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题名柯萨奇病毒A组16型VP1蛋白的原核表达及纯化
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作者
潘朋歌
李克生
杜惠芬
曾潮宁
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机构
宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室/宁夏回族自治区生殖与遗传重点实验室
甘肃省医学科学研究院医学生物技术研究中心
兰州雅华生物技术有限公司
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出处
《安徽农业科学》
CAS
2018年第30期99-101,共3页
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文摘
[目的]原核表达并纯化柯萨奇病毒A组16型(CVA16) VP1蛋白。[方法]根据Gen Bank CVA16 VP1基因序列,合成VP1全基因,连接到载体p ET30a,构建原核表达质粒p ET30a-CVA16-VP1。将测序正确的重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导蛋白表达,Ni-NTA亲和层析纯化,SDS-PAGE和Western Blot鉴定重组蛋白。[结果]成功构建重组质粒p ET30a-CVA16-VP1,表达蛋白经SDS-PAGE显示分子量约为38.7 k Da,目的蛋白以包涵体形式存在,蛋白经复性、纯化,纯度达90%以上;经Western Blot检测,证实表达的蛋白为VP1蛋白。[结论]成功获得了高纯度的VP1蛋白,为此抗原用于临床诊断打下了基础。
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关键词
柯萨奇病毒A组16型(CVA16)
VP1蛋白
原核表达
纯化
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Keywords
Coxsackie virus A16 （CVA16）
VP1 protein
Prokaryotic expression
Purificantion
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分类号
R373.23
[医药卫生—病原生物学]
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