检索结果-维普期刊中文期刊服务平台

基因芯片方法检测6种动物源性人兽共患病病原被引量：5: 1; 作者王振全罗宝正 +4 位作者薄清如徐海聂沙才华廖秀云陈伟生《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期804-807,共4页; 为了建立可同时检测H5亚型禽流感病毒、狂犬病病毒、猪链球菌2型、炭疽芽孢杆菌、沙门氏菌、大肠杆菌O157的基因芯片检测方法,本实验根据GenBank中上述6种病原的基因序列,设计并合成了特异性的引物和探针。采用点样法制备杂交芯片,将上... 展开更多; 关键词基因芯片人兽共患病检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

TaqMan探针荧光RT-PCR检测狂犬病病毒被引量：5: 2; 作者王振全罗宝正 +5 位作者薄清如周昌芳白鸽许远靖王冲吴殿君《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第6期79-82,共4页; 根据GenBank已公布的狂犬病病毒(rabies virus,RV)核蛋白(N)基因序列设计并合成一对特异性的引物和探针,建立基于TaqMan探针的荧光RT-PCR检测狂犬病病毒方法。对狂犬病疫苗提取核酸后进行RT-PCR扩增,将目的条带切胶回收,克隆测序,重组... 展开更多; 关键词狂犬病病毒 TAQMAN探针荧光RT-PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

多重RT-PCR方法检测新型甲型H_1N_1流感病毒的研究: 3; 作者罗吉新李海妙 +3 位作者林志达王振全苏惠龙罗宝正《湖北畜牧兽医》 2010年第10期8-11,共4页; 为了建立快速检测新型甲型H1N1流感病毒的多重PCR技术,根据GenBank中公布甲型H1N1流感病毒(2009年流行株)的HA和NA基因序列,设计并合成两套特异性引物。使用TaKaRa公司的一步法RT-PCR试剂盒和自行设计合成的引物建立多重RT-PCR反应,按... 展开更多; 关键词多重RT-PCR 甲型流感病毒 H1N1亚型; 在线阅读下载PDF 职称材料

TaqMan探针荧光PCR检测副猪嗜血杆菌方法的建立和应用被引量：5: 4; 作者罗宝正王振全 +4 位作者薄清如徐海聂沙才华廖秀云陈伟生《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第6期1367-1370,共4页; 为了建立基于TaqMan探针荧光PCR技术检测副猪嗜血杆菌的方法,本试验参考GenBank已发表的副猪嗜血杆菌(Hemophilus parasuis,HPS)转录起始因子infB基因序列,利用生物学软件Primer Express 2.0设计特异性引物和探针;并对副猪嗜血杆菌标准... 展开更多; 关键词副猪嗜血杆菌荧光PCR 检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

实时荧光RT-PCR鉴别检测美洲型PRRSV及其变异株被引量：3: 5; 作者罗宝正王连想 +3 位作者薄清如王爱民徐海聂黄好兴《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第5期18-21,共4页; 本研究建立了美洲型猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syn-drome virus,PRRSV）通用实时荧光RT-PCR和PRRSV变异株特异性实时荧光RT-PCR检测方法,对方法的灵敏度和特异性进行了验证,并对24个临床可疑... 展开更多; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株实时荧光RT-PCR 鉴别诊断; 在线阅读下载PDF 职称材料

Taqman探针荧光PCR法检测熊源性成分被引量：2: 6; 作者邵建宏罗宝正 +6 位作者薄清如赵福振帖丽莎徐海聂廖秀云彭玉芬陈敬《野生动物学报》北大核心 2017年第4期575-579,共5页; 为了对熊源性成分进行有效鉴定,本研究根据熊科动物线粒体DNA(mtDNA)序列,使用分子生物学软件Primer Express 3.0设计了一套特异性引物、探针,用以建立Taqman探针荧光PCR检测熊源性成分的方法。结果显示,所建立方法特异性强,15份熊属动... 展开更多; 关键词熊源性成分荧光PCR 检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

