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一种基于SDS溶液高效提取土壤残留Bt蛋白的方法
被引量：
3
1
作者
方志翔
孟军
+1 位作者
贺昭和
刘标
《生态与农村环境学报》
CAS
CSSCI
CSCD
北大核心
2011年第1期84-87,共4页
通过对SDS浓度、孵育温度和孵育时间3种提取条件的研究,建立了一种基于SDS溶液的提取土壤中残留Bt蛋白的方法(简称SDS法)。在ρ(SDS)为2 g.L-1、孵育温度为50℃、孵育时间≥4 h条件下,采用SDS法可有效地从不同类型土壤样品中提取残留Bt...
通过对SDS浓度、孵育温度和孵育时间3种提取条件的研究,建立了一种基于SDS溶液的提取土壤中残留Bt蛋白的方法(简称SDS法)。在ρ(SDS)为2 g.L-1、孵育温度为50℃、孵育时间≥4 h条件下,采用SDS法可有效地从不同类型土壤样品中提取残留Bt蛋白,提取效果明显好于碳酸盐法、人造蠕虫肠道蛋白提取液法和PBST(phosphate buffer solution with Tween-20)法。
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关键词
SDS溶液
BT蛋白
提取
土壤
碳酸盐法
人造蠕虫肠道蛋白提取液法
PBST法
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职称材料
以Ypt1基因为靶标的致病疫霉菌Phytophthora infestans的分子检测
被引量：
3
2
作者
孟军
《江苏农业学报》
CSCD
北大核心
2012年第1期46-53,共8页
三磷酸鸟苷(GTP)结合蛋白基因(Ypt1)是一个与原癌基因Ras(Rat sarcoma)相关的基因,在酵母中,该基因编码一个与Ras相关GTP结合蛋白。为了研究以Ypt1基因为分子靶标的致病疫霉菌(P.infestans)检测技术,比较了30种卵菌Ypt1基因的序列,以该...
三磷酸鸟苷(GTP)结合蛋白基因(Ypt1)是一个与原癌基因Ras(Rat sarcoma)相关的基因,在酵母中,该基因编码一个与Ras相关GTP结合蛋白。为了研究以Ypt1基因为分子靶标的致病疫霉菌(P.infestans)检测技术,比较了30种卵菌Ypt1基因的序列,以该序列为靶标设计了1对针对P.infestans的特异性PCR引物Pi1/Pi2。试验结果表明,在供试的55种不同疫霉菌和真菌的144个菌株中,利用这1对引物只能从P.infestans基因组DNA中分别扩增出1条分子量为369 bp的特异性条带,这1对引物的检测灵敏度为100 pg。以疫霉菌Ypt1通用引物Yph1F/Yph2R结合这1对特异引物进行套式PCR扩增,使引物Pi1/Pi2的检测灵敏度提高了10倍,检测到10 pg的基因组DNA。通过套式PCR,引物Pi1/Pi2对游动孢子和卵孢子的检测灵敏度分别为3个游动孢子和1个卵孢子;以Pi1/Pi2引物,分别采用单轮PCR和套式PCR可检测马铃薯发病组织和病田土壤的致病疫霉。以上结果证明Ypt1基因适合作为疫霉菌分子检测靶标。采用以这1对特异引物建立的以PCR技术为基础的分子检测方法,可对田间土壤和发病植物组织中的P.infestans进行快速、灵敏的检测。
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关键词
致病疫霉
Ypt1基因
分子检测
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职称材料
题名
一种基于SDS溶液高效提取土壤残留Bt蛋白的方法
被引量：
3
1
作者
方志翔
孟军
贺昭和
刘标
机构
环境保护部南京环境科学研究所国家生物安全重点实验室
出处
《生态与农村环境学报》
CAS
CSSCI
CSCD
北大核心
2011年第1期84-87,共4页
基金
转基因生物新品种培育科技重大专项(2008ZX08012-004
2008ZX08012-005
2008ZX08011-002)
文摘
通过对SDS浓度、孵育温度和孵育时间3种提取条件的研究,建立了一种基于SDS溶液的提取土壤中残留Bt蛋白的方法(简称SDS法)。在ρ(SDS)为2 g.L-1、孵育温度为50℃、孵育时间≥4 h条件下,采用SDS法可有效地从不同类型土壤样品中提取残留Bt蛋白,提取效果明显好于碳酸盐法、人造蠕虫肠道蛋白提取液法和PBST(phosphate buffer solution with Tween-20)法。
关键词
SDS溶液
BT蛋白
提取
土壤
碳酸盐法
人造蠕虫肠道蛋白提取液法
PBST法
Keywords
SDS buffer
Bt protein
extraction
soil
carbonate method
invertebrate gut fluid chemistry
phosphate buffer solution with Tween-20
分类号
X53 [环境科学与工程—环境工程]
Q-3 [生物学]
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职称材料
题名
以Ypt1基因为靶标的致病疫霉菌Phytophthora infestans的分子检测
被引量：
3
2
作者
孟军
机构
环境保护部南京环境科学研究所国家生物安全重点实验室
出处
《江苏农业学报》
CSCD
北大核心
2012年第1期46-53,共8页
基金
转基因生物新品种培育重大专项(2008ZX08012-005
2008ZX08012-004)
文摘
三磷酸鸟苷(GTP)结合蛋白基因(Ypt1)是一个与原癌基因Ras(Rat sarcoma)相关的基因,在酵母中,该基因编码一个与Ras相关GTP结合蛋白。为了研究以Ypt1基因为分子靶标的致病疫霉菌(P.infestans)检测技术,比较了30种卵菌Ypt1基因的序列,以该序列为靶标设计了1对针对P.infestans的特异性PCR引物Pi1/Pi2。试验结果表明,在供试的55种不同疫霉菌和真菌的144个菌株中,利用这1对引物只能从P.infestans基因组DNA中分别扩增出1条分子量为369 bp的特异性条带,这1对引物的检测灵敏度为100 pg。以疫霉菌Ypt1通用引物Yph1F/Yph2R结合这1对特异引物进行套式PCR扩增,使引物Pi1/Pi2的检测灵敏度提高了10倍,检测到10 pg的基因组DNA。通过套式PCR,引物Pi1/Pi2对游动孢子和卵孢子的检测灵敏度分别为3个游动孢子和1个卵孢子;以Pi1/Pi2引物,分别采用单轮PCR和套式PCR可检测马铃薯发病组织和病田土壤的致病疫霉。以上结果证明Ypt1基因适合作为疫霉菌分子检测靶标。采用以这1对特异引物建立的以PCR技术为基础的分子检测方法,可对田间土壤和发病植物组织中的P.infestans进行快速、灵敏的检测。
关键词
致病疫霉
Ypt1基因
分子检测
Keywords
Phytophthora infestans
Ypt1 gene
molecular detection
分类号
S435.32 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
Q93-331 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一种基于SDS溶液高效提取土壤残留Bt蛋白的方法
方志翔
孟军
贺昭和
刘标
《生态与农村环境学报》
CAS
CSSCI
CSCD
北大核心
2011
3
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职称材料
2
以Ypt1基因为靶标的致病疫霉菌Phytophthora infestans的分子检测
孟军
《江苏农业学报》
CSCD
北大核心
2012
3
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已选择
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