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溶血磷脂酸受体1-3在牦牛不同时期卵巢中表达定位
被引量：
3
1
作者
张燕燕
王靖雷
+6 位作者
潘阳阳
马文斌
高丽青
张辉
李心蕊
余四九
徐庚全
《动物医学进展》
北大核心
2021年第9期35-42,共8页
为探究正常生理下条件下溶血磷脂酸受体(LPAR)1-3在牦牛不同时期卵巢(卵泡期、黄体期、妊娠期)表达及生物学作用,利用RT-qPCR检测LPAR1-3基因在不同时期卵巢上的表达,同时利用蛋白质免疫印迹、免疫组织化学(IHC)等方法对LPAR1-3基因和...
为探究正常生理下条件下溶血磷脂酸受体(LPAR)1-3在牦牛不同时期卵巢(卵泡期、黄体期、妊娠期)表达及生物学作用,利用RT-qPCR检测LPAR1-3基因在不同时期卵巢上的表达,同时利用蛋白质免疫印迹、免疫组织化学(IHC)等方法对LPAR1-3基因和蛋白的表达进行分析和定位。结果显示,LPAR1-3在牦牛不同时期卵巢上均有表达,其中LPAR1-3的表达量在妊娠期显著高于卵泡期和黄体期(P<0.05),卵泡期表达量最低;在卵泡期、黄体期、妊娠期LPAR3的表达量均显著高于LPAR1和LPAR2(P<0.05),LPAR2的表达量最低;IHC结果显示,LPAR1-3在卵巢生殖上皮、颗粒细胞、卵泡液、卵泡膜和黄体细胞均有表达。研究结果提示LPAR1-3可能在卵泡生长、发育、排卵以及维持妊娠等一系列生殖过程中发挥重要的作用,其中LPAR3可能在这一过程中起主要作用,该结果有助于对牦牛繁殖机能的进一步研究,可为高原哺乳动物生殖生理的研究提供理论依据。
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关键词
牦牛
溶血磷脂酸受体-1
溶血磷脂酸受体-2
溶血磷脂酸受体-3
卵巢
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职称材料
牦牛Fas相关因子1多克隆抗体制备及初步应用
2
作者
王静瑜
潘阳阳
+7 位作者
徐庚全
张瑞
张文兰
王筱珊
乌仁套迪
照日格图
崔燕
余四九
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第8期3369-3382,共14页
Fas相关因子1(Fas-associated factor-1,FAF1)为Fas家族成员,含有数个多功能结构域,可参与细胞凋亡、炎症、坏死、细胞增殖和蛋白质稳态等生物学过程。本研究旨在制备牦牛FAF1多克隆抗体,探索FAF1在牦牛不同年龄睾丸组织及不同繁殖周期...
Fas相关因子1(Fas-associated factor-1,FAF1)为Fas家族成员,含有数个多功能结构域,可参与细胞凋亡、炎症、坏死、细胞增殖和蛋白质稳态等生物学过程。本研究旨在制备牦牛FAF1多克隆抗体,探索FAF1在牦牛不同年龄睾丸组织及不同繁殖周期卵巢的生物学作用。试验扩增出牦牛FAF 1基因全序列,构建牦牛pET28a-FAF1蛋白原核表达载体,优化诱导条件,通过Ni-NTA柱纯化后,免疫试验动物,获得兔源FAF1多克隆抗体。选取幼年(1、2周岁)、成年(3、4、6、7周岁)、老年(11周岁)三个年龄段雄性牦牛睾丸,选取不同繁殖周期(卵泡期、黄体期和妊娠期)雌性牦牛卵巢,采用实时荧光定量、Western blot、免疫组织化学(IHC)方法分别检测不同年龄雄性牦牛睾丸及不同繁殖周期雌性牦牛卵巢中FAF1 mRNA、蛋白相对表达量及蛋白的表达定位。结果表明,成功构建原核表达载体pET28a-FAF1,25℃、IPTG浓度为0.5 mmol·L^(-1)诱导5 h为最优诱导条件,该重组蛋白主要存在于包涵体中,免疫试验动物后获得兔源FAF1多克隆抗体,抗体效价为1∶1024000,特异性良好。