多重荧光PCR鉴别诊断猪瘟病毒和非洲猪瘟病毒被引量：9: 7; 作者陈静静罗宝正 +5 位作者沙才华廖秀云王振全陈伟生徐海聂薄清如《湖北畜牧兽医》 2012年第2期4-6,9,共4页; 为了建立一种快速、灵敏、特异的能够同时检测猪瘟病毒和非洲猪瘟病毒的多重荧光PCR方法,根据GenBank中公布的猪瘟病毒基因序列,设计一套特异性的引物和探针,对猪瘟病料提取RNA,经RT-PCR扩增后将产物回收,克隆至pMD18-T构建pMD18-T-CSF... 展开更多; 关键词猪瘟病毒非洲猪瘟病毒多重荧光PCR 检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

犀牛源性成分PCR检测方法的建立被引量：1: 8; 作者邵建宏赵福振 +4 位作者罗宝正薄清如沙才华廖秀云徐海聂《野生动物学报》北大核心 2016年第4期316-320,共5页; 为了对犀牛源性成分进行有效鉴定,根据犀科(Rhinocerotidae)动物线粒体DNA(mitochondrial DNA)序列,使用分子生物学软件Oligo 7.0设计了特异性引物,用来建立PCR检测犀牛源性成分的方法。结果显示,建立的PCR方法可以对犀牛阳性样品进行扩... 展开更多; 关键词犀牛源性成分 PCR 检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

