连接,制备连接蛋白BSA-TSOL18,用以增强TSOL18的免疫原性.连接蛋白利用快速脱盐柱分离技术进行纯化;纯化后应用醋酸纤维薄膜电泳证明二者的结合情况;并用间接ELISA法检测不同摩尔比连接产物中抗原部分的活性.结果表明:TSOL18与BSA偶连摩尔比为1∶3时连接有效,且对抗原活性影响小,可满足进一步免疫的要求.
关键词
猪带绦虫
MBS
TSOL18
BSA
蛋白连接
Keywords
Taenia solium
MBS
TSOL18
BSA
conjugation
分类号
S852.73 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
用阴离子交换色谱法制备寡聚核苷酸
被引量:
1
3
作者
廖世奇
周向军
李安敏
王黎
顾春华
机构
甘肃省
医学
科学研究院
医学
生物技术
中心
兰州大学生命
科学
学院
兰州
生物
制品
研究
所
出处
《兰州大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第5期69-73,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30271219).
文摘
建立了用Source 15Q强阴离子交换柱分离纯化寡聚核苷酸的方法.在pH 9.0,以20 mmol/L Tris-HCl缓冲液+2.0 mol/L NaCl为流动相,线性浓度梯度洗脱,紫外检测波长为260 nm,流速为1 mL/min的分离条件下,能很好地分离18-78 mer的合成寡聚脱氧核苷酸和PCR的单双链产物,探讨了流速和盐浓度对分离的影响,并测得24mer OligoDNA的回收率为90%左右.该方法简便、快捷、分辨率高,可用于寡聚核苷酸、反义核酸药物的分离、纯化、鉴定和制备.
关键词
高效阴离子交换色谱法
SOURCE
15Q强阴离子交换柱
寡聚核苷酸
Keywords
high performance anion exchange chromatography
Source 15Q strong anion exchange column
oligodeoxynucleotide
分类号
O657.7 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
抗大肠杆菌O157单克隆抗体制备过程中杂交瘤细胞的观测
4
作者
王燕琴
李克生
杜蕙芬
胡永浩
机构
甘肃
农业大学动物
医学
院
甘肃省
医学
科学研究院
医学
生物技术
中心
出处
《甘肃农业大学学报》
CAS
CSCD
2008年第3期64-66,共3页
基金
甘肃省基础平台建设项目.
文摘
采用细胞活力测定、形态学观察和遗传学检测的方法,研究了在用常规方法制备大肠杆菌O157单克隆抗体过程中,融合前后的细胞在细胞活力、细胞形态以及染色体数量的差异.结果表明,与凯骨髓瘤细胞相比,杂交瘤细胞的细胞活力和细胞形态无明显变化;当脾细胞与凯骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞后,其染色体数目接近两亲本细胞染色体数目之和.
关键词
大肠杆菌
单克隆抗体
杂交瘤细胞
Keywords
Escherichia coli
monoclonal antibodies
hybridoma cell
分类号
S852.4 [农业科学—基础兽医学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪带绦虫六钩蚴TSOL18重组蛋白快速诊断试纸条研制
张少华
骆学农
郑亚东
李克生
景志忠
蒋韬
赵松波
才学鹏
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
8
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
猪带绦虫六钩蚴重组蛋白TSOL18与BSA偶连蛋白的制备
张少华
李克生
景志忠
杜惠芬
骆学农
才学鹏
《甘肃农业大学学报》
CAS
CSCD
2007
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
用阴离子交换色谱法制备寡聚核苷酸
廖世奇
周向军
李安敏
王黎
顾春华
《兰州大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2005
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
抗大肠杆菌O157单克隆抗体制备过程中杂交瘤细胞的观测
王燕琴
李克生
杜蕙芬
胡永浩
《甘肃农业大学学报》
CAS
CSCD
2008
0
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职称材料
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