睾丸组织实时荧光定量结果显示,FAF1 mRNA在3、4、7周岁雄性牦牛睾丸组织中相对表达量显著高于其他年龄段;睾丸组织Western blot结果显示,FAF1蛋白在11周岁时相对蛋白表达量显著高于其他年龄段,6、7周岁次之,3、4周岁FAF1相对蛋白表达量最低;睾丸组织免疫组织化学结果显示,FAF1主要表达于精子、精子细胞、精原细胞、初级精母细胞、支持细胞、睾丸间质细胞和管周肌样细胞中。卵巢组织实时荧光定量结果显示,雌性牦牛黄体期卵巢FAF1 mRNA相对表达量显著高于卵泡期和妊娠期,妊娠期卵巢次之,卵泡期卵巢最低;卵巢Western blot结果显示,卵泡期和妊娠期卵巢FAF1蛋白相对表达量显著高于黄体期,卵泡期卵巢表达量最高,妊娠期卵巢次之,黄体期卵巢中表达量最低;卵巢IHC结果显示FAF1主要表达于卵巢生殖上皮细胞、颗粒细胞、卵丘细胞、卵泡膜细胞和黄体细胞。FAF1 mRNA和蛋白在不同年龄睾丸及不同繁殖周期卵巢组织存在显著差异化表达,综上推测,FAF1可能与雄性牦牛的睾丸发育、精子发生及睾酮分泌密切相关,与雌性牦牛的卵泡闭锁、发育、成熟和黄体溶解生理过程相关,本研究为更进一步探索FAF1在牦牛生殖生理功能方面提供依据。
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关键词
牦牛
FAF1
原核表达
多克隆抗体
应用
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职称材料
题名
溶血磷脂酸受体1-3在牦牛不同时期卵巢中表达定位
被引量：
3
1
作者
张燕燕
王靖雷
潘阳阳
马文斌
高丽青
张辉
李心蕊
余四九
徐庚全
机构
甘肃农业大学动物医学院/甘肃省牛羊胚胎工程技术研究中心
出处
《动物医学进展》
北大核心
2021年第9期35-42,共8页
基金
国家自然科学基金项目(31972760)
甘肃省教育厅产业支撑引导项目(2019C-03)
甘肃省教育厅创新能力提升项目(2019B-081)。
文摘
为探究正常生理下条件下溶血磷脂酸受体(LPAR)1-3在牦牛不同时期卵巢(卵泡期、黄体期、妊娠期)表达及生物学作用,利用RT-qPCR检测LPAR1-3基因在不同时期卵巢上的表达,同时利用蛋白质免疫印迹、免疫组织化学(IHC)等方法对LPAR1-3基因和蛋白的表达进行分析和定位。结果显示,LPAR1-3在牦牛不同时期卵巢上均有表达,其中LPAR1-3的表达量在妊娠期显著高于卵泡期和黄体期(P<0.05),卵泡期表达量最低;在卵泡期、黄体期、妊娠期LPAR3的表达量均显著高于LPAR1和LPAR2(P<0.05),LPAR2的表达量最低;IHC结果显示,LPAR1-3在卵巢生殖上皮、颗粒细胞、卵泡液、卵泡膜和黄体细胞均有表达。研究结果提示LPAR1-3可能在卵泡生长、发育、排卵以及维持妊娠等一系列生殖过程中发挥重要的作用,其中LPAR3可能在这一过程中起主要作用,该结果有助于对牦牛繁殖机能的进一步研究,可为高原哺乳动物生殖生理的研究提供理论依据。
关键词
牦牛
溶血磷脂酸受体-1
溶血磷脂酸受体-2
溶血磷脂酸受体-3
卵巢
Keywords
yak
lysophosphatidic acid receptor-1
lysophosphatidic acid receptor-2
lysophosphatidic acid receptor-3
ovary
分类号
S852.21 [农业科学—基础兽医学]
S858.21 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
牦牛Fas相关因子1多克隆抗体制备及初步应用
2
作者
王静瑜
潘阳阳
徐庚全
张瑞
张文兰
王筱珊
乌仁套迪
照日格图
崔燕
余四九
机构
甘肃农业大学动物医学院/甘肃省牛羊胚胎工程技术研究中心
阿拉善盟畜牧
研究
所