Taqman探针荧光PCR检测鲨鱼源性成分被引量：3: 9; 作者陈轩廖秀云 +6 位作者陶旻罗宝正薄清如沙才华黄海超徐海聂杨素《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1083-1088,共6页; 针对鲨鱼产品掺杂造假增多而缺乏有效鉴定技术的情况,作者根据Gen Bank中鲨鱼基因的线粒体DNA(mt DNA)序列,使用分子生物学软件Primer Express 2.0设计了一套特异性引物和探针,用来建立Taqman探针荧光PCR检测鲨鱼源性成分的方法。结果表... 展开更多; 关键词鲨鱼源性成分 TAQMAN探针荧光PCR 检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基因芯片方法检测6种动物源性人兽共患病病原被引量：5: 1; 作者王振全罗宝正薄清如徐海聂沙才华廖秀云陈伟生; 机构吉林大学农学部畜牧兽医学院珠海出入境检验检疫局国家外来病检测重点实验室; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期804-807,共4页; 基金广东省科技计划项目(2009B030801075); 文摘为了建立可同时检测H5亚型禽流感病毒、狂犬病病毒、猪链球菌2型、炭疽芽孢杆菌、沙门氏菌、大肠杆菌O157的基因芯片检测方法,本实验根据GenBank中上述6种病原的基因序列,设计并合成了特异性的引物和探针。采用点样法制备杂交芯片,将上述病原扩增产物混合后与芯片杂交。杂交结果显示,针对本试验中6种人兽共患传染病所设计的寡核苷酸探针可特异性识别靶基因,与其他常见病原体之间没有交叉反应。检测的灵敏度在1.38×10-5 pg/μL～151 pg/μL之间。将建立的基因芯片检测方法对临床样品进行检测,结果与荧光PCR方法一致。; 关键词基因芯片人兽共患病检测; Keywords microarray zoonosis detection; 分类号 S851.34 [农业科学—预防兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名TaqMan探针荧光RT-PCR检测狂犬病病毒被引量：5: 2; 作者王振全罗宝正薄清如周昌芳白鸽许远靖王冲吴殿君; 机构吉林大学农学部畜牧兽医学院珠海出入境检验检疫局国家外来病检测重点实验室; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第6期79-82,共4页; 基金广东省科技计划项目(2009B030801075); 文摘根据GenBank已公布的狂犬病病毒(rabies virus,RV)核蛋白(N)基因序列设计并合成一对特异性的引物和探针,建立基于TaqMan探针的荧光RT-PCR检测狂犬病病毒方法。对狂犬病疫苗提取核酸后进行RT-PCR扩增,将目的条带切胶回收,克隆测序,重组质粒作为标准阳性对照。对建立的TaqMan探针荧光RT-PCR方法做灵敏度、特异性、重复性及稳定性试验。结果显示,该方法可以达到10拷贝/μL的灵敏度,可以将狂犬病病毒与犬瘟热病毒、犬细小病毒、犬腺病毒、犬冠状病毒和犬副流感病毒分开,方法重复性好,稳定可靠。; 关键词狂犬病病毒 TAQMAN探针荧光RT-PCR; Keywords rabies virus TaqMan probe real-time RT-PCR; 分类号 S854.4 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名多重RT-PCR方法检测新型甲型H_1N_1流感病毒的研究: 3; 作者罗吉新李海妙林志达王振全苏惠龙罗宝正; 机构三统万福(青岛)食品有限公司广东省珠海出入境检验检疫局/国家外来病检测重点实验室吉林大学畜牧兽医学院; 出处《湖北畜牧兽医》 2010年第10期8-11,共4页; 文摘为了建立快速检测新型甲型H1N1流感病毒的多重PCR技术,根据GenBank中公布甲型H1N1流感病毒(2009年流行株)的HA和NA基因序列,设计并合成两套特异性引物。使用TaKaRa公司的一步法RT-PCR试剂盒和自行设计合成的引物建立多重RT-PCR反应,按照预期的PCR产物序列合成的DNA作为阳性对照。结果表明,该方法具有良好的特异性,可以将甲型H1N1流感病毒(2009年流行株)与传统甲型H1N1、H3N2、H5N1、H6N2和H9N2亚型流感病毒区分。该方法同时具有较高的灵敏度,最低可以检测到100个拷贝的阳性克隆质粒。在对183份发热病人临床咽拭子样品检测中发现了10份阳性样品,对350份猪鼻腔拭子样品检测全部呈阴性,结果与中国检验检疫科学研究院试剂盒检测结果一致,说明了该多重RT-PCR方法在临床检测新型甲型H1N1流感病毒方面具有广阔的应用前景。; 关键词多重RT-PCR 甲型流感病毒 H1N1亚型; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名TaqMan探针荧光PCR检测副猪嗜血杆菌方法的建立和应用被引量：5: 4; 作者罗宝正王振全薄清如徐海聂沙才华廖秀云陈伟生; 机构珠海出入境检验检疫局国家外来病检测重点实验室吉林大学农学部畜牧兽医学院; 出处《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第6期1367-1370,共4页; 文摘为了建立基于TaqMan探针荧光PCR技术检测副猪嗜血杆菌的方法,本试验参考GenBank已发表的副猪嗜血杆菌(Hemophilus parasuis,HPS)转录起始因子infB基因序列,利用生物学软件Primer Express 2.0设计特异性引物和探针;并对副猪嗜血杆菌标准菌株提取DNA后进行PCR扩增,将产物测序鉴定后克隆到pMD18-T载体,再转化到大肠杆菌感受态细胞,细菌培养后对菌液进行PCR扩增,把产物测序鉴定后获得的重组质粒作为标准阳性对照;最后将建立的TaqMan探针荧光PCR方法进行灵敏度、特异性、稳定性试验。结果显示,该检测方法可以达到1μl 1.0×101拷贝数量级的灵敏度;另外,该方法可以将HPS和大肠杆菌O157、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、猪链球菌分开,特异性良好;稳定性试验显示,2次批内变异系数分别为0.65%和0.92%,批间变异系数为1.31%,稳定性良好。对口岸送检的56份猪肉和12份血浆蛋白粉样品进行检测,结果表明TaqMan探针荧光PCR方法和细菌分离方法的检测效果一致。; 关键词副猪嗜血杆菌荧光PCR 检测; Keywords Hemophilus parasuis real-time PCR detection; 分类号 S855.1 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名实时荧光RT-PCR鉴别检测美洲型PRRSV及其变异株被引量：3: 5; 作者罗宝正王连想薄清如王爱民徐海聂黄好兴; 机构珠海出入境检验检疫局国家外来病检测重点实验室广东温氏食品集团有限公司珠海市农业局; 出处《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第5期18-21,共4页; 基金国家质检总局重大科技专项子课题"高致病性猪蓝耳病鉴别诊断技术研究"(2008IK262-2); 文摘本研究建立了美洲型猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syn-drome virus,PRRSV）通用实时荧光RT-PCR和PRRSV变异株特异性实时荧光RT-PCR检测方法,对方法的灵敏度和特异性进行了验证,并对24个临床可疑样品进行检测。结果显示,实时荧光RT-PCR可以检测到0.47 TCID50的病毒培养液,灵敏度略高于病毒分离方法;两个实时荧光RT-PCR都具有良好的特异性,无交叉反应。在对24个临床可疑样品的检测中,阳性率与病毒分离方法一致（21/24）,检测时间也缩短为70 min。本研究建立的方法有潜力应用于传统美洲型PRRSV及其变异株（NSP2 1594~1680缺失）感染引起的PRRS和高致病性PRRS的监测和鉴别诊断。; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株实时荧光RT-PCR 鉴别诊断; Keywords PRRSV variant strain real-time RT-PCR differential detection; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Taqman探针荧光PCR法检测熊源性成分被引量：2: 6; 作者邵建宏罗宝正薄清如赵福振帖丽莎徐海聂廖秀云彭玉芬陈敬; 机构珠海出入境检验检疫局; 出处《野生动物学报》北大核心 2017年第4期575-579,共5页; 文摘为了对熊源性成分进行有效鉴定,本研究根据熊科动物线粒体DNA(mtDNA)序列,使用分子生物学软件Primer Express 3.0设计了一套特异性引物、探针,用以建立Taqman探针荧光PCR检测熊源性成分的方法。结果显示,所建立方法特异性强,15份熊属动物组织样品均出现特异性扩增曲线,20份阴性对照动物样品均未出现扩增曲线;方法灵敏度高,最低可以检测到10个拷贝数量级的重组质粒DNA,对熊胆粉稀释106倍后,仍可扩增出熊DNA;方法稳定性好,对相同的样品在不同时间进行2次重复检测,批内变异系数分别为0.88%、1.13%,批间变异系数为1.38%。结果表明,本研究建立的方法可应用于熊属动物组织及其加工品中的熊源性成分的检测。; 关键词熊源性成分荧光PCR 检测; Keywords Ursus Derived ingredientsReal - time PCR Detecting; 分类号 Q523.8 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名多重荧光PCR鉴别诊断猪瘟病毒和非洲猪瘟病毒被引量：9: 7; 作者陈静静罗宝正沙才华廖秀云王振全陈伟生徐海聂薄清如; 机构珠海出入境检验检疫局/国家外来病检测重点实验室; 出处《湖北畜牧兽医》 2012年第2期4-6,9,共4页; 文摘为了建立一种快速、灵敏、特异的能够同时检测猪瘟病毒和非洲猪瘟病毒的多重荧光PCR方法,根据GenBank中公布的猪瘟病毒基因序列,设计一套特异性的引物和探针,对猪瘟病料提取RNA,经RT-PCR扩增后将产物回收,克隆至pMD18-T构建pMD18-T-CSFV阳性质粒;非洲猪瘟的目的片段序列采用化学合成,构建pMD18-T-ASFV阳性质粒。以两种阳性质粒为模板对建立的多重荧光PCR方法做特异性、灵敏度和重复性试验,结果表明该方法可以将猪瘟病毒和非洲猪瘟病毒同口蹄疫病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪水泡病病毒、猪圆环病毒2型区分开,灵敏度可以达到10拷贝的数量级,而且方法稳定。