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第8期3369-3382,共14页
基金
甘肃省重大科技专项(21ZD10NA001)
甘肃省重点人才项目(2022-0623-RCC-0307)
+1 种基金
甘肃省教育厅产业支撑引导项目(2019C-03)
甘肃农业大学青年导师基金(GAU-QDFC-2022-02)。
文摘
Fas相关因子1(Fas-associated factor-1,FAF1)为Fas家族成员,含有数个多功能结构域,可参与细胞凋亡、炎症、坏死、细胞增殖和蛋白质稳态等生物学过程。本研究旨在制备牦牛FAF1多克隆抗体,探索FAF1在牦牛不同年龄睾丸组织及不同繁殖周期卵巢的生物学作用。试验扩增出牦牛FAF 1基因全序列,构建牦牛pET28a-FAF1蛋白原核表达载体,优化诱导条件,通过Ni-NTA柱纯化后,免疫试验动物,获得兔源FAF1多克隆抗体。选取幼年(1、2周岁)、成年(3、4、6、7周岁)、老年(11周岁)三个年龄段雄性牦牛睾丸,选取不同繁殖周期(卵泡期、黄体期和妊娠期)雌性牦牛卵巢,采用实时荧光定量、Western blot、免疫组织化学(IHC)方法分别检测不同年龄雄性牦牛睾丸及不同繁殖周期雌性牦牛卵巢中FAF1 mRNA、蛋白相对表达量及蛋白的表达定位。结果表明,成功构建原核表达载体pET28a-FAF1,25℃、IPTG浓度为0.5 mmol·L^(-1)诱导5 h为最优诱导条件,该重组蛋白主要存在于包涵体中,免疫试验动物后获得兔源FAF1多克隆抗体,抗体效价为1∶1024000,特异性良好。睾丸组织实时荧光定量结果显示,FAF1 mRNA在3、4、7周岁雄性牦牛睾丸组织中相对表达量显著高于其他年龄段;睾丸组织Western blot结果显示,FAF1蛋白在11周岁时相对蛋白表达量显著高于其他年龄段,6、7周岁次之,3、4周岁FAF1相对蛋白表达量最低;睾丸组织免疫组织化学结果显示,FAF1主要表达于精子、精子细胞、精原细胞、初级精母细胞、支持细胞、睾丸间质细胞和管周肌样细胞中。卵巢组织实时荧光定量结果显示,雌性牦牛黄体期卵巢FAF1 mRNA相对表达量显著高于卵泡期和妊娠期,妊娠期卵巢次之,卵泡期卵巢最低;卵巢Western blot结果显示,卵泡期和妊娠期卵巢FAF1蛋白相对表达量显著高于黄体期,卵泡期卵巢表达量最高,妊娠期卵巢次之,黄体期卵巢中表达量最低;卵巢IHC结果显示FAF1主要表达于卵巢生殖上皮细胞、颗粒细胞、卵丘细胞、卵泡膜细胞和黄体细胞。FAF1 mRNA和蛋白在不同年龄睾丸及不同繁殖周期卵巢组织存在显著差异化表达,综上推测,FAF1可能与雄性牦牛的睾丸发育、精子发生及睾酮分泌密切相关,与雌性牦牛的卵泡闭锁、发育、成熟和黄体溶解生理过程相关,本研究为更进一步探索FAF1在牦牛生殖生理功能方面提供依据。
关键词
牦牛
FAF1
原核表达
多克隆抗体
应用
Keywords
yak(Bos grunnien)
FAF1
prokaryotic expression
polyclonal antibody
application
分类号
S823.853 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
溶血磷脂酸受体1-3在牦牛不同时期卵巢中表达定位
张燕燕
王靖雷
潘阳阳
马文斌
高丽青
张辉
李心蕊
余四九
徐庚全
《动物医学进展》
北大核心
2021
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
牦牛Fas相关因子1多克隆抗体制备及初步应用
王静瑜
潘阳阳
徐庚全
张瑞
张文兰
王筱珊
乌仁套迪
照日格图
崔燕
余四九
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
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