对2份已知猪瘟阳性血清样品和120份猪内脏、猪鼻腔拭子及血清样品检测后,发现对已知阳性样品的检测结果符合预期目标,未知样品检出猪瘟病毒3份阳性,未检出非洲猪瘟病毒阳性。; 关键词猪瘟病毒非洲猪瘟病毒多重荧光PCR 检测; 分类号 S858.28 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名犀牛源性成分PCR检测方法的建立被引量：1: 8; 作者邵建宏赵福振罗宝正薄清如沙才华廖秀云徐海聂; 机构珠海出入境检验检疫局; 出处《野生动物学报》北大核心 2016年第4期316-320,共5页; 基金国家质检总局科技项目(项目编号2014IK234)资助; 文摘为了对犀牛源性成分进行有效鉴定,根据犀科(Rhinocerotidae)动物线粒体DNA(mitochondrial DNA)序列,使用分子生物学软件Oligo 7.0设计了特异性引物,用来建立PCR检测犀牛源性成分的方法。结果显示,建立的PCR方法可以对犀牛阳性样品进行扩增,凝胶电泳呈现特异性条带。方法特异性好,13份其他物种的样品均为阴性结果。方法灵敏度较高,可检测到100拷贝重组质粒DNA模板。对5份送检样品检测发现2份犀牛样品,与测序结果一致。结果表明,新建立的方法可应用于样品中犀牛源性成分的检测。; 关键词犀牛源性成分 PCR 检测; Keywords Rhinoceros-derived ingredients PCR Detecting; 分类号 Q953.5 [生物学—动物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Taqman探针荧光PCR检测鲨鱼源性成分被引量：3: 9; 作者陈轩廖秀云陶旻罗宝正薄清如沙才华黄海超徐海聂杨素; 机构珠海出入境检验检疫局国家外来病检测重点实验室; 出处《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1083-1088,共6页; 基金珠海出入境检验检疫局资助项目(ZH2013-2); 文摘针对鲨鱼产品掺杂造假增多而缺乏有效鉴定技术的情况,作者根据Gen Bank中鲨鱼基因的线粒体DNA(mt DNA)序列,使用分子生物学软件Primer Express 2.0设计了一套特异性引物和探针,用来建立Taqman探针荧光PCR检测鲨鱼源性成分的方法。结果表明,对13份已鉴定为鲨鱼鱼翅的样品进行检测,全部出现特异性扩增曲线,阴性对照没有荧光增长。方法特异性强,对市场购买的12份鲨鱼源性样品及9份其他鱼类样品进行检测,12份鲨鱼样品均出现荧光扩增曲线,而非鲨鱼样品均未出现荧光增长;方法灵敏度较高,可检测到的最低质粒拷贝数量级为10拷贝/μL;方法快速准确,操作简便,重复性好,稳定可靠,可应用于市场上鱼翅等常见鲨鱼源性产品的真假鉴定。; 关键词鲨鱼源性成分 TAQMAN探针荧光PCR 检测; Keywords shark derived material Taqman probe fluorescent PCR detection; 分类号 O657.3 [理学—分析化学] TS254.7 [轻工技术与工程—水产品加工及贮藏工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	基因芯片方法检测6种动物源性人兽共患病病原	王振全罗宝正薄清如徐海聂沙才华廖秀云陈伟生	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2011	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	TaqMan探针荧光RT-PCR检测狂犬病病毒	王振全罗宝正薄清如周昌芳白鸽许远靖王冲吴殿君	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2012	5	在线阅读下载PDF 职称材料
3	多重RT-PCR方法检测新型甲型H_1N_1流感病毒的研究	罗吉新李海妙林志达王振全苏惠龙罗宝正	《湖北畜牧兽医》	2010	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	TaqMan探针荧光PCR检测副猪嗜血杆菌方法的建立和应用	罗宝正王振全薄清如徐海聂沙才华廖秀云陈伟生	《江苏农业学报》 CSCD 北大核心	2011	5	在线阅读下载PDF 职称材料
5	实时荧光RT-PCR鉴别检测美洲型PRRSV及其变异株	罗宝正王连想薄清如王爱民徐海聂黄好兴	《动物医学进展》 CSCD 北大核心	2011	3	在线阅读下载PDF 职称材料
6	Taqman探针荧光PCR法检测熊源性成分	邵建宏罗宝正薄清如赵福振帖丽莎徐海聂廖秀云彭玉芬陈敬	《野生动物学报》北大核心	2017	2	在线阅读下载PDF 职称材料
7	多重荧光PCR鉴别诊断猪瘟病毒和非洲猪瘟病毒	陈静静罗宝正沙才华廖秀云王振全陈伟生徐海聂薄清如	《湖北畜牧兽医》	2012	9	在线阅读下载PDF 职称材料
8	犀牛源性成分PCR检测方法的建立	邵建宏赵福振罗宝正薄清如沙才华廖秀云徐海聂	《野生动物学报》北大核心	2016	1	在线阅读下载PDF 职称材料
9	Taqman探针荧光PCR检测鲨鱼源性成分	陈轩廖秀云陶旻罗宝正薄清如沙才华黄海超徐海聂杨素	《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心	2015	3	在线阅读下载PDF 职称材料